Способ прогнозирования рубцевания язв у больных язвенной болезнью желудка Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится .к медицине, в частности к клинической гастроэнтерологии.

Цель изобретения - повышение эффективности способа за счет повышения точности и сокращение сроков прогноза.

Способ осуществляют следующим образом.

У больного из вены локтевого сгиба берется 5 мл крови в пробирку со 125 ед. гепарина. Кровь разводят средой - 199 в отношении 1:3, наслаивают на градиент фи- колверографина плотностью 1077 г/л и центрифугируют в течение 20 мин при 400 g и 4° С. После центрифугирования слой моно- нуклеаров, располагающихся над фиколве- рографином, собирают в центрифужную пробирку и проводят 3 отмывки клеточной

суспензии мононуклеаров средой - 199 в течение 10 мин при 200 g и 4° С. После этого суспензию клеток доводят средой до концентрации 2 X 10 в 1 мл. В пластиковые пробирки диаметром 0,5 СМ вносят по 0,2 мл суспензии. При этом в одну из пробирок добавляют 0,2 мл 5 х 10 моль/л раствора теофиллина в среде-199, а во вторую -0,2 мм среды без теофиллина.Об.е пробирки инкубируют в течение 120 мин в термостате при 37° С. Затем проводят 2 отмывки клеточной суспензии средай-199 и в каждую пробирку добавляют по 0,2 мл 0,5%-ной суспензии троекратно отмытых от консерванта бараньих эритроцитов. Затем проводится инкубация суспензий в термостате в течение 7 мин при 37° С с последующим центрифугированием при 200 g в течение 5 мин при 20° С.

с о

СА) СО

О

После центрифугирования пробирки помещают в холодильник (2° С) на 2 ч. Образовавшийся клеточный осадок осторожно ресуспендируют и добавляют 0.4 мл 0,6%- ного раствора глютаральдегида, приготовленного на забуференном физиологическом растворе. После 20 мин инкубации при 20° С проводят отмывку суспензий от глютараль- дегид забуференным физиологическим раствором. Из осадка готовят мазки. После окраски азур 11-эозином с помощью иммерсионного исследования под микроскопом в мазках проводят подсчет 200 лимфоцитов, среди которых выделяют розеткообразую- щие клетки (лимфоциты, присоединившие три и более эритроцитов). Субпопуляция ро- зеткообразующих лимфоцитов, выявленная без добавления теофиллина, представляет собой Т-лимфоциты. Субпопуляция розет- кообразующих лимфоцитов,предварительно инкубированных с теофиллином, представляет собой теофиллинрезистентные Т-лимфоциты. Содержание теофиллин- резистентных Т-лимфоцитов рассчитывается в процентах по отношению к общему числу Т-лимфоцитов.

П р и м е р 1. Больной К., 60 лет. При поступлении беспокоили боли в подложечной области, не связанные с приемом пищи. Болен в течение года. При рентгенологическом и эндоскопическрм исследованиях была выявлена язва в субкардиальном отделе желудка размерами 1,5 х 1,5 см. Доброкачественный характер язвы подтвержден гистологическим .исследованием биопта- тов. Начато лечение сукральфатом в суточной дозе 4,0 г. На. 7-мые сут от начала лечения проведено исследование содержания теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов в периферической крови. При зтом их содержание составило 93,9%. Это позволило прогнозировать рубцевание язвы. При контрольном зндоскопическом исследовании на 37-й день с момента начала лечения на месте язвы обнаружен звёздчатый красный рубец. Больной выписан в удовлетворительном состоянии.,

П р и м е р 2. Больной Д., 39 лет. При поступлении жалоб не предъявлял. Язвенной болезнью страдает в течение 6 лет, обострения заболевания характеризуются

медленным рубцеванием язвы (в сроки свыше 3,5 мес). Последнеее обострение в течение 1 мес. При эндоскопическом исследовании выявлена язва в области угла желуд- ка размерами 1,0 х 0,9 см. Начато лечение сукральфатом в суточной дозе 4,0 г. На 7- мые сут лечения определено содержание теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов в периферической крови, которое состави- 0 ло 77,8%. Это позволило прогнозировать у больного труднорубцующуюся язву. Действительно, несмотря на продолжительное лечение (в течение 3-х мес) с применением в дальнейшем резервных способов терапии (в 5 частности гипербарической оксигенации) рубцевания язвы достигнуто не было.

Таким образом, предлагаемый способ оценки характера рубцевания язвы является сравнительно простым, доступным, до- 0 статочно надежным. Он безопасен для больного-, не имеет противопоказаний и не требует специального оборудования. В дополнение к рентгенологическому и эндоскопическому методам, предлагаемый 25 способ позволяет достаточно рано оценить эффективность противоязвенной терапии. По сравнению с прототипом увеличивается точность прогноза (для положительных результатов - 16,8%; для отрицательных - 30 на 25,2%). В то же время прогноз может быть установлен при использовании предлагаемого способа в течение 5 - 7 дн, а по прототипу только к 30 сут, т.е. время прогнозирования сокращается на 23-25 дн. 35 Формула изобретения

Способ прогнозирования рубцевания язв у больных язвенной болезнью желудка, включающий забор крови, выделение лимфоцитов, определение содержания Т-лим- 40 фоцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности способа за счет повышения точности и сокращения сроков прогноза, в крови больных дополнительно определяют количество теофиллин- 45 резистентных Т-лимфоцитов и при увеличении их количества относительно общего содержания Т-лимфоцитов свыше 90% прогнозируют рубцующуюся язву, а при их количестве 90% и ниже-труднорубцующу- 50 Юся язву.

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической гастроэнтерологии. Цель изобретения - повышение эффективности способа за счет повышения точности способа и сокращения сроков прогноза. У больного проводят забор крови, выделяют с помощью градиента на фиколверографные лимфоциты и инкубируют их в двух пробах с теофиллином и без него, затем в обе пробы добавляют эритроциты барана с последующим подсчетом розеткообразующих клеток. Затем вычисляют относительное содержание теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов по отношению к общему количеству Т-лимфоцитов, и при содержании этих клеток свыше 90% прогнозируют рубцующуюся язву желудка, а при их содержании 90% и ниже - труднорубцующуюся язву желудка. В сравнении с прототипом увеличивается точность прогноза на 16,8-25,2%, а также сокращаются сроки прогноза на 23-25 дн.