ЛИТИЕВАЯ СОЛЬ N-n-ПРОПОКСИБЕНЗОИЛ- γ -АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩАЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1995 года по МПК C07C237/40 A61K31/16 

Изобретение относится к производным аминокислот, в частности к литиевой соли N-n-пропоксибензоил-γ-аминомасляной кислоты формулы
C₃H₇ONH(CH₂)₃COOLi, обладающей фибринолитической активностью.

Цель изобретения выявление в ряду производных аминокислот новых соединений, обладающих более высокой фибринолитической активностью.

П р и м е р 1. Хлорангидрид n-пропоксибензойной кислоты.

К охлажденной до 0-(-5)^оС смеси 36,00 г (0,2 моль) n-пропоксибензойной кислоты в 150 мл абсолютного бензола прикапывают 23,6 г (0,2 моль) хлористого тионила. Через 1 ч реакционную смесь нагревают в течение 8-10 ч, после чего бензол упаривают. Процесс повторяют трижды, остаток перегоняют при 133-135^оС/4 мм рт.ст. Выход 29,3 г (73,1%).

N-n-пропоксибензоил-γ--аминомасляная кислота.

К охлажденной до 0-5^оС смеси 5,15 г (0,05 моль) γ-аминомасляной кислоты и 50 мл 0,5 н. водного раствора гидроокиси натрия при перемешивании в течение 20-30 мин прибавляют 20 мл 0,5 н. раствора гидроокиси натрия и 9,93 г (0,05 моль) хлорангидрида n-пропоксибензойной кислоты поддерживая рН среды 8,5-9. Перемешивание продолжают в течение 5-6 ч при 5-10^оС, затем реакционную смесь экстрагируют эфиром, водный слой подкисляют до рН 3-4. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой, перекристаллизовывают из смеси этанол-вода. Выход 10,75 г (80,8%), т.пл. 109-110^оС, R_f=0,56 (бутанол: уксусная кислота:вода=3:1:1).

Литиевая соль N-n-пропоксибензоил-γ-аминомасляной кислоты (I).

К смеси 2,56 г (0,01 моль) N-n-пропоксибензоил-γ-аминомасляной кислоты в 20 мл спирта прикапывают 10%-ный раствор гидроокиси лития до рН 8,5-9. К прозрачному раствору добавляют 150 мл ацетона; отфильтровывают выпавший белый осадок, промывают ацетоном. Выход 2,41 г (89,0%), т.пл. 265-266^оС, R_f= 0,43 (бутанол:уксусная кислота:вода=8:1:2).

Найдено, C 62,14; H 7,02; N 4,46.

C₁₄H₁₈NO₄Li
Вычислено, C 61,99; H 6,68; N 5,01.

П р и м е р 2. Фибринолитическую активность соединения I изучали как на интактных крысах, так и на модели предтромботического состояния, вызванного спленэктомией.

Концентрацию фибринолизина определяли по методу Рутберга, фибринолитическую активность по методу Тульчинского. Методы основаны на определении степени лизиса фибрина до и через 24 ч после инкубации в термостате гравиметрическим методом.

Опыты ставили на 150 крысах массой 120-130 г по 8-10 животных в каждой серии опытов. Соединение I вводили внутрибрюшинно в дозах 50 и 100 мг/кг однократно в виде 5%-ного водного раствора, а также двухкратно в дозе 100 мг/кг в течение четырех дней в опытах со спленэктомией. Контрольной группе животных вводили дистиллированную воду в том же объеме. Фибринолизин вводили в дозе 1500 ед/кг однократно внутрибрюшинно, как на интактных животных, так и в опытах со спленэктомией. Фибринолитическую активность определяли через 50 мин после введения испытуемых соединений или ag.destill и через 10 мин после введения фибринолизина.

В отдельной серии опытов изучали длительность действия соединения I в сравнении с действием структурного аналога N-o-изобутоксибензоил-ε-аминокапроновой кислоты (соединение Ia) и фибринолизина (см. табл.1-3). Данные обрабатывали статистически с помощью критерия Стьюдента (Р<0,05).

Таким образом, как видно из табл.1, предлагаемое соединение I в дозе 100 мг/кг повышает фибринолитическую активность на 36% фибринолизин на 30% Соединение Ia в дозе 100 мг/кг повышает фибринолитическую активность на 50% Концентрация фибриногена под влиянием соединений I и Ia понижается.

Как видно из табл.2, длительность действия соединения I достигает 3 ч, после чего снижается. Длительность действия известного соединения Ia не более 55 мин, фибринолизина 10 мин.

Предтромботическое состояние, вызванное спленэктомией, выражается снижением фибринолитической активности. На этом фоне четырехдневное введение соединения I в дозе 100 мг/кг повышает фибринолитическую активность в 2,8 раз, в то время как соединение Ia в дозе 100 мг/кг повышает активность в 1,6 раза, в дозе 250 мг/кг в 3 раза, а фибринолизин в 1,8 раз (см. табл.3). Концентрация фибриногена как у соединения I, так и у известных соединений понижается.

При изучении острой токсичности на белых мышах массой 18-20 г выявлено, что ЛД₅₀ соединения I, вычисленная по Беренсу, равна 790±44, соединения Ia 524± 24 мг/кг.

Изобретение относится к производным аминокислот, в частности к литиевой соли g кислоты, обладающей фибринолитической активностью. Цель создание более активного нового соединения указанного класса. Синтез ведут реакцией n-пропоксибензольной кислоты сначала с хлористым тионилом в бензоле, затем с g кислотой в присутствии гидроокиси натрия в воде и далее с гидроокисью лития в водном спирте. Выход 48,5% т.пл. 265-266°С, брутто-ф-ла C₁₄H₁₈NO₄Li фибринолитическая активность 15± 0,7% против 10,5+0,9% для известного аналога, длительность действия 3 ч против 55 мин. 3 табл.

Литиевая соль N-п-пропоксибензоил- γ -аминомасляной кислоты формулы
g
обладающая фибронолитической активностью.