Способ определения стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности Советский патент 1991 года по МПК A61H39/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

У беременной, которой назначен курс рефлексотерапии, за 10-30 мин до чрезкожной стимуляции берут 2-3 мл крови из вены. Затем проводят одностороннее, произвольной латерализа- ции, пробное воздействие на биологически активную точку ВМ 147 любым

чрезкожным раздражителем (игла, электроток, лазер). Через 10-20 мин- после пробного воздействия производят еще раз забор крови из вены 2-3 мл. Затем в плазме крови и мембранах эритроцитов той и другой пробы определяют содержание первичных продуктов ПОЛ- диеновых конъюгатов и конечных продуктов ПОЛ-шиффовых оснований, а также микровязкость мембран эритроцитов, и сравнивают результаты.

Кровь центрифугируют при 3000 об/мин 15 мин для-отделения плазмы. Эритроо

GO СО СЭ

сл ю

циты трижды отмывают 10,0 мл трис-НС1 буфера, содержащего 150 мл NaCl pH 7,4. Мембраны эритроцитов выделяют по ЛоИ.Колчинской и соавт. (1979). Полученный осадок мембран эритроцитов суспендируют в 2 мл 0,01 М трис-НС1 буфера.

Из плазмы и суспензии мембран эритроцитов экстрагируют липиды по мето- ду E.Bligh, W.I.Dyer (1959). К 0,5 мл плазмы или суспензии мембран эритроцитов приливают 2,7 мл дистиллированной воды, 8 мл метанола и 4 мл хлороформа при постоянном перемешиваниио Затем смесь экстрагируют 3 мин и приливают 4 мл хлороформа, 4 мл дистиллированной воды, помещают в холодильник и через 40 мин отбирают нижнюю фазу, представляющую собой липидный экстракт плазмы или мембран эритроцитов.

В липидном экстракте определяют содержание продуктов ПОЛ.

Для определения содержания диено- вых конъюгатов (Владимиров, Арчаков, 1972) 2 мл липидного экстракта плазмы или мембран эритроцитов упаривают на роторном испарителе Оставшийся сухой осадок растворяют в 3 мл смеси мета- нол-гексан (5:1) и измеряют его оптическую плотность при 233 нм Содержание диеновых конъюгатов выражают в мкм/мг липидов и рассчитывают по формулеЮЕхб СхА где К - экстинкция;

Ј - молярный коэффициент экстинкции, равный 2,1 Ю5 ; С - разведение пробы; А - содержание общих липидов в пробе, мг.

Для определения содержания Шиффо- вых оснований (Bidlack, Tappel 1973) измеряют интенсивность флуоресценции липидного экстракта плазмы или мембран эритроцитов при 440 нм, при длине волны возбуждающего света 350 нм. В качестве, стандарта используют раст вор сернокислого хинина в 0,1 н. HgSO (1 мг/мл). Содержание Шиффовых оснований выражают в отн.ед/мг ли- пида.

Содержание общих липидов в липидном экстракте определяют сульфовани- линовым методом (Колб, Камышников, 1982). 1 мл липидного экстракта гидролизуют в концентрированной Нг804 на кипящей водяной бане 20 мин. Гидролизат охлаждают. К 0,1 мл гидро- лизата приливают 2,5 мл фосфованили- нового реактива, тщательно перемешивают и оставляют на 40 мин в темноте при комна тной температуре для развития окраски. Состав фосфованилиново- го реактива: 4 части концентрированной . и 1 часть 0,6%-ного водного раствора ванилина. Оптическую плотность измеряют при 530 нм на спектрофотометре. Содержание общих липидов выражают в мг на 1 мл плазмы или суспензии мембран эритроцитов и рассчитывают по следующей формуле: 0,08xCxEi

где Е - экстинкция пробы;

Е - экстинкция 0,1 мл эталонного раствора липидов, содержащего 0,8 мг общих липидов/мл; С - разведение пробы. Для определения микровязкости мембран эритроцитов суспензию мембран эритроцитов разводят до концентрации фосфолипидов 0,1 мг/мл, содержание которых определяют по 00Д,Кушмановой, ГоМ.Ивченко (1983). 0,2 мл липидного экстракта с концентрированной хлорной кислотой сжигают на песчаной бане (200°С) в течение 120 мин0 Смесь охлаждают, затем к ней добавляют 0,2 мл раствора эйконогена, 0,2 мл 5%-ного раствора молибдата аммония и 4,2 мл дистиллированной водыс Состав раствора эйконогена: 0,5 г эйконогена, 1 г сульфита натрия, 30 г метабисульфита натрия растворяют в 500 мл дистиллированной воды. Пробы тщательно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 7 мин для развития окраски. Затем пробы фотометрируют на спектрофотометре при длине волны 830 нм. Калибровочную кривую строят по стандартному раствору однозамещен- ного фосфата калия (4,39 г/1 л), содержащего в 1 мл раствора 1 мг фосфора. Общую концентрацию фосфолипидов определяют по содержанию общего фосфора, умноженному на 25.

О МВМЭ судят по отношению флуоресценции мономеров и эксимеров флуоресцентного зонда пирена в суспензии мембран эритроцитов (FW/F), так как степень эксимеризации. является чувствительным показателем микровязкости

липидного бнслоя (Владимиров, Добре- цов, 1980), В вязкой среде эксимери- зация пирена уменьшается, т.е. чем больше величина отношения Fm/F9, тем больше относительная микровязкость липидного бислоя, и наоборот, чем меньше величина отношения , тем меньше микровязкость липидного бислоя Конечная концентрация пирена в суспен зии мембран эритроцитов 10 мкм/мл,

Пример 1„ Беременная Р-а, диагноз: беременность 32 недели, угрожающие преждевременные роды. Резус отрицательная принадлежность кро- ви. Из анамнеза известно: 1 самопроизвольный аборт в 1982 г,в 24 нед., осложнившийся воспалительным процессом придатков В 1983 г - неразвивающаяся беременность в 24 недели, в 1985 г неразвивающаяся беременность в 15 недель. Назначено лечение: рефлексотерапия .

Перед проведением сеанса рефлексотерапии взята кровь для определения в плазме и мембранах эритроцитов содержания продуктов ПОЛ и МВМЭ.

На внемеридианную (ВМ) точку 147, расположенную справа, произведено пробное рефлекторное воздействие, после чего вновь взята кровь для проведения аналогичных исследований. Полученные результаты представлены в таблице.

После пробного сеанса чрезкожной электростимуляции (ЧЭС) справа у боль Р-вой в плазме крови и мембранах

5

0

5

0

5

эритроцитов содержание продуктов ПОЛ значительно возрастает, одновременно на 40% увеличивается МВМЭ. Следовательно, для последующего курса рефлексотерапии необходимо изменить сторону воздействия, ЧЭС следует проводить на точку ВМ147, расположенную слева.

После курса рефлексотерапии на точку ВМ 147 слева явления угрозы прерывания прошли. Беременность закончилась рождением доношенного ребенка с нормальными массо-ростовыми показателями и оценкой по шкале Ангар 8-9 баллов.

Предлагаемый способ позволяет повысить точность способа.

Формула изобретения

Способ определения стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности путем оценки функции плаценты после рефлекторного воздействия на точку ВМ-147, о т л и- чающийся тем, что, с целью повышения точности способа, определяют в плазме крови содержание продуктов перекисного окисления липидов и величину микровязкости мембран эритроцитов до и после одностороннего воздействия и при одновременном повышении продуктов окисления липидов на 40% и более, микровязкости на 30% и более для последующей рефлексотерапии выбирают контрлатеральную ctopo- ну воздействия.

Изобретение относится к рефлексотерапии. Цель - повышение точности выбора стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности. Для этого в плазме крови и мембранах эритроцитов определяют содержание продуктов перекисного окисления липидов и микровязкость мембран эритроцитов, затем осуществляют нелатерализованное одностороннее пробное рефлекторное воздействие на биологически активную точку ВМ 147, повторно производят указанные определения в крови и сравнивают результаты с исходными показателями и при их одновременном снижении выбирают ипсилатеральную сторону воздействия, а при одновременном повышении выбирают контрлатеральную сторону воздействия для последующей рефлексотерапии. Это позволяет повысить точность способа. § (/)