Способ инверсионного вольтамперометрического определения мочевой кислоты Советский патент 1991 года по МПК G01N27/48 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к адсорбционному инверсионно-вольтамперометрическому способу определения важнейшего природного вещества - 2,6,8-триоксипурина (моче- вая кислота, МК), которая является конечным продуктом пуринового метаболизма у человека (животных)и образуется во всех его тканях. При нарушениях обмена веществ, количество ее увеличивается в моче и крови, особенно при падагре, панкреатитах, болезнях почек, токсикозах беременности и других гематологических заболеваниях.

Цель изобретения - разработка высокочувствительного, экспрессного и селективного способа определения мочевой кислоты.

Способ реализуется следующим образом.

П р и м е р.1. Определение мочевой кислоты на уровне п 10 М в чистых растворах. В кварцевый стаканчик емкостью 15 мл наливают 5 мл калия фталевокислого кислого, рН 4,00. Раствор деаэрируют азотом (о.с.ч.) в течение 3 мин и, не прекращая перемешивания, проводят электролиз раствора при условии: рэ 0,35 В, гэ 300 с. Отключают газ и снимают анодную поляризационную кривую при скорости 30 мВ/с, начиная с потенциала 0,20 В. Отсутствие пиков и волн свидетельствует о чистоте фоOs

СК СП ho О

ю

на. Затем добавляют п капель объемом 0,02 мл стандартного раствора МК (0,5-1,0)-1СГ4 М, перемешивают 5 с и проводят накопление осадка при рэ 0,35 В и гэ 300 с. Съемку полярограммы начинают с потенциала 0,25 В, Пик для указанной концентрации МК регистрируют в интервале потенциалов от 0,51 до 0,55 В при чувствительности прибора (5.2-10,0) А/мм. единичного анализа не превышает 15 мин.

П р и м е р 2. Определение мочевой кислоты в моче на уровне , В кварцевый стаканчик емкостью 15 мл наливают 5 мл раствора СвНвСМК, рН 4,0 и помещают в электролизер. В течение 2 мин удаляют из раствора кислород газообразным азотом (или аргоном) с содержанием 02 менее 1 -10 %. Отключают газ и проверяют чистоту фона, фиксируя анодную вольтам- перограмму от 0,20 до 1,10 В при скорости 30 мВ/с. Затем добавляют к электролиту одну каплю концентрированной НМОз и одну каплю свежеотобранной мочм (объем капли 0,02-0,03 мл), перемешивают 20с м проводят съемку вольтамперной кривой, начиная с потенциала 0,20 В, Волну регистрируют в диапазоне потенциалов 0,45-0,50 В и чувствительности прибора А/мм. После этого добавляют 4 капли (V 0,02 мл) стандартного раствора МК концентрации 210 М, перемешивают газом 20 с вновь проводят съемку вольтамперограммы в тех же условиях. Содержание МК в моче оценивают методом добавок стандартных растворов с учетом разбавлений пробы по общепринятой методике. Время анализа одной пробы примерно 7-10 мин.

Примерз. Определение мочевой кислоты на уровне (0,7-15,0) в чистых растворах. В кварцевый стаканчик емкостью 15 мл наливают 5 мл ацетатного буфера рН 5,50-5,40. Раствор деаэрируют азотом с содержанием кислорода менее 0,001% в течение 3 мин и, не прекращая перемешивание, проводят электропиз при условии рз 0,35 В, гэ 300 с. Отключают газ и снимают дифференциальную импульсную вольтамперограмму при скорости 10 мВ/с с амплитудой 25 мВ и временем импульса 1 с (ti), начиная с потенциала 0,30 В. Отсутствие пиков свидетельствует о чистоте фона. Затем добавляют п капель (объем капли 0,01-0,03 мл) стандартного раствора МК , перемешивают 3-5 м проводят накопление осадка при рэ 0.35 В; гэ 300 с. Съемку вольтамперограммы проводят в тех же условиях: W 10 мВ/с, амплитуда 25 мВ. ti - 1: р 0.30 В без

перемешивания газом. Время единичного анализа не превышает 15 мин. Аналогично проводят определение МК на других подобранных фонах, описанных в способе. Таким образом, способ позволяет расширить число определяемых методом инверсионной вольтамперометрии органических соединений, т.е. продуктов куринового метаболизма, содержащих оксигруппу на

0 примере природного вещества 2,6, 8-триок- сипурина (МК), Оценка нижней границы определяемых концентраций МК свидетельствует о высокой чувствительности способа. Количественное определение МК вольтам5 перометрическими методами имеет значительные преимущества по сравнению с известными методами не только по чувствительности, но и экспрессности. Время анализа сокращается примерно в 100 раз,

0 чувствительность повышается на 2-3 порядка, уменьшается число используемых реактивов. Предложенный способ прост, обладает хорошей воспроизводимостью и абсолютной чувствительностью (для анали5 за достаточно 1 капли (0,02 мл/мочи). Способ обладает высокой селективностью: не мешают определению аминокислоты, цис- тин, цистеин, анионы, щавелевая кислота, мочевина, фенолы, белки. Способ позволяет

0 увеличить воспроизводимость поляризационных кривых при анализе низких концентраций (). использование фонов, указанных в способе позволяет определять анализируемое соединение в слож5 ной по составу смеси (моче, крови, растворах) без предварительного выделений с высокой точностью в мутных и окрашенных средах. Может применяться для анализа лекарственных пуриновых ве0 ществ, крови и плазмы, объектов окружающей среды (сточных вод и почвы).

Формула изобретения

1. Способ инверсионного вольтамперо5 метрического определения мочевой кислоты, включающий электрохимическое концентрирование мочевой кислоты на стеклоуглеродном электроде с последующей регистрацией анодных поляризацион0 ных кривых, отличающийся тем, что. с целью повышения чувствительности, экспрессности и селективности способа определения мочевой кислоты, концентрирование проводят при потенциале

5 электролиза 0,3-0,4 В в течение 300-600 с на фоне с рН 4,00-6,00 с последующей регистрацией вольтамперных кривых при скорости линейной развертки потенциала 30 мВ/с и потенциала анодных поляризационных кривых мочевой кислоты от 0,43 до

0,55 В относительно насыщенного каломельного электрода в присутствии 0,02- 0,04 мл концентрированной азотной кислоты.

2.Способ по п. 1,отличающийся тем, что на фоне калия фталевокислого кислого кислого с рН 4,0 анодную поляризационную кривую мочевой кислоты регистрируют при потенциале 0,50-0,55 В.

3.Способ по п. 1,отличающийся тем, что на фоне ацетатного буфера с рН 4,50-5,40 анодную поляризационную кри0

вую мочевой кислоты регистрируют при потенциале 0,45-0,50 В.

4.Способ по п. 1,отличающийся тем, что на фоне смеси NaaHPCM KH2PCM при рН 5,00-6,00 анодную поляризационную кривую мочевой кислоты регистрируют при потенциале 0,43-0,50 В.

5.Способ по п.1,отличающийся тем, что дифференциально-импульсные вольтамперограммы мочевой кислоты регистрируют при скорости 10 мВ/с, амплитуда 25 мВ и времени импульса 1 с.

Изобретение относится к аналитической химии природных пуриновых веществ на примере 2, 6, 8-триоксипурина (мочевая кислота). Цель изобретения - разработка высокочувствительного экспрессного и селективного способа определения мочевой кислоты. Указанная цель достигается тем, что проводят накопление в перемешиваемом растворе в течение 300 - 600 с при потенциале электролиза 0,30 - 0,40 В на фонах калия фталевокислого кислого (C₈H₅O₄K), PH 4,00, ацетатного буфера, PH 4,50 - 5,40, смеси KH₂PO₄ и NAHPO₄, PH 5,00 - 6,00 с последующей регистрацией вольтамперных кривых при скорости линейной развертки потенциала 30 мВ/с или дифференциально-импульсных вольтамперограмм при скорости 10 мВ/с, амплитуде 25 мВ, времени импульса 1 с и потенциалах анодных поляризационных кривых МК соответственно 0,50 - 0,55, 0,45 - 0,50, 0,43 - 0,50 В относительно нас. к.э. в присутствии концентрированной HNO₅. 4 з.п.ф-лы.