Способ дифференциации биоваров холерного вибриона Советский патент 1991 года по МПК C12N1/00 C12Q1/04 

Изобретение относится к микробиологии, в частности к дифференциации холерных вибрионов.

Цель изобретения - повышение точности дифференциации.

Пример 1. Расплавляют и охлаждают до 45-50°С питательный агар (рН 7,0-7,2), в одну часть которого добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл среды, в другую - такое же количество полимиксина и 0,1-0,5 г доде- цилсульфата натрия на 1 мл среды. После тщательного перемешивания среду разливают в чашки Петри. На застывшие агаровые пластинки наносят обычной бактериологической петлей 3- или 18-часовую бульонную культуру. Посевы инкубируют в течение 18 ч при 37°С. Спустя это время проводят учет результатов.

Если на питательной среде, содержащей только полимиксин, регистрируется рост холерного вибриона, то исследуемая культура относится к биовару эльтор, отсутствие роста говорит об отношении микроорганизма к биовару classics.

Сравнительный анализ результатов роста на среде с полимиксином и среде, содержащей полимиксин с додецилсульфатом натрия, позволяет выявить специфическое подавление роста V. cholerae classica именно полимиксином и исключить угнетающее влияние побочных факторов. Полноценный рост биовара classica на средах с полимиксином и додецилсульфатом натрия подтверждает факт угнетения роста этого биовара полимиксином на средах, содержащих только антибиотик, при сохраненном росте холерных вибрионов биовара эльтор. Полученные результаты приведены в таблице.

Пример 2. Культуры V. cholerae eltor и V. cholerae classica выращивают в течение 3 ч при 37°С на бульоне Хоттингера (рН 7,2). В расплавленный и охлажденный до 45°С агар Хоттингера (рН 7,2) добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл, Разделяют на две порции, в одну из которых добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,1 г/мл. Тщательно перемешивают и разливают в

Ё

О

о со

о

со ю

чашки Петри. Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри:одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37°С в течение 18ч. При учете результатов на первой чашке отмечался только рост культур биовара эльтрр, на контрольной чашке выросли культуры как биовара эль- тор, так и биовара classica.

П-р и м е р 3. Культуры V. cholerae eltor и V. cholerae classica выращивают в течение 18 ч при 37°С на бульоне Хоттингера (рН 7,2), добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл. Разделяют на две порции, в одну из которых добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,3 г/мл. Тщательно перемешивают, разливают в чашки Петри. Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри: одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37°С в течение 18ч. При учете результатов на опытной чашке выросли только культуры биовара эльтор, на контрольной - культуры обоих биоваров.

Пример 4. Культуры V. cholerae eltor и V, cholerae classica выращивают в течение 3 ч при 37°С на бульоне Хоттингера (рН 7,2). Расплавленный и охлажденный до 45°С агар Хоттингера (рН 7,2) разделяют на две части, предварительно внеся в него полимиксин из расчета 30 ед/мл. В одну из Цастей добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,5 г/мл, тщательно перемеши- йают и разливают в чашки Петри. Культуру

после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри: одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37°С в течение 18 ч. При учете результатов на опытной чашке обнаружен только рост биовара эльтор на контрольной выросли культуры

биоваров эльтор и classica.

Полноценный рост биовара classica на средах, содержащих додецилсульфат натрия и полимиксин, подтверждает факт угнетения роста этого биовара полимиксином

на средах только с антибиотиком при сохраненном росте в обоих случаях холерных вибрионов биовара эльтор.

Таким образом, в результате использования способа контроля определения биовара холерного вибриона повысилась достоверность индентификации выделяемых культур за счет исключения влияния неучтенных побочных факторов, которые могут дать искаженную картину лабораторной диагностики.

Формула изобретения Способ дифференциации биоваров холерного вибриона путем посева исследуемой бульонной культуры на питательную

среду с полимиксином с последующей инкубацией и дифференциацией биовара эльтор от биовара classica по наличию роста, о т- личающийся тем, что, с целью повышения точности дифференциации, исследуемую культуру параллельно сеют на среду с полимиксином, дополнительно содержащую 0,1-0,5% додецилсульфата натрия, и при наличии роста на обоих средах дифференцируют биовар эльтор.

Изобретение относится к микробиологии, в частности к дифференциации холерных вибрионов. Цель изобретения - повышение точности дифференциации. Изобретение заключается в том, что исследуемые культуры холерных вибрионов высевают на питательную среду, содержащую полимик- син, и на контрольную среду, содержащую полимиксин и додецилсульфат натрия. Дифференциацию проводят путем сравнения наличия роста культур на опытной и контрольной средах. Этот способ повышает достоверность идентификации исследуемых культур холерных вибрионов. 1 табл.