Способ окраски нервных волокон на гистологическом препарате Советский патент 1991 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрогистологическим методам исследования.

Целью изобретения является улучшение контраста нервных структур в органах.

Способ осуществляют следующим образом.

В кровоток органа, например легкие, перфузируют раствор, содержащий 5%-ную глюкозу, до полного освобождения сосудов от крови. Далее в те же сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфоксид, Температура раствора 10-15°С и рН 3,5-3,8,

Далее орган извлекают, перевязывают сосуды и помещают в емкость с той же жидкостью на 10-15 мин. Затем в артерии органа вводят 0,3-0,6%-ный раствор сульфида натрия, рН которого 7,3-7,4, рН устанавливают азотной кислотой. Дополнительно орган помещают в тот же состав сульфида натрия на 15-20 мин. Орган темнеет и приобретает мраморный вид. После потемнения орган отмывают от сульфида натрия 5%- ным раствором глюкозы затем фиксируют в 10%-ном растворе формалина. Срезы готовят замороженные толщиной 20-40 мкм.

Возможна докраска препаратов любыми гистологическими красителями.

Пример. Легкое через сосуды перфузируют 5%-ным раствором глюкозы, Сосуды промывают до выхода светлого раствора. Далее вводят раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин, диметилсульфоксид, при следующих соотношениях компонентов мас.%:

Азотнокислый кобальт12,0-13,0

Цистеин45-65

Диметилсульфоксид1-2

Вода Остальное

С х|

СЛ х|

К

рН этого раствора устанавливают до 3,5- 3,8, а температура введения 10- 15°С.

Затем перевязывают все сосуды, извлекают легкое из грудной клетки и помещают в раствор того же состава на 10-15 мин. После в сосуды вводят раствор сульфида натрия. Легкое темнеет, приобретает мраморный вид, его дополнительно выдерживают в растворе сульфида натрия, затем тщательно промывают, помещают в формалин и готовят замороженные срезы,

Срезы красят гематоксилин-эозином и исследуют под микроскопом. На срезах хорошо видна структура нервных волокон, при докраске гематоксилин-эозином в дополнение хорошо видны клеточные структуры.

Способ позволяет увеличить контраст нервных структур, особенно при выявлении их в органах. Поскольку именно в органах тяжело полностью выявить все отделы волокон, в отличие от пленочной структуры. При Окраске предложенным способом также хорошо видна плотность нервных проводников, что также позволяет учесть этот критерий при оценке и анализе нервных структур в органе.

Формула изобретения

Способ окраски нервных волокон на гистологическом препарате путем импрегнации в растворе, содержащем азотнокислый кобальт, и осаждения кобальта сульфидом натрия, отличающийся тем. что, с целью улучшения контраста нервных структур в органах, импрегнацию проводят при 10-15°С и рН 3,5-3,8 раствором, дополнительно содержащим цистеин и диметил- сульфоксид при следующих соотношениях компонентов, мае. %:

Азотнокислый кобальт12,0-13,0

Цистеин44-65

Диметмлсульфоксид 1-2

ВодаОстальное

при этом осаждение проводят 0,3-0,6%- ным раствором сульфида натрия с рН 7,3-7,4.

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрогистологии. Целью является улучшение контраста нервных структур в органах. Цель достигается тем, 4fo в сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфок- сид. Перфузию проводят на промытых 5%-ной глюкозой сосудах. Температура перфузионной жидкости 10-15°С, рН 3,5- 3,8. Затем в сосуды вводят 0,3-0,6%-ный раствор сульфида натрия, рН 7,3-7,4. После потемнения органа его извлекают, фиксируют, готовят гистологические препараты. Способ позволяет проводить докраску препаратов любыми гистологическими красителями. На препаратах видна вся сеть нервных волокон.