Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии Советский патент 1988 года по МПК G01N33/53 

О5

ы

Изобретение относится к области :медицины, в частности к диагностике Iкожных заболеваний.

I Цель изобретения - ранняя диаг- ностика и повьшение т.-чности. I Способ осуществляют следующим об- |разом.

I Для исследования берут 5-7 мл кро- |ви. из локтевой вены в 0,7-1,0 мл |2,7%-ногЬ раствора динатриевой соли этилендиамиктетрауксусной кислоты для {предотвращения свертьшания. Объектом исследования служат мононуклеары крови, вьщеленные методом центрифугирова ния в градиенте плотности фиколла-ве- рографина (удельная плотность 1,077 г/мл). Для вцделения мононуклеа ров кровь разводят в 1,5 раза средой

199и наслаивают на 2-3 мл фиколла- верографина.

Кровь, наслоенную на смесь фикол- ла-верографина, центрифугируют при 400 g в течение 30 мин. С интерфазной поверхности между слоями плазмы и фиколла-верографина собирают образовавшее кольцо из клеток в центрифужную пробирку и дважды отмьтают раствором Хенкса центрифугированием в течение 10 май при 200 g. Осадок ресуспенди- руют в 1 мл среды 199..Число мононук- леаров доводят до конечной концентрации клеток .в 1 мл.

Для исследования в две круглодон- iные пробирки приливают по О,1 мл приготовленной суспензии мононуклеаров. Затем к первой пробирке добавляют :0,1 мл раствора теофиллина (30 мг :Препарата следует растворить в 10 мл среды 199 при нагревании), ко вто- рой - О,1 мл среды (контрольная проба) . -Пробы инкубируют в течение 30 мин при , дважды отмывают средой 199 центрифугированием при 200 g в течение 5 мин. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткооб- разования с эритроцитами барана: к осадку приливают по О, мл среды и Oj1 мл 0,5%-ной суспензии эритроцитов барана, смесь ресуспендк- руют, выдерживают при 37 С в течение 10 мин, центрифугируют при

200g 5 мин и инкубируют при 4 С в течение 1 ч. Затем осадок осторожно ресуспендируют, взвесь помещают на предметное стекло, прикрывают покровным стеклом и подсчитывают число ро- зйткообразующих клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержащих клеток , окруженных .

тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Абсолютное количество Е-РОК вычисляют умножением относительного числа Е-РОК (в %) на число лимфоцитов 1 мм крови. Розетки, образовавшиеся в присутствии теофиллина, назьшают теофилин устойчивыми или резистентными (ТР-РОК). Разность между общим количеством Е-РОК (в контрольной пробе) и количеством ТР-РОК после обработки теофиллином принимают за теофиллинчувствительные Е-РОК.

Пример 1. Больной Б., поступил с распространенными высыпаниями язвенного характера в области голеней и бедер. Беспокоили боли в очагах поражений и обильное гнойное отделяемое. При обследовании со стороны артериальных и венозных сосудов обеих ног патологии не выявлено. Язвы продолжали увеличиваться в размерах. При неоднократном обследовании отделяемого язв на грибы диагноз глубокого микоза был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больного до лечения найдено повышенное содержание ТЧ-РОК (46% и 850 кл/мм ), что дало основание поста вить диагноз хронической язвенной пиодермии. В дальнейшем диагноз был подтвержден на основании клинического наблюдения, гистологического исследования и результатами проводимой терапии.

П р и м е р 2. Больной Б., поступил с распространенными кожными высыпаниями язвенного характера в клинику о предположительным диагнозом - глубокий микоз. Гистологическое исследование биопсийного материала и неоднократные посевы отделяемого с поверхности язв на грибы не подтвердили вышеуказанный диагноз. При иммунологическом исследовании периферической крови больного до лечения процентное и абсолютное содержание ТЧ-РОК (23% и 372 кл/мм ), что соответствовало диагнозу хронической язвенной пиодермии. В дальнейшем диагноз подтвержден клиническим наблюдением и результатами проведенного лечения.

П р и м е р 3, Больной 0., поступил в клинику с язвенным дефектом кожи на тыльной поверхности левой кисти с диагнозом - хромомикоз кожи

папилломатоз кожи

Клинические обследования путем неоднократных биопсий кожи и посевов на грибы не подтвердили вьппеуказанных

диагнозов. Иммунологическое же обсле-

дование периферической крови больного до лечения указало на наличие повышенного содержания теофшшинчувстви- тельньк клеток (36% и 535 кл/мм ), Специфическая терапия подтвердила диагноз хронической язвенно-вегетирую щей пиодермии

П р и м е р А. Больная Ч., поступила с обширным язвенным дефектом кожи левой голени с предварительным диагнозом - трофическая язва. Клинически отмечалось наличие обильного гнойно-геморрагического эксудата на поверхности очага поражения. Больную беспокоили мучительные боли, усиливающиеся при ходьбе. При обследовании венозной и артериальной систем пораженной конечности паталогии невыявлено. Диагноз трофической язвы был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больной до лечения бьшо найдено повышенное содержание теофиллинчувствитель- ных клеток (63% и 1J 47 кл/мм ), что бь1ло характерно для язвенной формы хронической пиодермии. Соответствующая терапия способствовала клиническому выздоровлению больной.

Различают следующие клинические формы язвенных пиодермии: язвенная, язвенно-вегетирующая, вегетирующая гангренозная. Все указанные клинические формы представляют собой единый патологический процесс с различной степенью тяжести течения заболевания

Для наглядной иллюстрации, что данный способ служит для диагностики

всех; форм язвенных пиодермии, клинические разновидности разделены на соответствуюпще 4 группы больных язвенной хронической (табл. 1), вегети- рующей (табл. 2), язвенно-вегетирую- щей (табл. 3) и гангренозной.(фиг.4) пиодермией.

Таким образом, предлагаемый способ оценки чувствительности Т-лимфо- цитов к теофиллину при язвенных формах хронической пиодермии может быть рекомендован в качестве диагностического способа при указанной патологии.

Предлагаемый способ прост, легко воспроизводим и не требует длительного времени (2 дня) в сравнении с известным, где исследование заиима- ,ет 6-7 дней.

У 80-85% больных предел колебаний теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов лежит в области 23-46% или 350- 850 кл/мм , что в 2-3,5 раза превышает уровень предела колебаний у здоровых лиц.

15

30 Формула изобретения

Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии путем клинико- гистологического обследования больного, от.личающийся тем, что, с целью ранней диагностики и повьше- ния точности способа, дополнительно в периферической крови определяют количество теофиллинчувствительных клеток Т-лимфоцитов и при их уровне 350 клеток/мм и более диагностируют язвенную форму хронической пиодермии.

Изобретение относится к медицине, касается диагностики кожных заболеваний. Цель изобретения - ранняя диагностика и повышение точности. Для этого пробу крови из локтевой вены помещают в 2,7%-ный р-р этилендиаминтетрауксусной кислоты, предотв ращая свертывание. Исследуют мононуклеары крови, выделенные центрифугированием в градиенте плотности фиколла - веро- графина. Затем две пробирки (одна - контроль, другая - с мононуклеарной суспензией) инкубируют 30 мин при 37 С, дважды отмывают центрифугированием при 200 д. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткооб- разования с эритроцитами барана. Подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержащих клеток, окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Розетки, образующиеся в присутствии теофиллина назьшают теофил- линустойчивыми или резистентными. При их уровне 350 клеток/мм и более определяют язвенную форму хронической пиодермии. 4 табл. i (Л с

н в в

579 867 66

Д - и

913

Таблица 1

30 43 36

600 493 533

46

459

Продолжение табл.1

С - ва 627

Контрольнаягруппа п-ЗО

Ч - ва Б - ва

403 297

Продолжение табл.2

28362

29,2+2,9548+87

12,0+1,0200+19

,001Р 0,001

ТаблнцаЗ

Таблица4

63 31

1147 352

/

Составитель Л, Шилина Редактор А, Ворович Техред Л.Олийнык

Заказ 3649/41

Тираж 847

ВИИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Продолжение табл.4

Корректор В. Гирняк

Подписное