1(21)4301214/05 (22) 26.08.86 (46)30.06.91. Бюл. №24
(71)Всесоюзный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов
(72)О.А.Громова, А.П.Гаврюченкова. Т.А.Хрущева, Л.Н.Цуканова, С.Ф.Белая и А.Г.Болдырев (53)678,744.13(088.8)
(56) Остерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М.: Наука, 1985, с.535. Патент США № 4237218, кл. С 08 F 18/00, опублик. 1980.
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ГРАНУЛЬНОГО АНИОНИТА (57) Изобретение относится к области химии полимеров и позволяет получать аниониты для процессов хроматографического разделения биополимеров с пределом эксклюзии до 10s. Это достигается радикальной суспензионной сополимеризацией мономера - N.N-диэтиламинометилметакриламида со сшивателем - N,N-метиленбисакрилами- дом в присутствии инициатора - персульфата аммония при нагревании, причем процесс проводят предварительно растворяя сомономеры в 0,3 - 3,0 н водном растворе хлорида натрия. 3 табл.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ГИДРОФИЛЬНЫЙ ПОЛИМЕРНЫЙ СОРБЕНТ | 1992 |
|
RU2057763C1 |
| Способ получения карбоксильного катионита | 1987 |
|
SU1623994A1 |
| Способ получения полимерных гидрофильных носителей для хроматографии | 1986 |
|
SU1398902A1 |
| Способ получения азотсодержащих сополимеров | 1982 |
|
SU1121269A1 |
| СПОСОБ ОЧИСТКИ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, СОДЕРЖАЩЕГО ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПРОИНСУЛИНА | 1990 |
|
SU1839446A1 |
| СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ОПОРНО-ЗАВИСИМЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР | 1990 |
|
SU1839460A1 |
| Способ получения органоминерального анионита | 1986 |
|
SU1398901A1 |
| Способ получения сорбента для жидкостной хроматографии полимеров | 1987 |
|
SU1498775A1 |
| Способ получения сшитого полиакрилонитрила | 1975 |
|
SU529174A1 |
| Способ получения анионитов | 1988 |
|
SU1657513A1 |
Изобретение относится к химии и технологии полимеров, а именно к способу получения гранульного анионита, и может быть использовано в хроматографии для разделения биополимеров.
Цель изобретения - повышение предела эксклюзии по белкам до 10е дальтон.
Пример (контрольный). В стеклянной емкости на 500 мл приготавливали раствор диэтиламиноэтилметакриламида (ДЕАЕМ) (26 ч) в 0,2 н. раствора хлористого натрия (360 ч) и оттитровывали до рН 76 н. НО. В раствор вводили N. N -метиленбисакрила- мид (БИС) (14ч) и инициатор - персульфат аммония (ПС) (0,8 ч), которые растворяли при нагревании в течение 2 мин.
В термостатируемый реактор емкостью 1,5 л, снабженный механической мешалкой с регулируемым числом оборотов, холодильником и трубкой для барботирования аргона, помещали тридекан (600 ч), содержащий эмульгатор СПАН формулы
Г СН20(ОСС17Н33)Н С17Н33СОО
он
проводили барботаж аргоном в течение 0,5 ч и вводили реакционную смесь, приготовленную в стеклянной емкости, при непрерывном перемешивании 300 об/мин в течение 15 мин при комнатной температуре; далее включали обогрев реактора при 70°С и вводили N, N, N1, м -тетраметилэтиленди- амин (ТЕМЕД) с помощью пипетки. Процесс сополимеризации проводили в течение 3 ч. Далее мешалку выключали, гранулы переносили в фильтр и отмывали от тридекана водой с детергентом, только водой и рассеивали на ситах, выделяя фракции 20 - 50.50 - 100 (70%) и 100 - 200 мкм.
О
сл ю
го
Анионит представляет собой сферические гранулы белого цвета с хорошей гидро- динамикой в режиме хроматографии. Обменная емкость по аминогруппам ,1 мг-экв/r сухого сорбента.
Свойства представлены в табл.1.
Предел эксклюзии по декстранам - 100x103 дальтон (Mum при Kd -0.5 20хЮ3 дальтон).лр
Аммонитам присвоено название Солоэа А.Г.
П р и м е р 2. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 0,5 н раствор хлористого натрия.
Предел эксклюзии по декстранам 250хЮ3 дальточ (Mum при Kd - о,5 40х103 дальтон).
П р и м е р 3. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 1,7 н раствор хлористого натрия.
Предел эксклюзии по декстранам 2x10 дальтон (Mum при Kd - о, 10 дальтон).
П р и м е р 4. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 2,0 н раствор хлористого натрия.
Предел эксклюзии по декстранам 2х106 дальтон (Mum при Kd - 0,5 ЗООхЮ3 дальтон).
П р и м е р 5. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 2,5 н раствор хлористого натрия.
Предел эксклюзии по декстранам 10 (Mtfrn при Kd - 0,5 500x10 дальтон).
П р и м е р 6. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 3,0 н раствор хлористого натрия. Предел эксклюзии по декстранам 10 (Mum при Kd - 0. дальтон).
Пример. Данные приведены в табл.1.
Примере (контрольный). То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали воду.
Предел эксклюзии ,по декстранэму 40x10 дальтон (Mum при Kd - о 5 10x10J дальтон).
ПримерЭ (контрольный). То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 4 н раствор хлористого натрия./
Предел эксклюзии по декстранам 108 (Mum при Kd - 0, дальтон).
Условия получения анионитов приведены в табл.2.
Данные по хроматографированию биополимеров на анионите приведены в табл.3.
0
5
Формула изобретения Способ получения полимерного гранульного анионита путем радикальной суспензионной сополимеризации N.N- диэтиламиноэтилметактриламида с N.N1 метиленбисакрияамидом в присутствии персульфата аммония при нагревании, отличающийся тем, что, с целью повышения предела эксклюзии по белкам до 106 дальтон, сополимеризацию проводят в 0,3 - 3,0 н водном растворе хлористого натрия.
Таблица 1
Таблица 2
Таблица 3
