Матрица для обнаружения пестицидов, обладающих антиэстеразным действием Советский патент 1991 года по МПК C12Q1/46 

Изобретение относится к области аналитической химии, касается разработки простейших средств обнаружения пестицидов и может быть использовано для производства индивидуальных средств контроля за содержанием пестицидов в воде, пищевых продуктах, воздухе и пробах почвы.

Известно индикаторное устройство, включающее подложку с буфером, ферментом, индикатором крахмалом и глицерином. Субстрат наносится в процессе анализа.

Недостатком является необходимость в проведении нескольких операций.

Наиболее близким по своей технической сущности к предлагаемому объекту и взятым в качестве прототипа является инди-г каторное средство для обнаружения.пестицидов.

Конструктивно индикаторное средство выполнено в виде двух бумажных подложек, на одной из которых нанесены фермент и фосфатный буфер, а на другой подложкена- несен субстрат. Для удобства эксплуатации обе подложки соединены между собой, в частности выполнены на одном носителе,

В качестве фермента используется хо- линзстераза камбалы, иммобилизованная с помощью стабилизаторов: сахарозы и низкомолекулярного декстрина Т10. В качестве субстрата служит 2,6-дихлориндофенилаце- тат. Бумагой служит хроматофафи«еская бумага из целлюлозы типз Whatman OE 81.

Процесс обнаружения пестицидов заключается в смзчичании анализируемой водой ферментной подложки, инкубации ее в течение нормированного времени и после 4 О

VJ

4 Ю

дующим контактировании субстратной подложки на ферментную путем подгиба обеих подложек.

Недостатком описанного средства является относительная сложность в проведе- нии анализа, вызванная наличием нескольких операций, регламентированных во времени, а именно необходимость использования специальной емкости с водой (например, шприц-тюбик) для смачивания ферментной бумажной, подложки, инкуба- цию ее в течение нормированного времени (и контактирования ее с субстратной бумажной подложкой путем их подгиба. Все это вызывает определенные неудобства в эксплуатации, требует точности проведения операций и определенного навыка.

Целью изобретения является упрощение проведения анализа.

Матрица (индикаторное средство) выполнена на одной бумажной подложке, на которую нанесены все компоненты биохимической рецептуры: фермент, фосфатный буфер, субстрат и индикатор. При этом в качестве субстрата берут сг-тионафтилаце- тат, в качестве индикатора-дихлорфенилин- дофенолят натрия, в качестве фермента - ацетилхолинэстераза эритроцитов крови человека или микробную эстеразу 1.

Пример 1. Процесс изготовления индикаторного средства.

Бумажную матрицу (подложку) пропитывают буферно-индикаторным раствором фермента, а именно сначала готовят раствор индикатора в буфере. Затем полученным раствором разбавляют сухую навеску фермента. Полученным раствором пропитывают бумажную подложку, после чего ее сушат на воздухе. Затем этот билет пропитывают бензольным раствором субстрата и повторно сушат на воздухе. Подложкой служит хроматографическая бумага.

По описанной технологии были изготовлены экспериментальные образцы индикаторных средств с содержанием ингредиентов, приведенных в таблице.

Затем индикаторные средства испытывались на чувствительность к пестицидам, обладающим антиэстеразнам действием в воде. В качестве пестицидов использовались хлорофос, ДДВФ и метафос. Чувствительность оценивалась по изменению окраски зараженного пестицидом индикаторного средства по сравнению с незараженным, а именно 2 индикаторных средства

параллельно погружались на 4-5 с соответственно в воду, содержащую пестицид и не содержащую его, и визуально наблюдали разницу в окраске обоих средств. При этом при погружении индикаторного средства в

чистую воду окраска индикаторного средства к 15-17 мин обесцвечивалась, в то время

как при погружении в воду, содержащую гтестицид, окраска индикаторного средства к этому времени сохранялась голубой. Чувствительность индикаторного средства ко всем трем пестицидам практически одинаковая.

Результаты испытаний представлены в таблице.

Результаты испытаний показывают, что в диапазоне указанных в таблице концентраций хлорофоса, ДДВФ и метафоса индикатора средство обеспечивает надежную чувствительность к ним в воде в концентрации 2 мг/мл и выше.

Формула изобретения

Матрица для обнаружения пестицидов, обладающих антиэстеразным действием, включающая импрегнированную ферментом и фосфатным буфером бумажную матрицу, отличающееся тем, что, с целью упрощения проведения анализа, бумажная матрица дополнительно импрегнирована субстратом и индикатором, при этом в качестве субстрата берут а-тионафтилацетат, в качестве индикатора - дихлорфенилиндо- фенолят натрия и в качестве фермента - ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека или микробную эстеразу 1.

Изобретение относится к области аналитической химии, касается разработки простейших средств обнаружения пестицидов и может быть использовано для производства индивидуальных средств контроля за содержанием пестицидов в воде, пищевых продуктах, воздухе и пробах почвы. Целью изобретения является упрощение проведения анализа. Матрица индикаторного устройства выполнена на одной бумажной подложке, на которую нанесены все компоненты биохимической рецептуры: фермент, фосфатный буфер, субстрат и индикатор. При этом в качестве субстрата берут а-тмонафтмл ацетат, в качестве индикатора - дихлорфениликдофеколят натрия, в качестве фермента - ацетилхолпнэ- стеразу эритроцитов или зст-jpasy t. Чувствительность анализа до 1 мг/л. 1 табл.