СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛАМИДИЙНОЙ ИММУННОЙ АСЦИТИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ Советский патент 1995 года по МПК A61K39/00 A61K39/118 

Изобретение относится к иммунологии, в частности к способам получения хламидийной иммунной асцитической жидкости (ИАЖ), тождественной по своему составу и специфической активности соответствующим иммунным сывороткам крови, которые предназначены для приготовления сывороточных иммуноглобулиновых диагностических препаратов, используемых для выявления хламидий в клинических, эпидемиологических, энзоотических и экспериментальных материалах.

Цель изобретения получение родоспецифической иммунной сыворотки, пригодной для приготовления диагностикумов.

П р и м е р 1. Для иммунизации берут беспородных белых мышей массой 18-20 г. Иммунизацию проводят антигенной смесью, состоящей из равных объемов 10%-ной суспензии инфицированных органов мышей, содержащих хламидии пситтакоза, штамм "Лори", энзоотического аборта овец, штамм "ЕАЕ" и венерической лимфогранулемы, штамм "Импорт", LD₅₀ каждой из которых при титровании в мозгу мышей массой 4-5 г составляет 1 ˙10⁶.

Смесь вводят внутримышечно в объеме 0,1 мл вместе с таким же объемом адъюванта Фрейнда в первый и восьмой день после начала иммунизации. После 4-недельного перерыва такую же антигенную смесь, состоящую из равных объемов 10%-ных суспензий трех вышеназванных сероваров хламидии, вводят без адъюванта животным внутрибрюшинно на 37-й день в объеме 0,2 мл, через три дня, на 40-й день, в объеме 0,3 мл, на 43-й день в объеме 0,4 мл. Еще через три дня, на 47-й день от начала иммунизации, также внутрибрюшинно вводят в объеме 0,2% -ную взвесь клеток асцит-саркомы Тд-180 и в заключение, на 50-й день исходную смесь из равных объемов 10%-ной суспензии органов мышей, зараженных в отдельности каждым из трех перечисленных сероваров хламидий, внутривенно без адъюванта.

Сбор ИАЖ проводят по мере ее накопления, начиная с 7-8-го дня после последней инъекции антигена (57-58-й день от начала иммунизации) путем повторных пункций брюшной полости. При хорошем уходе за животными от одной мыши за 3-4 пункции можно получить до 30 мл ИАЖ. Максимальной специфической активностью обладают порции ИАЖ, взятые в период с 10-го по 20-й день после окончания иммунизации. Одновременно взятые у нескольких мышей ИАЖ сливают и центрифугируют при 3-4 тыс. об/мин в течение 20 мин для освобождения от клеточных элементов и фибрина. Надосадочную (прозрачную) ИАЖ используют по назначению.

Суммарные данные результатов сравнительной проверки в непрямом методе флуоресцирующих антител (НМФА) спектра и уровней специфической активности хламидийных ИАЖ, полученных предлагаемым способом и способом-прототипом, приведены в табл. 1.

Из табл. 1 следует, что предлагаемый способ по сравнению с прототипом имеет следующие преимущества.

1. Получаемые с его помощью ИАЖ обладают широким спектром специфической активности, обеспечивающим в отличие от прототипа, взаимодействие с большинством практически значимых сероваров рода хламидий.

2. Уровень (титры) накапливающихся в ИАЖ специфических антител в 2-8 и более раз выше, чем у прототипа.

Результаты статистической обработки данных, полученных при титровании соответствующих ИАЖ непрямым иммунофлуоресцентным методом с использованием критерия Стьюдента, представлены в табл. 2.

Положительный эффект, который может быть получен от использования изобретения, заключается в следующем.

1. Существенно расширяются диагностические возможности изготовляемых из этих ИАЖ иммуноглобулиновых препаратов, которые могут применяться для выявления хламидий в клинических, эпидемиологических, энзоотических материалах.

2. Повышается эффективность (производительность и надежность) производственного изготовления на основе этих ИАЖ серийных хламидийных иммуноглобулиновых диагностикумов.

Изобретение относится к иммунологии и предназначено для приготовления иммуноглобулиновых хламидийных диагностических препаратов. Способ обеспечивает получение родоспецифической иммунной сыворотки, пригодной для приготовления диагностикумов. Для осуществления способа используют 10%-ную суспензию антигенов трех видов хламидий: пситтакоза, штамм "Лори", энзоотического аборта овец, штамм "ЕАЕ", и венерической лимфогранулемы, штамм "Импоро", взятых в равных объемах. Хламидийсодержащую суспензию вводят животным вначале внутримышечно в адъюванте Фрейнда, а затем при повторной иммунизации внутрибрюшинно. Также внутрибрюшинно вводят взвесь клеток асцит- саркомы Тд-180. В заключение исходную смесь вводят животным внутривенно без адъюванта. Приготовленные из иммунной асцитической жидкости диагностические препараты универсальны и в силу широкого спектра специфической активности выявляют любые серовары всех видов хламидий 2 табл.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛАМИДИЙНОЙ ИММУННОЙ АСЦИТИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ, включающей последовательные внутримышечную, а затем внутрибрюшинную иммунизацию мышей хламидийной суспензией с последующим введением им внутрибрюшинно клеток асцит-саркомы и сбором асцитической жидкости, отличающийся тем, что, с целью получения родоспецифической иммунной сыворотки, пригодной для приготовления диагностикумов, в качестве хламидийной суспензии используют равновесную 10% -ную смесь антигенов трех видов хламидий: пситтакоза, штамм "Лори", экзотического аборта овец, штамм ЕАЕ и венерической лимфогранулемы, штамм "Импорт", при этом дополнительно проводят иммунизацию антигенной смесью внутривенно.