Питательная среда для выделения бактерий рода СамрYLовастеR Советский патент 1991 года по МПК C12Q1/04 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике для выделения и идентификации кампилобакте- рий.

Цель изобретения - повышение селективности среды в отношении Campylobacter pylori.

Пример 1. Для получения 1 л среды смешивают компоненты в следующих соотношениях, г/л: ферментативный гидролизат казеина 13; глюкоза 4; экстракт кормовых дрожжей 4; хлорид натрия 6,3; карбонат натрия 0,5; цистеин дигидрохлорид 0,7; мочевина 2; тиогликолят натрия 0,6; бромти- моловый синий 0,02; агар 0,5.

Компоненты в указанных количествах вносят в 1 л дистиллированной воды, смесь

доводят до кипения, разливают во флаконы и автоклавируют при 1 эти в течение 20 мин. После автоклавирования 1 н. раствором соляной кислоты доводят рН среды до 7,0. После охлаждения среды до 50°С добавляют амфотерицин В 0,002 г, метронидазол 0,0005 г, налидиксовую кислоту 0,025 г, предварительно растворенные в 5 мл дистиллированной воды и простерилизованные фильтрацией через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм.

Готовую среду разливают стерильно по 5 мл в пробирки.

П р и м е р 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем количестве, г/1л воды: Ферментативный гидролизат казеина14 Глюкоза5

Оч

сл о

3

та ий-

5

6,4 0,7

5

0,75 6,0 0,5 0,003

0,0008 10 0,04 0,025 0,6

П р и м е р 3. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем количестве, г/1л воды: Ферментативный гидро- лизат казеина16

Глюкоза6

Экстракт кормовых

дрожжей. 6

Хлорид натрия6,5

Карбонат натрия0,95

Цистеин дигидрохлорид0,8

Мочевина10

Тиогликолят натрия0,6

Амфотерицин В0,004

Метронидазол0,001

Налидиксовая кислота0,05

Бромтимоловый синий0,03

Агар0,7

П р и м е р 4. Три варианта сред засевают исследуемой культурой, Посевы инкубируют при 37°С в течение 4-5 сут в обычных аэробных условиях (до 20% кислорода). При изменении окраски среды с травянисто-зеленой (оливковой) на синюю определяют наличие С. pylori. Отдельные штаммы стрептококков, растущие на данной среде, окрашивают среду в желтый цвет. Чувстви- тельность среды 106микр. кл/мл.

Среда подавляет рост Proteus spp., Escherichia coli, Pseudpmonas aeruginosa. Bacillus spp., Candida albicans и большинство штаммов Streptococeus spp.

При посеве на среду обсемененного патологического материала(биоптаты, операционный материал и т д.) С. pylori выявляют через 30-120 мин инкубации по появлению синей окраски на инфицированных кампи- лобактериями участках ткани.

Результаты испытания среды по выделению и идентификации С. pylori представлены в таблице.

Использование, питательной среды позволяет повысить точность выявления С. pylori за счет повышения селективных свойств среды.

Формула изобретения Питательная среда для выделения бактерий рода Campylobacter, содержащая питательную основу, глюкозу, экстракт кормовых дрожжей, минеральные соли, селективные агенты, агар и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения селективности среды в отношении Campylobacter pylori, она дополнительно содержит цистеин дигидрохлорид, мочевину, тиогликолят натрия и бромтимоловый синий, в качестве питательной основы она содержит ферментативный гидролизат казеина, в качестве минеральных солей - хлорид нзтрия и карбонат натрия, в качестве селективных агентов - амфотерицин В, Метронидазол и налидиксо- вую кислоту при следующем количественном соотношении компонентов, г/л; Ферментативный гидролизат казеина13-16 Глюкоза4-6 Экстракт кормовых

дрожжей4-6

Хлорид натрия6,3-6,5

Карбонат натрия0,5-0,95

Цистеин дигидрохлорид0,7-0,8

Мочевина2-10

Тиогликолят натрия0,4-0,6

Амфотерицин В0,002-0,004

Метронидазол0,0005-0,001

Налидиксовая кислота0,025-0,05

Бромтимоловый синий0,02-0,03

Агар0 5-0,7

Дистиллированная вода1 л

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике для выделения и идентификации кампи- лобактерий. Цель изобретения - повышение селективности среды в отношении Campylobacter pylori. Среду готовят следующим образом. В 1 л дистиллированной воды вносят компоненты, г/л- ферментативный гидролизат казеина 13-16, глюкоза 4-6, экстракт кормовых дрожжей 4-6, хлорид натрия 6,3-6,5, карбонат натрия 0,5-0,95, цистеин дигидрохлорид 0,7-0,8. мочевину 2-10, тиогликолят натрия 0,4-0.6, бромти- моловый синий 0,02-0,03 и агар 0,5-0.7. Смесь доводят до кипения и стерилизуют. Отдельно готовят раствор, содержащий, г/л амфотерицин В 0,002-0,004, метронидазол 0,0005-0,001 и нзлидиксовую кислоту 0,025-0,05, стерилизуют его и вносят в основной состав. Среду разливают по пробиркам и используют для посева. При росте С. pylori цвет среды изменяется с травянисто-, зеленого или оливкового в синий. 1 табл.