Штамм бактерий АстнRовастеR Sp., разлагающий флороглюцин Советский патент 1991 года по МПК C12N1/20 C07C39/10 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для очистки сточных вод.

Целью изобретения является выделение штамма Arthrobacter sp. ВКПМ В-4631 (| обладающего высокой деструктивной способностью по отношению к флороглюцину .

Штамм получен путем выделения наиболее активно растущей культуры на жидких синтетических средах, содержащих флороглюцин (концентрации 0,5- 1 г/л) в качестве единственного источника углерода. В качестве резерва микроорганизмов для испытания используют штаммы, выделенные на мясопеп- тонном агаре из очистных сооружений предприятия органического синтеза.

Биотехнологические характеристики. Штамм Arthrobacter sp. В-4631 разлагает флороглюцин. Культивирование проводят на качалке (120 об/мин) при 28СС в течение 5 сут. Состав среды,

г/л: флороглюцин 1,2; ( 0,5; MgS04 H20 0,25$ 0,4; , Х12Н20 l,75j .2НгО O.lj дистиллированная вода 1 л. Концентрацию флороглюцина определяют по изменению максимума поглощения вещества в щелочной среде.

Через 60 ч роста происходит 300%- ное удаление флороглюцина.

Культурально-морфологические свойства.

Вегетативные клетки. МПБ, температура 28°С, рост в 0,5 л колбах со 100 мл среды на качалке (120 об/мин). В ранней стадии роста палочковидные клетки. Размер 0,6-1,2 мкм, в возрасте 3-5 сут, палочки укороченные, кок- ковидные. Состав среды, г/л: МпС1 2ЬгО 0,02; FeS04 7H20 0,025; Na MoO x Х2Н-0 0,005, Грамвариабельные. Некислотоустойчивые. Неподвижные.

Образование специализированных клеток - нет.

Ю

Характеристика колоний на плотной среде: МПА 28°С, 2 сут., рост в чашках Петри. Размер 1-2 мм. Круглые, выпуклые, край ровный, Маслянистые, ,- слизистые, S или R.

Цвет поверхности и обратной стороны кремовый, непрозрачные.

Крахмал-аммиачный агар: 28°С, 2 сут., рост в пробирках и чашкахJQ

Петри. Размер 1-2 мм колонии, кру глые, выпуклые, край ровный, маслянистые.

Агар Симмонса; 28°С, 3 сут., рост в чашках Петри. Размер 1-2 мм, колонии круглые, выпуклые, край ровный, J5 маслянистые. Цвет поверхности и обратной стороны кремовый, непрозрачные.

Рост в жидкой среде. Состав среды, г/л: флороглюцин 1,2; (NN4)2204 0,5; MgS04 7HzO 0,25; 0,4} Na1HP04x 20 Л2Н2.0 1,75; CaCI2 2ri20 0,1; МпС12 IkHyp 0,02; FeS04 7H20 0,025; , 2Н20 0,005; вода дистиллированная I л. 28°S, возраст 2-3 сут., рост в 0,5 л колбах со 100 мл среды на ка- 25 чалке (120 об/мин). Характер роста - помутнение. Изменения среды не происходит .

Физиолого-биохимические свойства. Хемогетеротроф, Тип катаболизма: ды- JQ хание.

Отношение к кислороду - аэроб, температуре - (мин) 22°С; макс. 37tfC; опт. 28-30°С. рН - мин, 6,7; макс. 7,5; опт, 7,0-7,3; бактериофагам - ,с фагоустойчивый.

Источники углерода. Усваивает натриевые соли лимонной, молочной, щавелевой кислот, не усваивает натриевые соли муравьиной, адипиновой.кислот. Q Глюкозу усваивает без кислотообразо- вания.

Источники азота. Использует неорганический азот в виде аммонийных солей, восстанавливает нитраты в нитри- ты.

Другие характерные физиологические особенности обмена. Не разлагает крахмал, казеин,, целлюлозу. Не разжижает

желатин, сероводород не образует. Растет на среде с 5% NaCl,

Гено- и хемотаксономические характеристики. В гидролизате клеточных

стенок обнаружен лизин. Миколовые кислоты не обнаружены. Непатогенен.

Пример I. Культуру ArthrObac- ter sp. В-4631 выращивают в колбах на 100 мл с 25 мл мясопептонного бульона в течение 2 сут. Выросшей культурой в количестве 0,03 мг/мл (в пересчете на сухой вес клеток) засевают 0,5 л колбы со ЮО мл среды. Состав среды, г/л: флороглюцин 0,5; (МН4-)г.504 0,5; MgS04 0,25; КН.Р04 0,4; Na2HP04 12H20 1,75; СаС12-2НгО 0,1; МпС 2-4Н20 0,02; FeSO 7HZ0 0,025; МалМоОф 2НгО 0,005; дистиллированная вода. Культивирование проводят на качалке (120 об/мин) при 28° С в течение 5 сут. Концентрацию флороглюцина определяют по изменению максимума поглощения вещества в щелочной среде.

Как видно из табл. 1, в этих условиях флороглюцин исчезает полностью за 24 ч роста культуры,

П р и м е р 2. Аналогичным образом засевают среду следующего состава, г/л: флороглюцин 1,2; остальные соли, как в примере 1.

Из данных табл. 2 видно, что через 60 ч роста происходит 100%-ное удаление флюроглюцина.

Пример 3. Аналогичным образом засевают среду следующего состава, г/л: флороглюцин 1, остальные соли, как в примере 1.

Снижение концентрации флороглюцина при росте Arthrobacter sp. В-4631 на среде с исходной концентрацией 0,5 г/л показано в табл. 1, с исход-- ной концентрацией 1,2 г/л - в табл.2} с исходной концентрацией 1,25 г/л - в табл. 3.„

Данные табл. 3 показывают, что за 72 ч роста штамма Arthrobacter sp, В-4631 происходит снижение концентрации флороглюцина до 140-160 мг/л. Дальнейшее увеличение времени культивирования штамма не приводит к значительному уменьшению концентрации вещества в среде.

формула изобретения

ч

Штамм бактерий Arthrobacter sp, ВКПМ В-4631, разлагающий флороглюцин.

Таблица 1

Таблица2

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может iбыть использовано для очистки сточных вод. Целью изобретения является выделение штамма бактерий Arthrobacter sp. Б-4631, обладающего высокой деструкционной способностью по отношению к флороглюцину. За 60 ч культивирования штамма Arthrobacter sp. В-4631 концентрация флороглюцина снижается с 1,2 г/л до нуля. 3 табл.