Способ определения активности патологического процесса при гипопластической анемии Советский патент 1991 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, в частности к гематологии, и может быть использовано при диагностике активности процесса гипо- пластической анемии.

Цель изобретения - повышение точности определения активности патоло- гического процесса.

Способ осуществляют следующим образом.

Кровь из вены больного в количестве 10 мл смешивают с 0,8 мл 2,7%-ного раствора трилона Б и разводят физиологическим раствором в соотношении 1:1. Наслаивают на фиколл- верографин плотностью 1,077 г/мл и центрифугируют 30 мин при 1500 об. /мин.

Собирают слой лимфоцитов с интерфазного кольца и дважды отмывают клетки раствором Хенкса. Для поставновки пробы с левамизолом ин витро из выделенных лимфоцитов в одну пробирку вносят 0,1 мл взвеси лимфоцитов с содержанием клеток 2x109/л, а в другую - 0,1 мл взвеси лимфоцитов этой же концентрации, предварительно проинкубированных в соотношении 1:1 с левамизолом () при 20°С в течение 1 ч. Затем в каждую из пробирок добавляют О,1 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов барана и 0,1 мл 1%-ного раствора сыворотки IV группы крови. Инкубируют 15 мин в термостате при 37°С, центрифугируют 5 мин при 1000 об./мин и посъел

ю

:о

мещают на. 18 ч в холодильник при , после чего в каждой из пробирок ведут подсчет в камере Горяева процентного содержания Т-тотальных лимфоцитов.

Определяют индекс сдвига в реакции Т-розеткообразования по отношению процентного содержания Т-лимфоцитов до инкубации к процентному содержанию их после инкубации с левамизолом ин витро.

Количество Т-тотальных резеткооб- разующих клеток 58%, а после инкубации с левамязолом 40%. Индекс сдвига 1,45.

Пример 1. Больная Б., 65 лет, находилась на лечении в гематологической клинике с 23.02.83 по 14.04.83 При.поступлении отмечалась выраженная бледность кожных покровов. В анализе крови панцитопения: НЕ 23 г/л, эр. 1,0-|012/л, ретикуяоииты 0,655, тромб, 30 109/л, л. 3,6 10 Vn, формула: а-1%

с-33%, лимф.-57, мон-9. (

Диагноз гипоплаетической анемии

подтвержден исследованием трепано- бйоптата подвздошной кости, в котором наблюдалось преобладание жировой ткани над клеточной. Розеткообразующая способность Т-лимф. периферической крови от 24.02.83: Т-тот, лимф.-40%, в пробе с левамизолом ин витро 31,5%. Индекс сдвига 1,27. Диагностирована активная стадия заболевания. Это послужило показанием для назначения иммунодепрессивной терапии. Применени антилимфоцитарного глобулина (АЛГ) с целью иммунодепрессии в разовой дозе 7 мг/кг массы тела, в курсовой до зе 2,1 г способствовало стиханию патологической активности процесса. После применения АЯГ содержание Т-клето периферической крови составило 47,9%, в пробе с левамизолом ин витро 60,8% .(47,9:60,,8). Это свидетельствовало о купировании активности патологического процесса и достаточности при мевенной курсовой дозы АЛГ. Проведенное лечение сопровождалось улучшением состояния больной, снижением потребности в заместительных трансфузиях эритроцитной массы, стиханием ге моррагичёскогб синдрома, восстановлением показателей периферической крови. Анализ крови от 14.04.83: Нв. 90 г/л, эр. 2,8МО№/л, ретику- лоциты 3,0, тромб. 60 10 Ул, 3,5 , н.-1%, с.-33%, лимф,-49%,

5

0

5

0

0

5

0

45

50

55

м.-17%. Применение андрогенов привело к возникновению стойкой ремиссии, продолжающейся до настоящего времени.

П р и м е р 2. Больная К., лечилась в гематологической клинике с 31.01.84 до 2.03.84 с диагнозом: ги- попластяческая анемия. Ухудшение самочувствия с октября 1983, появились жалобы на слабость, быструю утомляемость. Стала отмечать бледность кожных покровов. По месту жительства получила лечение преднизолоном в дозе 60 мг в сутки, курсовая доза 3,1 г. Состояние при поступлении средней тяжести. Отмечалась выраженная бледность кожных покровов. Анализ крови от Г.02.84: Нв 46 г/л, эритр. 1,4 Х1012 /л,.л. 5,7-107/л, тромб. 60х , формула: с-11%, лимфоц. 95%, моноц.-4%.

Диагноз гипопластической анемии подтвержден исследованием костного мозга в трепанобиоптате подвздошной кости. Содержание Т-тотальных лимфоцитов периферической крови от 7.02.84 28,9%, в пробе с левамизолом ин витро 39,5%, индекс сдвига 0,73.

Несмотря на наличие панцитопении в периферической крови и депрессию всех ростков кроветворения у больной не было выявлено признаков активности патологического процесса. Вероятно, терапия глюкокортикоидкыми гормонами, проведенная по месту жительства больной, была адекватной для этой больной и способствовала стиханию активности патологического процесса. Это послу- жило поводом для назначения андроге- нов (сустанон) s течение 4 мес. Курсовая доза составила 9,0. Повторное поступление в мае 1984. Состояние удовлетворительное. Жалоб нет.-Анализ крови от 23.05.84: Нв 143 г/л, эр. 4,2-10й/л, л. 4,. тромб. 318 10 /я, формула: п-1%, с-33%, э-5%, л-54,0%9 м-б%, бтО,5%. Т-тот лимфоцитов 58%, в пробе с левамизолом ин витро 58,6%. Индекс сдвига: 1,0. статирована ремиссия, лечение отме- нено.

/

Исследования, проведенные у 214 больных ГА по определению функ- , циональной активности Т-лимфоцитов периферической крови в пробе Т-активно- го розеткообразования с левамизолом ,

J16

ин витро/показали, что больные в активной стадии (острая стадия и рецидив) имели средние значения индекса сдвига в пределах 1,54+0,1. Довери- тельный интервал индекса сдвига вероятности 99% составил 1,27-1,81.

Использование предлагаемого способа диагностики активности патологи- ческого процесса у 214 больных ГА в сопоставлении с известным способом (180 больных) показало увеличение числа ремиссий с 39 до 84%, и снижение летальности с 61 до 16%.

Формула изобретения Способ определения активности патологического процесса при гипопласти- ческой анемии путем обследования больного, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, исследуют лимфоциты периферической крови в реакции Т-розетко- образования до и после инкубации с левамизолом ин витро с последующим подсчетом количества розеток и их от ношения между собой и при отношении, равном 1,27 и более, диагностируют активную стадию заболевания.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии для определения активности патологического процесса при гипо- I пластической анемии (ГА). Цель изобретения - повышение точности определения активности патологического процесса. Исследуют лимфоциты периферической крови в реакции Т-розетко- образования до и после инкубации их с левамизолом ин витро с последующим подсчетом их отношения и при отношении, равном 1,27 и более диагностируют активную стадию заболевания . Использование предлагаемого способа диагностики активности патологического процесса у 214 больных ГА в сопоставлении с известным способом определения ГА у 180 больных привело к увеличению числа ремиссий с 39 до 84% и снижению летальности с 61 до 16%, , ,001.