Способ определения количества живых микроорганизмов в воде Советский патент 1991 года по МПК C12N1/00 G01N33/18 

Изобретение относится к микробиологии, санитарной гидробиологии, анализу производственных и природных вод для оценки степени загрязнения их микроорганизмами и может быть использовано для контроля воды в системах оборотного водоснабжения.

Цель изобретения - повышение точности определения.

Способ осуществляют следующим образом.

Отбирают пробу воды (1-10 мл), фильтруют ее, например, через мембранный фильтр № 2 с помощью воронки Зейтца при комнатной температуре и получают микро- биальную взвесь ультрафильтрата.

Вводят в полученную микробиальную взвесь ультрафильтрата краситель 0,1-0,6%-ный раствор трифенилтетразо- лий хлорида (ТТХ), помещая мембранный фильтр и бумажный фильтр, смоченный указанным растовром ТТХ, между двумя стеклянными пластинками (предметное и

покровное стекло) и выдерживая их при 25- 35° С в течение 3-16 ч. Если инкубацию проводят в течение менее 3 ч и используют раствор ТТХ с концентрацией ниже 0,1 %. не достигается достаточно интенсивного окрашивания. Применение более высокой концентрации ТТХ и более длительная инкубация не улучшают результата.

Затем высушивают микробиальную взвесь на покровном стекле, удалив бумажный фильтр и предметное стекло. Готовят препарат и проводят микроскопический подсчете помощью масляной имерсии.

Для определения эффективности действия биоцидов проводят оценку исходного количества живых микроорганизмов и последующего изменения этой характеристики после инкубации в течение 3 ч с раствором биоцида. Результаты анализа могут быть зафиксированы фотографически.

П р и м е р. 5 мл охлаждающей воды ВОЦ химического предприятия фильтровали через мембранный фильтр № 2. Фильтр помеOs ON

ГО

О

сл

щали на фильтровальную бумагу, смоченную 0,6%-ным раствором ТТХ. Оба фильтра сжимали двумя стеклянными пластинками, не оставляя между ними пузырьков воздуха. Окрашивание осуществлялось в течение 3 ч при 25° С. Затем снимали стекло с бумажным фильтром, мембранный фильтр высушивали, готовили препарат для микроскопирования методом масляной иммерсии. Подсчитывали окрашенные форма- зоном клетки в 20 полях зрения.

В анализируемой охлаждающей воде определено 3,7х106 кл/см3 живых микроорганизмов (среднее из расчета 20 полей зрения).

Определения живых микроорганизмов в природной и производственной водах показали, что предлагаемый метод является экспрессным (6- 20 ч вместо 48-72 ч), интегральным, т.е. учитывает бактериальное население, водоросли и другие живые организмы, дает возможность оценить степень биозагразнения воды, а также эффективность бактерицидов.

Использование предлагаемого способа определения количества живых микроорганизмов повышает точность определения более, чем в 10 раз, и позволяет осуществлять измерения в абсолютных единицах в присутствии мешающих агентов (химических соединений, влияющих на интенсивность флуоресценции ).

Ф о р м у л а и з о б р е те н и я

Способ определения количества живых микроорганизмов в воде, предусматривающий отбор пробы воды, внесение в пробы красителя трифенилтетразолий хлорида и

оценку количества живых микроорганизмов, отличающийся тем. что, с целью повышения точности определения, после отбора пробы осуществляют ее фильтрацию, полученную взвесь ультрафильтрата

высушивают, краситель вносят в полученную микробиальную взвесь ультрафильтрата, а оценку численности живых микроорганизмов проводят их прямым подсчетом в высушенной взвеси.

Изобретение относится к микробиологии, санитарной гидробиологии и может быть использовано для контроля воды в системах оборотного водоснабжения. Целью изобретения является повышение точности определения. Пробу воды фильтруют, в микробиальную взвесь ультрафильтрата вводят краситель ТТХ, выдерживают, оценку численности живых микроорганизмов проводят их прямым подсчетом в высушенной взвеси.