Способ количественного определения желчных кислот Советский патент 1991 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть использовано для количественного определения желчных кислот, являющихся важнейшей составной частью желчи и играющих большую физиологическую роль.

Целью изобретения является повышение чувствительности определения и упрощение способа.

П р и м е р 1. Определение желчных кислот (ЖК) предлагаемым способом.

В градуированную пробирку помещают 1 мл глицинового буферного раствора с ,0, 1Д мл водного оаствора родамина у 6Ж (Р6Ж) 2.5-КГ4 М, 0,5 мл 1, рас- твора монооктилового эфира полиэтиленг- ли.коля-30 (МОФЭП-30) и аликвотную часть анализируемого раствора, содержащую 5- 400 мкг желчной кислоты. Доводят раствор до 6 мл дистиллированной водой и измеряют его оптическую плотность на спектрофотометре при Я 550 нм в кювете см относительно раствора сравнения, не содержащего желчных кислот Содержание желчных кислот в анализируемом растворе определяют по градуировочному графику Построение градуировочного графика проводят аналогично с использованием стандартного раствора определяемой желчной кислоты.

Результаты количественного определения различных желчных кислот приведены в табл. 1.

Таким образом, результаты, представленные в табл. 1, показывают, что предлагаемым способом возможно проводить определение ЖК при их содержании 5-300 мкг в 6 мл конечного обьема или 0,8-50 мг/л с относительной погрешностью 0,6-9,1%. Среднее время единичного определения желчных кислот 2-3 мин

П р и м е р 2. Обоснование необходимости использования смеси Р6Ж и МОФЭП-30

О

VI ел VJ

СЛ

о

|

при определении ЖК предлагаемым способом.

Введение ЖК, в молекулах которых содержатся 2-3 оксигруппы (холевая, дезокси- холевэя кислоты), в водные растворы Р6Ж в отсутствии МОФЭП-30 не приводит к изменению характера спектров поглощения растворов, что определяет принципиальную невозможность определения этих ЖК. Данные, представленные в табл. 2, показывают принципиальную невозможность определения холевой и дезоксихолевой кислот предлагаемым способом при использовании в качестве цветореагента Р6Ж в отсутствие МОФЭП-30. Определение выполняют аналогично примеру 1 без введения раствора МОФЭП-30.

П р и м е р 3. Обоснование предлагаемого соотношения концентраций Р6Ж и МОФЭП-30.

Данные, представленные в табл. 1, показывают возможность определения ЖК предлагаемым способом при молярном соотношении концентраций Р6Ж:МОФЭП- .

В табл. 3 приведены результаты определения ЖК при других значениях соотношения концентраций Р6Ж и МОФЭП-30 предлагаемого интервала, а также при значениях Р6Ж:МОФЭП-30, выходящих за предлагаемый интервал. Определение выполняют аналогично примеру 1 с использованием постоянной концентрации Р6Ж и переменной концентрации МОФЭП-30.

Данные, представленные в табл. 3, показывают возможность реализации цели изобретения при использовании в качестве цветореагента смеси Р6Ж-МОФЭП-30 в широком интервале значений соотношения

концентраций последних. Максимальная чувствительность способа реализуется при использовании РбЖ и МОФЭП-30, взятых в молярном соотношении 1:(16-24). Выход за

указанный интервал приводит к уменьшению чувствительности способа. Так, при соотношении Р6Ж:МОФЭП-30 равном 1:() возможно количественное определение дезоксихолевой кислоты при ее содержании

20 мкг и более в анализируемом растворе, при других соотношениях Р6Ж-МОФЭП-30 предел обнаружения дезоксихолевой кислоты составляет 40 мкг и более. Качественно подобные результаты наблюдаются при определении холевой и литохолевой кислот.

Таким образом, использование предлагаемого способа определения ЖК дает положительны и эффект по сравнению с известным способом, выражающийся в повышении чувствительности способа определения в 30 раз (минимально определяемая концентрация ЖК в пробе 0,8 мг/л вместо 24,4 мг/л по прототипу); упрощении способа определения и повышении его экспрессности минимум в 25 раз (время единичного определения ЖК 2-3 мин вместо 70-75 мин по прототипу).

Формула изобретения Способ количественного определения

желчных кислот путем обработки анализируемой пробы химическим реагентом с последующим фотометрированием раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения и его упрощения, в качестве реагента используют смесь родамина 6Ж и монооктил- фенилового эфира полиэтиленгликоля 30, при их молярном соотношении 1:().

Изобретение касается аналитической химии, в частности количественного определения желчных кислот, играющих важную физиологическую роль в организме человека и животных Цель - повышение чувствительности и упрощение анализа Его ведут обработкой пробы смесью радамина 6Ж и монооктилфенилового эфира полиэтиленг- ликоля-30 (молярное соотношение 1:(16-24) с последующим фотометрированием раствора. В этом случае достигается повышение чувствительности в 30 раз (с 24,4 до 0,8 мг/л) и сокращение времени анализа с 70- 75 до 2-3 мин, что позволяет использовать способ в качестве экспресс-метода 3 табл.

Таблица 1

ЖК

Холевая

езоксихолевая

Введено ЖК, мкг

50 100 200 300

50 100 200 300

Таблица 2

Найдено ЖК

Не обнаружено

ТаблицаЗ