Способ получения стимулятора роста животных из поджелудочной железы убойных животных Советский патент 1991 года по МПК A23K1/165 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в животноводстве для стимуляции мясной продуктивности молодняка крупного рогатого скота и свиней на от- корме.

Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.

Пример 1. 500 кг поджелудочной железы убойных животных измельчают до размера частиц 1x1x1 см, двукратно экстрагируют 80%-ным водным этанолом, подкисленным ортофос- форной кислотой до рН 2,5 в соотношении 1:5, в в дно-этанольном экстракте 5 н. едким натром корректируют рН сначала 3,5, а затем 5,0 и отделяют выпавшие амидно-белковые балласты, в экстракте устанавливают рН 3, 5 ихв вакуум-выпарном аппарате концентрируют экстракт до содержания 15% спирта, раствор фильтруют и пропускают через две последовательно соединенные колонки с

|К

сульфокат-ионитом КУ-23-И. По окон- чании сорбции ионит промывают 60%-ным водно-спиртовым раствором и аммонийно-ацетатпым буфером с рН 5,3 и десорбируют инсулин в ионите буферным раствором при непрерьюно изменяющемся градиенте рН и возрастающей концентрации солей.

В полученном элюате корректируют рН 8,5, доводят концентрацию солей до 2,0 М, раствор перемешивают в течение 12 ч и отделяют выпавшие кристаллы инсулина. В результате отделения кристаллов инсулина получают 120 л маточного раствора.

В 10 мл маточного раствора 1 н. раствором соляной кислоты корректируют рН до 1,5 и добавляют 1,5 кг хлористого натрия (т.е. до концентрации хлористого натрия в маточном растворе 15%). Раствор перемешивают в течение 20 мин ri отстаивают в течение 6 ч для полной коагуляции белка и уплотнения осадка.

Затем уплотнившийся осадок отделяют сифонированием верхней части раствора, а затем центрифугированием при 1,5 тыс.об/мин в течение 10 мин.. Далее осадок растворяют в 1 л 0,3%- ного водного раствора фенола. К полученному раствору прибавляют 5 н. раствор едкого натра до рН 6,0, прибавляют 10 мл 10%-ного раствора ук- сусно-кислого цинка и 10 мл 1,0%-ног раствора протамин сульфата для получения концентраций уксусно-кислого цинка и протамин сульфата в растворе 0,1 и 0,01% соответственно. Выход целевого продукта 12,5 г. Содержание биологически активного вещества 67,5%, соотношение инсулина к клюка- гону 1:9,0.

Пример 2.В 20 л маточного раствора, полученного по примеру 1, 1 н. раствором соляной кислоты корректируют рН до 2,5 и добавляют 4 кг хлористого натрия (т.е. до концентрации ХЛОРИСТОГО Натрия В МаТОЧНОМ

растворе 20%).

Раствор перемешивают в течение 20 мин и отстаивают в течение 5-6 ч для полной коагуляции белка и уплотнения осадка. Затем осадок отделяют центрифугированием при 1,5 тыс.об/мин в течение 10 мин. Далее осадок растворяют в 2,0 л 0,3%-ного водного раствора фенола.

0

о .

5 п

5

К полученному раствору прибавляют 5 н. раствор едкого натра до рН 6,5, прибавляют 10 мл 10%-ного раствора уксусно-кислого цинка и 50 мл 0,2%-ного раствора протамин сульфата для получения концентрации уксуснокислого цинка и протамин сульфата в растворе 0,05 и 0,005% соответственно. Выход целевого продукта 24 г. Содержание биологически активных веществ 79%, соотношение инсулина и глюкагона 1 :5,5.

Пример 3. В 1C л маточного раствора, полученного по примеру 1, 1 н. раствором соляной кислоты корректируют рН до 3,0 и добавляют 3 кг хлористого натрия (т.е. до концентрации хлористого натрия в маточном растворе 30%).

Раствор перемешивают в течение 20 мин и отстаивают в течение 5-6 ч для полной коагуляции белка и уплотнения осадка. Затем осадок отделяют центрифугированием при 1,5 тыс.об/мин в течение 10 мин. Далее осадок растворяют в 1,5л 0,3%-ного водного раствора фенола, подкисленного соляной кислотой до рН 3,0.

К полученному раствору прибавляют 5 н. раствор едкого натра до рН 9,0, прибавляют 50 мл 5%-ного раствора уксусно-кислого цинка и 25 мл 5%-ного раствора протамин сульфата для получения концентрации уксусно-кислого цинка и протамин сульфата в растворе 0,2 и 0,1% соответственно.

Выход целевого продукта 18 г. Содержание биологически активных веществ 70%, соотношение инсулина к i клюкагону 1:7,2.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить увеличение выхода целевого продукта на 1,4-1,8%.

Формула изобретения

Способ получения стимулятора роста животных из поджелудочной железы убойных животных путем измельчения поджелудочной железы, водно-спиртовой экстракцией ее, отделения балластных веществ, сорбцией и десорбцией с последующим осаждением инсулина- сырца, о тли ч ающийся тем, что, с целью повьицения выхода целевого продукта, после осаждения инсуэ16290236

лина-сырца к раствору добавляют при получают путем добавления к раствору рН 1,5-3,0 хлористого натрия до кон- при рН 5,0-9,0 уксусио-кислого цинка центрации 10-30%, полученный осадок и протамин сульфата, взятых в конеч- отделяют и растворяют в 0,3%-ном § них концентрациях 0,05-0,2% и 0,005- растворе фенола, а целевой продукт 0,1% соответственно.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в животноводстве для стимуляции мясной продуктивности молодняка крупного рогатого скота и свиней на откорме . Цель - повыиение выхода стимулятора роста животных из поджелудочной железы убойных животных. Для этого поджелудочнуо железу измельчают, проводят ее водно-спиртовую экстракцию, отделяют балластные вещества, сорбируют и десорбируют с последующим отделением осадка инсулина-сырца. К полученному сперматанту добавляют при рН 1,5-3,0 хлористый натрий до концентрации 10-30%, полученный осадок отделяют и растворяют в 0,3%-ном растворе фенола, а целевой продукт получают путем добавления к раствору при рК 5,0-9,0 уксус- ио-кислого цинка и протаминсулъфата, взятых в конечных концентрациях 0,05-0,2% и 0,005-0,1%, соответственно. Изобретение позволяет увеличить выход стимулятора роста животных на 1,4-1,8%. (Л С