Способ получения тиазоло [4,5-с] хинолина или его кислотно-аддитивных солей Советский патент 1990 года по МПК C07D513/04 A61K31/4738 A61P25/22 

Изобретение относится к органической химии, а именно к способу получения новых химических соединений - тиазоло /4,.хинолина или его кислотно-аддитивных солей, обладающих депрессивным действием на центральную нервную систему, которые могут найти применение в медицине.

Целью изобретения является получение тиазолор,5-сГ хинолина или его кислотно-аддитивных солей, обладающих новым для этой гетероциклической системы биологическим действием.

Получение тиазоло,5 с хинолина и его кислотно-аддитивных солей.

Пример 1. Смесь 17.,62 г (0,1 моль) З-амино- -меркаптохиноли- на, 150 мл муравьиной кислоты и 1,5 г пиросульфита натрия нагревают 3 ч до кипения. Реакционную смесь охлаждают, разбавляют смесью 800 мл воды и 0 мл концентрированной соляной кислоты, подщелачивают при помощи раствора гидроокиси натрия до рН 10 и трижды экстрагируют бензолом, каждый раз по 200 мл. После упаривания бензольной фазы получают 15,0 г тиазоло, 5-с хинолина, выход 80%, температура плавления 1l4-H6 С.

СП

Ј 4

СО

см

Полученное основание растворяют в ацетоне и добавляют эквимолярное количество этансульфокислоты. Полученный тиазоло А,5 с хинолин-этан- сульфонат имеет температуру плавления 155-157°С.

П р и м е р 2. Смесь 17,62 г (0,1 моль) З-змино- -меркаптохиноли- на и 500 мл триэтилового эфира орто- муравьиной кислоты нагревают при непрерывной отгонке образованного в ходе реакции этанола при 120-1 0°С. После удаления последних следов этанола реакционную смесь охлаждают, разбавляют бензолом и подкисляют солянокислым этанолом до рН 1. Осажденные кристаллы фильтруют. Получают 21,5 г тиазолор, 5 с хинолин-гидро- хлорида, выход 96%, температура , плавления 231-232°С.

Полученный таким путем гидрохлорид переводят обработкой гидроокисью натрия в тиазоло 4,5 с хинолин, основание имеет температуру плавления 114- 116°С.

Изучение биологического действия. Тиазоло pt,5 Лхинолин и его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли имеют депрессивное действие на центральную нервную систему, которое отличается от депрессивного действия известных эффективных средств. В противоположность большин- СЈву транквилизаторов эти соединения не тормозят неспецифические процессы активирования и делают возможным бегство животных в опыте с врожденным рефлексом и при высокой дозе. Известные транквилизаторы уже в минимальных дозах вызывают полное торможение этой реакции.

Тиазоло, 5 с хинолин и его кислотно-аддитивные соли не проявляют спазмолитического действия, но оказывают более сильное депрессивное действие на центральную нервную систему, чем бензодиазепины, и не связываются с бензодиазепиновыми рецепторами.

Фармацевтическая активность тиазоло, 5-сПхинолина и его фармацевтически пригодных кислотно-аддитивных солей подтверждается следующими опытами.

ПримерЗ. Острая токсичность.

Острую токсичность определяли на CFY-крысах (вес тела 100-160 г). Каждая группа состояла из 10 животных. Контрольные соединения назначали

0

орально (10 мг/кг) и подкожно (5 мл/ /кг). Перед оральным введением крыс 16 ч морили голодом. В каждой группе

животных было 50% крыс мужского пола и 50% крыс женского пола. Регистрировали смертельные случаи, наступившие в течение 8 ч. LD SQ вычислено на основании графического метода

Litchfield и Wilcoxon. При введении тиазоло Ц,5 с хинолин-гидрохлорида LD5o составило 55 мг/кг внутривенно, 2бО мг/кг подкожно, 350 мг/кг орально. При введении тиазоло, 5 с хинолин-этансульфоната LDSO 51 мг/кг внутривенно, 280 мг/кг подкожно, 290 мг/кг орально.

П р и м е р . Метод Hotplate (нагревательная пластина для фиксирования препаратов сухим жаром).

Действие каждой дозы испытываемых соединений определяли на группах, состоящих каждая из 10 крыс. Опыты проводили на нагретых до 5б°С метал5 лических пластинках. Латентный период болевых реакций определяли за 1 ч и через 1 ч после назначения испытываемого соединения, 2,5-кратное удлинение контрольной величины рассматривали как 100%-ное действие. При введении тиазоло , хинолин-гидрохлорида ED5o 7,5 мг/кг подкожно, 60 мг/кг через рот. При введении тиазоло , 5 с |хинолин-этансульфоната ED5Q 8 мг/кг подкожно, 72 мг/кг через рот.

П р и м е р 5. Альголитическое действие.

Сущность опыта состоит в том, что о доза морфина 10 мг/кг, введенная внутривенно или подкожно, вызывает у крыс полное обезболивание, так что лапаратомию можно проводить таким образом, что животные даже не показы- 5 вают самых незначительных признаков боли или напряжения и не появляется никакого постоперативного истощения. Чувство боли необработанных животных принимали за 100, а полное обезбо0

5

ливание - за

ED

00

и ED

50

5

количества испытываемых соединении, которые полностью устраняют чувство боли или снижают число пункций на 50. В этом тесте эффективными оказались исключительно наркотические болеутоляющие средства. Испытываемые соли тиазоло А, 5 с хинолина вообще не оказывают никакого влияния на хирургическое чувство боли.

51

П р и м е р 6. Writhinp -тест.

Каждую дозу испытываемых соединений назначали группам состоящим из 10 мышей, и через 20 мин после назна чения впрыскивали 0,6%-ный раствор уксусной кислоты в дозе 60 мг/кг внутрибрюшинно. Под действием химического раздражения брюшины (Peri5 1906

toneum) наблюдали характерный Writhing у 90% контрольных животных. 10 обработанных животных после внут- рибрюшинного введения уксусной кислоты в течение 20 мин- подвергались наблюдению. БоПеутоляющее действие отдельных доз выражали в процентах по следующему уравнению:

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения тиазоло[4,5-с]хинолина или его солей, обладающих депрессивным действием на центральную нервную систему, что может быть использовано в медицине. Цель - создание нового, с другим видом активности, соединения указанного класса. Синтез ведут реакцией 3-амино-4-меркаптохинолина с муравьиной кислотой или ее реакционноспособным производным. Выделение целевого продукта ведут в виде свободного основания или кислотно-аддитивной соли. Т.пл. основания 114-116°С, его этансульфоната 155-157°С, его гидрохлорида 231-232°С. Токсичность солей LD₅₀=290 мг/кг и 350 мг/кг (орально). Эффективная доза ED₅₀=8 мг/кг и 7,5 мг/кг (подкожно). 1 табл.

writhing . 1ПП болеутолящее действие, ,„ П-ЈПь1 тонтрольн. Х 1UU

На основании контрольных опытов определяли знаменатель как 90%.

Сравнение с определенными по методу Hotplate результатами показывает что испытываемые соединения при Writhing -тесте показывают меньшую активность. Отсюда можно сделать вывод о том, что при Hotplate -тесте, который для анальгетического действия не так селективен, измеряли другие неспецифические действия на централь- ную нервную систему, которые также приводили к удлинению времени реакции.

Были получены следующие результаты: при введении тиазоло, 5 с хино- лин-гидрохлорида EDSQ 32 мг/кг подкожно, 82 мг/кг через рот. При введении тиазолор4, хинолин-этансульфо- ната ED50 5& мг/кг подкожно, 70 мг/кг через рот.

Пример. Усиливающее наркоз действие.

Время сна определяли у CFy-крыс мужского пола (вес тела 150-200 г). Каждая группа состояла из 10 живот- ных. В хвостовую вену впрыскивали инактин в дозе 35 мг/кг. Регистрировали моменты, в течение которых животные теряют или восстанавливают рефлекс выпрямления. Время сна конт- рольных животных А25,9 ± 3,2 с (Ј 120).

Оба испытываемых соединения значительно удлиняли время наркоза контрольного барбитурата. При введении тиазоло, 5 С |хинолин-гидрохлорида EDjXK, 22 подкожно, 22 через рот. При введении тиазолор ,5 с хинолин- этансульфоната ED50o 22 подкожно, 32 через рот.

П р и м е р 8. Модифицированный тест с прыжками.

Этот тест служит для выявления психоактивного действия. Аппарат состоит из нагретой до 456С металличес - кой пластинки и открытого сверху и снизу стеклянного цилиндра. Животных ставили под стеклянным цилиндром на

пластину и заставляли делать один скачок. Регистрировали латентный период между установкой животных и скачком. Необходимое для бегства (скачка) время рассматривали как показатель раздражимости центральной нервной системы и выражали в единицах от 0 до 10. Оба испытуемых соединения оказались неэффективными в модифицированном тесте с прыжком.

П р и м е р 9. Тест с экранированием.

Этот тест служит для изучения способности обучения и удерживания крыс во время кондиционирования устройства .

Во время кондиционирования обучали крыс под действием направленных на лапу электрических ударов (110 В) прыгать на крышку стеклянного цилиндра. Реакция бегства (врожденный рефлекс) сопровождалась звонком как обусловленным раздражителем. Была пост тавлена задача, чтобы животные показывали приобретенный рефлекс десять раз с паузами 10 с без усиления. „ Удерживание приобретенного рефлекса рассматривали как положительное в том случае, если через 2k ч после опыта этот эффект сохранялся. В этих опытах животные на основании способности обучения классифицировались на четыре группы:

нет способности к обучению, если в течение 20 следующих друг за другом опытов не появлялся врожденный рефлекс;

слабая способность к обучению, если врожденный рефлекс хотя и появлялся, но не было приобретенного рефлекса ,

посредственная способность к обучению, если приобретенный рефлекс появлялся через несколько дополнит тельных сочетаний;

отличная способность к обучению, если приобретенный рефлекс появлялся десять раз сразу после сочетания.

Оба испытываемых соединения тормозили в этом тесте образование приобретенного рефлекса. При дозе 25 мг/кг испытываемые соединения вызывали полное и при дозе 18 мг/кг сильное тор- можение.

Галоперидол вызывал при небольшой дозе (0,025 мг/кг) сильное торможение образования приобретенного рефлекса. Хлордиазепоксид при такой же дозе не оказывал никакого действия на образование приобретенного рефлекса.

Пример 10. Shuttle-Box.

Приобретение условного рефлекса отклонения по двум направлениям (САР) анализировали в Shuttle-Box .в течение 5 дней подряд.

Аппарат состоял из шести камер, которые были отделены друг-от цруга перегородками с небольшим отверстием в середине каждой перегородки. Животных обучали пересекать отверстие во время условного раздражителя (световой сигнал, CS). Если животные не достигали этой задачи, их наказывали направленным на лапу электрическим шоком (1,3 мА, US, ультразвук). Животные подвергались этому опыту ежедневно сто раз. Каждый опыт состоял из паузы 15с, за которой следовали 15 с CS. Последние 5 с CS перекрывала внахлестку первая секунда US (ультразвука) . Во время этого периода обучения считали число САР и подсигналь- ных реакций (IR) автоматически и оце- нивали при помощи многостороннего вариантного анализа (ANOVA). Оба испытываемых соединения при дозе 50- 25 мг/кг сильно тормозили приобретение условного рефлекса в Shuttle- Box. Число положительных реакций (F), по-видимому, значительно ниже, чем у контрольных животных, начиная с первого дня опыта.

При дозе 25 мг/кг число отрицательных реакций (-f) было высоким.

Число подсигнальных реакций (IR) показало небольшое уменьшение. Хлордиазепоксид не оказывал влияния на

c

п

5

0 5 0 5

С

5

приобретение условного рефлекса при дозе 10 и 5 мг/кг, причем это вещество - эталон при дозе 10 мг/кг - повышало число отрицательных реакций

(f).

Пример 11, Определение подвижности в Shuttle-Box.

Для определения подвижности животных применяли описанный в Shuttle- Вох -тесте аппарат. При опыте на подвижность исключали все раздражители, животные должны были двигаться свободно из одной камеры в другую. Среднее число пересечений определяли в течение периода наблюдения 30 мин. Значение вычисляли при помощи исследовательского t-теста для двух средних величин.

В этом месте испытываемые соединения показали незначительное действие, снижающее подвижность.

Результаты действия тиазоло }, 5 хинолин-этансульфоната (соединение на приобретение условного рефлекса в опыте Shuttle-Box при подкожной обработке (эталон - хлордиаэепоксид) приведены в таблице.

Пример 12. Для определения связи с бензодиазепиновыми рецепторами применяли сырой препарат оболочки коры головного мозга крысы. 2ймол 3Н-диазепама инкубировали при помощи мембраны 1 ч при 0°С в трис-цитрат- буферном растворе (рН 6,8). Специфическую связь определяли в присутствии 10 Шмол диазепама; в опытах с вытеснением в качестве контрольного лекарственного средства применяли хлордиазепоксид.

Установлено, что хлордиазепоксид при определенных концентрациях ветес- нял из рецепторов 3Н-диазепам. Напротив, соединение А не изменяло специфическую связь 3Н-диазепама и при высокой концентрации.

Приготовление лекарственных составов.

Пример 13. Изготовляют таблетки следующего состава, мг: Тиазоло 4, 5-с хино- лин-этансульфонат25,0

Кукурузный крахмал97,0

Поливинилпирродидон 175,0 Стеарат магния3,0

Общий вес 300,0

Смесь активного вещества и кукурузного крахмала увлажняют 10-15%-ны водным раствором поливинилпирролидо- на, гранулируют и сушат при АО-А5°С. Полученные гранулы тщательно сушат, смешивают со стеаратом магния и прессуют в таблетки.

При мер Н. Получают капсулы следующего состава, мг: Тиазолор ,5-сП хино- лин-гидрохлорид20,0

Молочный сахар60,0

Кукурузный крахмал17,0

Тальк2,0

Стеарат магния1,0

Общий вес 100,0

Доза активного вещества может изменяться в широких пределах: ежеднев- ная оральная доза 20-1000 мг/кг, ежедневная парентеральная доза 5 250 мг/кг.

Формула изобретения

Способ получения тиазоло А, хинолина формулы

S

или его кислотно-аддитивных солеи, отличающийся тем, что З-амино-4-меркаптохинолин формулы

-.

Л

N

или его кислотно-аддитивную соль подвергают взаимодействию с муравьиной кислотой или ее реакционноспособным производным и выделяют целевой продукт в виде свободного основания или кислотно-аддитивной соли. i