СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСУЛИНА-СЫРЦА Советский патент 1972 года по МПК A61K38/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринной промышленности.

Известеи снособ получения инсулина-сырца из инсулинсодержащего сырья, согласно которому иропускают через колонку обезбелоченный сернокислый спиртовой экстракт, затем спирт, раствор аммиака с последующи.м цодкислением элюата, фильтрованием, подщелачиванием до рН 4,5 для отделения примесей, добавлением 10%-ного ацетата цинка и установлением рН 6,0 для осаждения цинк-ИНсулина.

Предлагаемый способ отличается тем, что к спиртовому экстракту после отделения осадка добавляют уксуснокислый цинк с последующей обработкой известным образом. Такой способ помогает новысить -выход целевого продукта и упростить технологию производства. Целесообразно производить инсулин от каждого вида животного отдельно.

Кроме того, для удаления балластных веществ к спиртовому экстракту можно добавлять 1-2 г уксуснокислого цинка на 1 кг железы при рН от 3,8 до 7,6 и к надосадочной жидкости после отделения осадка -4,8 г на 1 кг железы при рН от 4,2 до 6,2.

Пример 1. 100 г замороженной свиной поджелудочной железы измельчают на мясорубке, заливают 400 мл 70%-ного спирта, содержащего 2,4 мл концентрированной серной

кислоты, и перемешивают в течение двух- трех часов; рН экстракционной массы 1,7- 1,9; концентрация спирта 57-59%.

Экстракт фильтруют и в фильтрате рН доводят до 7,2-7,6 прибавлением 5 и. раствора едкого натра, затем туда же добавляют при перемешивании 1 мл 10%-ного водного раствора уксуснокислого цинка. Выпавший осадок удаляют фильтрацией или центрт1фугиро.ванием. В надосадочной жидкости устанавливают рП 4,2-4,5 и при 11еремешива 1И11 добавляют 8 мл 10%-ного водного раствора уксуснокислого ци.нка. Через один-два часа осадок отделяют центрифугированием или фильтрацией, промывают сииртовоэфириой смесью и сушат на воздухе. Выход сухого порошка 520 мг, активиость 2,5 ед:мг, т. е. 1044 ед. из 100 г сырой поджелудочной железы (около 1000 сд. из 1 кг.

Пример 2. К 100 г ноджелудочной железы крунного рогатого скота, измельченной на мясорубке, добавляют 400 мл 80° сннрта, подкисленного 4,5 мл ортофосфориой кислоты. Реакционную смесь перемешивают .в течение двух-трех часов, фильтруют, устанавливают в фильтрате рН 4,5-4,7, отделяют балластные вешества, 5 н. раствором NaOH доводят рН до 7,6-7,8 и прибавляют к раствору 0,8 мл 10%-ного раствора уксуснокнслого цинка. Осадок отделяют и отбрасывают, а

в экстракте устанавливают pU 5,4-5,5 и снова добавляют 6,4 мл 10%-ного раствора уксуснокислого цинка для осаждения белковой фракции, содержащей инсулин. Через 10- 18 час осадок отделяют, промывают дистиллированной водой и растворяют в воде, подкисленной соляной кислотой. Высаливание инсулина-сырца проводят 20-25%-ным раствором NaCl. Полученный препарат промывают ацетоном, эфиром и сушат на воздухе. Выход инсулина-сырца составляет 600 ед. при активности 5 едмг.

Предмет изобретения

1. Спо.соб получения инсулина-сырца путем экстрагирования поджелудочной железы

подкисленным спиртовым раствором, очистки, высаливания целево-го продукта из фильтрата, промывания его и высушивания, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения технологии производства, к спиртовому экстракту после отделения осадка добавляют уксуснокислый цинк с последующей обработкой известным образом.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что к спиртовому экстракту добавляют 1-2 г уксуснокислого цинка на 1 кг железы при рН от 3,8 до 7,8 и к надосадочной жидкости после отделения осадка добавляют 4-8 г уксуснокислого циика на 1 кг железы при рН от 4,2 до 6,2.