О)
сл
о
Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению конденсированных производных пиримидина ф-лы NH /Гу хсА У (R)r s N где А - группа -СН2-СН2-5 -СН2-СН2- -СН2-, СН2-СН2-СНг-СН2-; R-H, низший алкил, фенил, , их фармацевтически приемлемых кислых аддитивных солей или кислых аддитивных солей гидратов, которые обладают иммуностимулирующими свойствами. Цель - разработка способа получения более активных соединений. Получение ведут реакцией 2-меркапто-4,6-диаминопири- мидина с производным дигалогенпириди- на ф-льгY-A(R)f,Z5 где Y - галоген; Z - галоген; R, г имеют указанные значения, в присутствии связывающего кислоту агента в среде инертного органического растворителя при тем- от 45° С до температуры кипения реакционной смеси с выделением целевых продуктов. 2 табл. (Л С
Изобретение относится к гетероцик- лическим ссеидинениям, в частности к . способу получения конденсированных производных пиримидина общей формулы
NH
п
.
(Юг Ь N lNn2
где А - группа -СН2-СН2-, -СН2-СН2- -СН2-, -СН2-СН2-СН2-СН2;
R - водород, низший алкил, фенил;
г равно 1,
их фармацевтически приемлемых кислых аддитивных солей или кислых аддитивных солей гидратов.
Цель изобретения - разработка способа получения новых производных пиримидина, обладающих более высокой биологической активностью.
Соединения общей формулы (I) имеют ценные иммуностимулирующие свойства.
Ј
СО
Иммунитет в микробиологическом , значении - защищенность организма против возбудителей болезни (бактерии, вирусы, грибки, паразиты) или против их токсичных веществ. На соответствующий иммунитет или на его развитие наряду с генетическими услови- ями могут оказывать влияние также биологические воздействия окружающей |среды. Клетки иммунной системы работают по строгому принципу разделения труда. В то время, как один распознает инородные вещества (антигены), другие производят антитела или созре- вают в реакционноспособные иммуно- циты. Находят и такие клетки, которые координируют или регулируют связи между определенными трупами клеток. На основании изложенного можно также характеризовать иммунитет таким образом, что организм распознает инородные для него вещества и может давать на них целенаправленный иммунный ответ через сложные строго опре- деленные воздействия клеток.
С точки зрения профилактики против инфекционных болезней исключительно большое значение имеет искусственно вызванный вакцинацией так называемый активный иммунитет. При этом в организм вводят прирученный (ослабленный) вариант возбудителя болезни или убитый возбудитель болезни, или его токсин
Используемые в иммунопрофилактике вакцины имеют различное иммуногенное действие. Благодаря отдельным вакцинам можно вызвать иммунитет на всю жизнь, значительная часть вакцин обеспечивает иммунитет только на несколько месяцев.
Знание или практическое использование так называемых иммуномодули- рующих и иммуностимулирующих веществ привело к значительному прогрессу в коррекции иммунодефицита организма и в повышении эффективности вакцин со слабым иммуногенным действием.
| -в
Последнее имеет особое значение
в области ветеринарной медицины, так как формирование иммунологической однородности больших популяций животных является предпосылкой того, что в отношении поголовья животных можно достигнуть такого же соответствующего генетическим условиям произ-. водственного уровня.
0 0 5
0
Q
$
0
5
Опыты, связанные с исследованием иммуностимулирующего действия отдельных соединений, показывают, что соединения общей формулы (I) влияют на клеточную способность защиты организма и могут повышать иммуногенное действие отдельных вакцин вируса герпеса со слабым иммуногенным действием (например, вакцины против Aujeszky-болезни).
Результаты, относящиеся к иммуностимулирующему действию соединений общей формулы (I) и полученные при проведении модельных опытов на мышах или свиньях, приведены в табл. 1 и 2.
Для реакций в пробирке периферических лимфоцитов используют следующий метод испытания.
Отделение лимфоцитов.
Из обработанных против свертывания гепарином проб на наличие крови выделяют клетки крови с Ficoll Paque. Плотность клеток устанавливают в содержащем 10% внутриутробной сыворотки растворе Ханка до 10 /мл. Из клеточных суспензий отмеривают по |,5 мл в Leighton-трубки и. затем дополняют их соответствующими исследованиям антигенами.
Образование иммунорозеток (RCF).
30%-ный раствор красных клеток крови Шафена после соответствующей предварительной обработки адсорбируют через антиген Бойвена. Из обработанных таким путем красных клеток крови 0,1 мл вводят в Leighton-трубки. Через 16 ч часть образующих розетки клеток подсчитывают в окрашенных препаратах под микроскопом.
Цитотоксические реакции (СТ) .
Исследования проводят в аллоген- ной системе. В-сусгензию красных клеток крови Шафена, которой придают чувствительность при помощи антигена, вводят 0,1 мл суспензии лимфоцитов с плотностью, клеток 10 мл. Величины цитотоксической способности определяют па основании проведенного после инкубационного периода (16 ч) гемолиза, который измеряют на приборе Спекола при 540 нм. Размер, отнесенный к контрольным препаратам, выражают в процентах.
Как вытекает из данных табл. 1 и 2, испытуемые соединения, в основном, не влияют на бластогенез лимфоцитов, однако они повышают эффективность
клеточных иммунных реакций, что выражается в 8-11%-ном повышении RCF- величин и 10-12%-ном повышении СТ-ве личин.
При сравнении действия соединений общей формулы (I) с действием соединения TEI-3096, выявляется следующее отличие. В то время как известное соединение активизирует только Т-клетки супрессора, соединения общей формулы (I) повышают активность лимфоцитов Т-подавителей и других так называемых К-клеток, что выражается в увеличении цитотоксической способности клеточной иммунной системы.
Токсичность, соединений формулы (I), в частности соединения по примеру 1, LD gQ на одной особи мышей в CMC-суспензиях 2000 мг/кг.
Пример 1. 7-Амино-5-имино- 2,3-дигидро-5Н-тиазоло-(3,2-а)-пири- мидин-гидробромид.
Смесь 14,2 г (0,1 моль) 2-меркап- то-4,6-дйаминопиримидина, 21,6 г (0,115 моль) этилендибромида, 200 мл диметилформамида и 13,8 г (0,1 моль) карбоната калия перемешивают при 70°С в течение 5 ч. Реакционную смес охлаждают, осаждают, продукт фильтруют, промывают водой и сушат. Получают 23,6 г целевого соединения, выход 95%, т.пл. выше 300°С. Вычислено, %:. С 28,93; Н 3,64; N 22,49; S 12,87; Вг 32,07
,BrN4S 249,136
Найдено, %: С 28,88; Н 3,68; N 22,66; S 12,70; Вг 32,08
П р и м е р 2. 8-Амино-б- имино- 3,4-дигидро-2Н,6 Н-пиримидо-(2,2-Ъ) (1,3) -тиазин -гидробромид.
Метод А.
14,9 г (0,1 моль) 2-меркапто-4,6- диаминопиримидина и23,9 г (0,115 моль 1,3-дибром-пропана превращают аналогично примеру 2. После обработки реакционной смеси получают 23,7 г указанного соединения, выход 90%, т.пл. выше 300°С.
Вычислено, %: С 31,95; Н 4,21; N 21,29; S 12,18; Вг 30,36
C7HflBrN4S 263,l63
Найдено, %: С 32,38,; Н 4,24; N 21,10; S 12,04; Вг 30,76
Метод В.
14,2 г (0,1 моль) 2-меркапто-4,б- диаминопиримидина и 15,8г(0,1 моль) 1,3-хлор-бром-пропана превращают ,
аналогично примеру 2. После обработки реакционной смеси получают 17,1 г указанного соединения, выход 65%, т.пл. выше 300°С.
Вычислено, %: С 31,95; Н 4,21; N 21,29; S 12,18; Вг 30,36 C7H11Bi-N4S 263,163 Найдено, %: С 33,18; Н 4,52; 0 N 21,28; S 12,10; Вг 30,85
П р и м е р 3. 7-Амино-2-фенил- 5-имино-2,3-дигидро-5Н-тиазоло-(3,2-а)- пиримидин-гидробромид.
Смесь 14,2 г (0,1 моль) 2-меркап- 5 то-4,6-диаминопирнмидина, 30,4 г (0,115 моль) (1,2-дибромэтил)-бензола, 200 мл диметилформамида и 13,8 г (0,1 моль) карбоната калия перемешивают при 45°С в течение 6ч, 0 Реакционную смесь охлаждают, осажденный продукт фильтруют, промывают водой и сушат. Получают 26,0 г указанного соединения,выход 80%, т.пл. выше 300°С.
5 Вычислено, %: С 44,32; Н 4,03; N 17,23; S 9,85; Вг 24,57 C,2.Hl3BrN4.,235 Найдено, %: С 44,52; Н 4,04; N 17,10; S 9,81; Вг 25,05 0 Пример4. 8-Амино-6-имино73- метил-2Н,6 Н-пиримидо-(2,1-Ь)(1,3)- тиазин-гидробромид.
14,2 г (0,1 моль) 2-меркапто 4,6- диаминопиримидинаи 19,7 г (0,115 моль) 5 2-метил-1,3-хлор-бром-пропана превращают аналогично примеру 2. После обработки реакционной смеси получают 18 г указанного соединения, выход 65%, т.пл. выше 300°С. 0 Вычислено, %: С 34,67; Н 4,73; N 20,21; S 11,57; Вг 28,83 CgH BrN4S 277,l9 Найдено, %: С 34,68; Н 4,80; N 19,96; S 11,40; Вг 29,39 5 Пример5. 7-Амино-5-имино-3« (или 2)-метил-2Н,5Н-тиазоло-(3,2-а)- пиримидин-гидробромид.
14,2 г (0,1 моль) 2-меркапто-4, диаминопиримидина и 23,2 г (0,115 мольЗ 0 1,2-дибром-пропана превращают аналогично примеру 2. После обработки реакционной смеси получают 15,8 г п,е левого соединения, выход 60%, т.пл выше 300°С.
5 Вычислено, %: С 31,95; Н 4,21; N 21,29; S 12,18; Вг 30,36 CTHMBrN4S 263,l63 Найдено9 %: С 32,50; Н 4,47; N 21,24; S 11,97; Вг 30,79
П р и м е р 6. 7-Амшю-5-имино- 2,3-дигидро-5Н-тиазоло-(3,2-а)-иири мидин-гпдрокарбонат-дигидрат.
В раствор 224 г бикарбоната натрия и 2500 мл воды добавляют 24,9 г (0,1 моль) 7-амино-5-имино 2,3-ди- гидро-5Н тиазоло-(3,2-а)-пиримидин- гидробромида. Реакционную смесь перемешивают 8 ч при комнатной температуре, затем отфильтровывают. Продукт промывают водой и сушат. Получают 17,2 г целевого соединения, выход 75%, т.пл „ 146-148°С.
Вычислено, %: С ЗТ,70; Н 4,94; N 21,12; S 12,09;
C7H,,N405s265,266
Найдено, %s С 32,68; Н 4,70; N 20,09; S 12,18
Пример. б-Амино-б-имино- 3,4-дигидро-2Н,6Н-пипиыидо- (2,1-Ь) (1,3)-тиазин-гидрокарбонат-дигидрат
Указанное соединение получают из 26,3 г (0,1 моль) 8-амино-6-ими- но-3,4-дигидро-2Н,6Н-пиримидо-(2,1-Ь (,3)диазин гидробромида аналогично примеру 8. Выход 17 г (70%), т.пл 1% 198°С.
Вычислено, %: С 34,40; Н 5,41; N 20,06; S 11,48
С8Н,5Н405-279,293 .
Найдено, %: С 35,65; Н 5,52; N 19,57; S 11,32
Пример 8. 7-Амино-5-имино- 2,3-ДИГИДРО-5Н-гиазоло-(3,2-а)-пиримидин .
Смесь 5,3 г (0,02 моль) 7-амино 5-имино 2,3-дигидро-5Н-тиазоло- (3,2-а)пиримидпн-гидрокарбонат-ди- гидрата и 30 мл уксусной кислоты перемешивают 6 ч. Раствор выпаривают, оставшиеся кристаллы поглощают в этаноле, фильтруют и сушат. Получают 3,6 г целевого соединения, выход 59,5%, т.пл. 158-160°C.
Вычислено, %: С 43,70; Н 6,00;
CHH,8N404 320,351
Найдено, %: С 43,68; II 5,97
Пример 9. 9 Амино 7-имино-2 3,4,5-тетрагидро 7Н-тиазепино-(1,3-а (3,2-а)-пиримидин-гидробромид,
Смесь 14,2 г (0,1 моль) 2-меркап- то-4,6-диамино-пиримидина, 24,8 г (0S15 моль) 1,4-дибром-бутана, 200 мл диметилформамида и 13,8 г (О,1 моль) карбоната калия нагрева
юг 11 ч при 80°С, Осажденную неорганическую соль фильтруют, фильтрат после осветления сгущают и охлаждают до . Осажденный продукт фильтруют, промывают изопропанолом и сушат. Получают 23,3 г указанного соединения, выход 84%. Продукт в случае необходимости можно перекристал- лизовывать из 10-кратного количества 50%-ного водного этанола. Т.пл. 283- 284бС.
Вычислено, %: С 34,66; Н 4,73; N 20,21; S 11,57; Вг 28,83
CgH0BrN4S 277,19
Найдено, %: С 34,65; Н 4,76; N 19,58; S 11,35; Вг 28,19
Формула изобретения
Способ получения конденсированных
производных пиримидина общей формулы I
(RVSTTNH«
где А - -СН2-СН2-, -СН2-СН2-СН2-, СН2-СЫ2-СН2-С1 2-;
В. - водород, низший алкил, фенил; ,
,их фармацевтически приемлемых кислых аддитивных солей или кислых аддитивных солей гидратов, о т л и- чающийся тем, что 2-меркапто- 4,6-диамшюпиримидин общей формулы II
МНо
40
N-
NH
.подвергают взаимодействию с производ- йым дигалогенпиридина общей формулы III
J-A-Z,
где.У и Z - Галоген,
R r имеют указанные значения, в присутствии связывающего кислоту агента в среде инертного органического растворителя при температуре от 45°С до температуры кипения реакционной смеси с выделением в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемых кислых аддитивных солей или кислых аддитивных солей гидратов.
Модельный опыт с мышами
Примечание: В числителе указаны отобранные за 1-ю или 3-ю,или 4-ю неделю пробы обработанных с применением комбинации соединения и вакцины животных, выраженные в процентах, В знаменателе указаны соответствующие величины при обработке животных только вакциной.
RCF - образование иммунорозеток. СТ - цитотоксические реакции.
Модельный опыт со свиньями
Таблица 1
Таблица 2
| Drugs of the Future, 1984, № 9, с | |||
| Способ получения алкиловых эфиров нитрофенолов | 1920 |
|
SU591A1 |
