Питательная среда для культивирования базидиомицетов - продуцентов пероксидазы Советский патент 1991 года по МПК C12N1/14 C12N9/08 C12N1/14 C12R1/645 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологической промышленности и медицине.

Цель изобретения - повышение активности пероксидазы.

Изобретение заключается в том, что известная питательная среда для базидиомицетов - продуцентов пероксидазы содержит дополнительную поли- капроамидную крошку.

В качестве продуцентов используют коллекционные штаммы базидиомицетов из коллекции Ботанического института АН СССР: Corriolus hirrutus (Fr)

Quel штаммы ЛЕ-072, ЛЕ-0679, ЛЕ-074, а также Cerrena maxima Murr штаммы ЛЕ-0681, ЛЕ-0275.

Пример 1. Посевные культуры перечисленных выше штаммов выращивают на сусле-агаре при 24-26°С, культивирование продуцентов ведут поверхностным способом в колбах Эрлен- мейера, содержащих соответственно 50 и 100 мл культуральной питательной среды, включающей глюкозу, пептон, КНгР04, MgS04-7H20, в которую до стерилизации добавляют поликапро- амидную крошку. Культивирование ведут при 25°С в течение 8 сут. По досо

4йь

ро 00

тижении максимальной активности на воронке Бюхнера отделяют мицелий и получают культуральный фильтрат, который анализируют на пероксидазную активность. Активность (А) перолсси- дазы определяют по окислению бензиди на в присутствии пероксида водорода и вычисляют по формуле

А - Е (абЬ)

где Е - экстинкция (0,250);

а - отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки (Мл) к весу навести (г);

Јj - степень дополнительного разведения вытяжки;

b - степень постоянного разведе

ния вытяжки в реакционной смеси ,

С - толщина слоя в кювете (2 см t - время, с.

Сравнительные данные по активное ти пероксидазы в культуральном фильтре, полученном на предлагаемой и известной средах, представлены в табл. 1 -3.

Как видно из табл. 1-3 наибольша активность пероксидазы достигается в питательной среде, содержащей 5-20 г/л поликапроамидной крошки. Повышение содержания в среде для культивирования базидиомицета поликапроамидной крошки в количестве более 20 г/л нецелесообразно, так

как не влечет за собой повышения активности пероксидазы. При содержании крошки менее 5 г/л активности пероксидазы в культуральном фильтрате, получаемом на известной и предлагаемой средах, отличаются незначительно.

Преимущество предложенной среды заключается в повышении активности культивируемых на ней базидиомице- тов - продуцентов пероксидазы в 2-4 раза по сравнению с известной питательной средой.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования базидиомицетов - продуцентов пероксидазы, содержащая в качестве источника углерода глюкозу, в качестве источника азота - пептон, минеральные соли - однозамещенный фосфат калия и сульфат магния и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения активности пероксидазы, она дополнительно содержит поликап- роамидную крошку при следующем соотношении компонентов, г/л воды:

Пептон3-4

Глюкоза9-12

Однозамещенный

фосфат калия 0,9-1,2

Сульфат магния

семиводный 0,048-0,053

Поликапроамидная крошка5-20

Таблица 1

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологической промышленности и медицине. С целью повышения активности пероксидазы, известная питательная схема для культивирования проду- центов пероксидазы - штаммов Corrio- lus hirrutus (Рг)рие1-ЛЕ-072, JIE-0679, ЛЕ-074, а также штаммов Cerrena maxima Murr ЛЕ-0681 и ЛЕ-0275 дополнительно содержит поликапромиднуго крошку при следующем соотношении компонентов, г/л: пептон 3-4, глюкоза 9-12, однозамещенныи фосфат калия 0,9-1,2, семиводный сульфат магния 0,048-0,053, поликапроамидная крошка 5-20. Преимущество предложенной среды заключается в повышении в 2-4 раза активности пероксидазы культивируемых на ней продуцентов ба- зидиомицетов по сравнению с культивированием на известной среде. 3 табл. i

Активность пероксидазы в купьтуральном фильтрате, полученном на известной и предлагаемой средах Cerrena maxima Murr JIE-0275

Активность пероксидазы в купьтуральном фильтрате-Corriolus hirrutus (Fr.) Quel ЛЕ-072, полученном на известной и предлагаемой средах

Таблица 2

,ТаблицаЗ

Активность пероксидазы в купьтуральном .фильтрате базидиомицета, полученном

на известной и предлагаемой средах

Corriolus hirrutus (Fr) 2210,03,0 150,90

Cerrella maxima Murr 712,04,0 151,0

Cerrella maxima llurr

3310,03,0 150,90

Corriolus hirrutus (Fr)

3410,0 3.0 15 0,90

f, Corriolus hirrutus (Fr)

3510,0 3,0 15 0,90

Редактор Т.Лазоренко

Составитель В.Соина Техред М.Дидык

Заказ 1126

Тираж 383

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

72

679

74

24,5

30,5

31

23

24

306,2

479

415

290

303

Корректор М.Демчик fПодписное