Способ прогнозирования течения туберкулезного процесса Советский патент 1991 года по МПК G01N33/53 

Ё

Изобретение относится к медицине, а именно фтизиатрии и иммунологии. Цель способа - упрощение прогнозирования течения туберкулезного процесса. Прогноз осуществляют на основании определения в крови больных туберкулезом титров R-бел- ков по торможению реакции гемагглютина- ции между анти-В-сывороткой (полученной при иммунизации кролика R-белками человека) и эритроцитами человека О (I) группы крови Rh (+). При титрах до 1:12800 прогноз туберкулеза считается благоприятным, а при титрах 1:25600 и выше неблагоприятным.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, иммунологии, и может

найти применение при целенаправленной терапии туберкулеза.

Цель изобретения - упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Реакцию ставят со стандартной анти-R- сывороткой, изготовленной в НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи АМН СССР, которую получают в результате иммунизации кроликов R-белками человека.

Уровень R-белков определяют потормо- жению реакции гемагглютинации между ан- TH-R-сывороткой и эритроцитами человека 0(1) группы Rh(+).

I этап - взятие крови для анализа.

0,05 мл крови из пальца берут в пробирку, где находится 0,5 мл физиологического раствора с консервантом крови Глюгицир

(один обьем раствора Тлютицир + три объема физраствора). Кровь центрифугируют 10 мин при 665д, отделяют надосадочную жидкость (т.е. плазму, разведенную 1:10. - проба № 1) и используют ее для определения R-белков.

II этап - титрование тест-системы.

Эритроциты человека 0(1) группы Rh(+) отмывают три раза физиологическим раствором и готовят 4 %-ную взвесь эритроцитов в физиологическом растворе.

В 12 лунок агглютинационной доски наливают по 0,2 мл 0,1 %-ного раствора альбумина, приготовленного на физиологическом растворе, или физиологического раствора. Готовят серию двукратных разведений -ан- ти-Р-сыворотки, налива первую лунку 0,2 мл анти-Р-сыворотки, разведенной 1:10. Во все лунки добавляют по 1 капле (0,025 мл) 4%- ной взвеси эритроцитов и оставляют при комнатной температуре. Реакцию учитыва 4 О

Ю СО

ел

ют через час. Рабочим разведением анти-R- сыворотки считают разведение, которое с эритроцитами человека дает агглютинацию, оцениваемую в два креста (++),

111 этап - определение R-белков в плазме крови.

Во все лунки агглютинационной доски добавляют по 0,1 мл 0,1%-ного раствора альбумина, приготовленного на физраство- ,ре,или физиологического раствора. Готовят исходное разведение исследуемой плазмы | (1:50). Для этого к 0,4 мл физраствора добавляют 0,1 мл плазмы (см. пробу № 1, п.1). В первую лунку добавляют 0,1 мл сыворотки или плазмы, разведенной 1:50. Готовят серию двукратных разведений,начиная с первой лунки по одиннадцатую включительно. Во все лунки добавляют по 0,1 мл amn-R-сы- воротки в разведении, превышающем рабочее в 2 раза, и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. Во все лунки добавляют по 1 капле (0,025 мл) 4%-ной взвеси эритроцитов человека, тщательно перемешивают и оставляют на 6-8 ч при 4°С.

Реакцию учитывают визуально, оценивая ее интенсивность по крестам: титром R-белка считают последнее разведение плазмы, которое дает ингибицию тест-системы.

Итак, 1-11-я лунки - постановка реакции с плазмой больного; 12-я лунка - контроль тест-системы (анти-Р-сыворотки) - реакция (++); в несколько свободных лунок наливают 0,2 мл 0,1%-ного раствора альбумина, приготовленного на физрастворе, или физиологического раствора и добавляют по 1 капле 4%-ной взвеси эритроцитов - реакция (-). При титрах 1:12800 ставят прогноз благоприятного течения туберкулеза, при титрах . 1:25600 - неблагоприятного.

Предлагаемый способ прогнозирования течения туберкулезного процесса отличается от прототипа тем, что прогноз делается на основании постановки не двух, а одного анализа - определения титров R- белков.

Способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. Больная М.М., 30 лет, диагноз: инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада и обсеменения, БК(+). При поступлении жалобы на слабость, сухой кашель, плохой аппетит, повышение температуры по вечерам. Рентгенологически справа в проекции II сегмента инфильтративная тень, на фоне которой полость деструкции размером 2,5x1,5 см с неровными внутренними сгенками и очаги средней интенсивности с пери- фокальным воспалением.

По предложенному способу определен уровень R-белков, титр которых был

1:12800, на основании чего прогнозировали благоприятное течение заболевания. После проведенной антибактериальной терапии по общепринятой схеме на протяжении 5 мес состояние больной значительно улуч0 шилось: больная жалоб не предъявляла полость распада зарубцевалась, очаги уменьшились и стали плотными. Определение титров R-белков показало, что их уровень равен 1:6400. Поставленный с

5 помощью предлагаемого способа прогноз подтвердился благоприятным течением и исходом заболевания,

Пример 2. Больной Э.Б., 27 лет, диагноз: инфильтративный туберкулез вер0 хней доли левого легкого в фазе распада и обсеменения, БК(+). Жалобы при поступлении на общую слабость, кашель с мокротой, одышку, потливость, повышение температуры. Рентгенологически: слева корень рас5 ширен и инфильтрирован, в HI сегментах определяется негомогенная инфильтративная тень с участками распада, в нижних отделах левого легкого - мелкие очаги обсеменения.

0 При поступлении титр R-белка 1:25600, на основании чего был сделан прогноз неблагоприятного течения процесса. В динамике общепринятого антибактериального лечения состояние больного существенно

5 улучшилось; рентгенологически: через 5 мес инфильтрация частично рассосалась, наросли явления фиброза, полости распада сохраняются. Титр R-белка в динамике не изменялся (1:25600).

0Поставленный с помощью предлагаемого способа прогноз подтвердился неблагоприятным исходом заболевания, о чем свидетельствует слабая динамика рентгенологических показателей.

5П р и м е р 3. Больной Э.С., 24 года,

диагноз: инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада и обсеменения БК(+). При поступлении жалобы на слабость, потливость, кашель с мокро0 той, боли в груди. Рентгенологически: правый корень инфильтрирован, во II-III межреберье инфильтративная тень с несколькими участками распада, в верхних и нижних отделах - очаговые тени с инф,ильт5 рацией. Определение уровня R-белка показало, что его титр был 1:51200, что указывало на неблагоприятный исход заболевания. В связи с этим было решено лечение больного начать резервными препаратами, дающими наибольший терапевтический эффект, в результате которого через 4-5 мес состояние больного значительно улучшилось, жалоб не предъявлял; рентгенологически отмечалось рассасывание инфильтрации, закрытие полостей распада, сохранились единичные плотные очаги, с В данном примере неблагоприятный прогноз был скорректирован в результате применения комплекса наиболее эффективных антибактериальных средств. Титр R- белка снизился значительно (1:12800).

Приведенные примеры демонстрируют, как течение туберкулезного процесса подтвердило прогноз, сделанный до начала лечения. В последнем примере, в котором предполагался неблагоприятный прогноз заболевания, хороших клинико-рентгеноло- гических результатов позволило достичь применение наиболее эффективных хими- опрепаратов с самого начала лечения.

Определение R-белков в крови позволяет ставить прогноз течения туберкулезного процессам по результатам одной реакции в течение 6-8 ч.

Предлагаемый способ технически прост и доступен в выполнении, не требует дефицитных реактивов и специального оборудования. Для выполнения способа достаточно 0,5 мл крови. Способ легко воспроизводим и позволяет осуществлять исследования 50-60 образцов крови одновременно.

Определение R-белков позволяет судить о том, как будет протекать туберкулезный процесс, и при необходимости с самого начала лечения назначать наиболее эффективные химиопрёпараты, тем самым повышая эффективность терапии и сокращая сроки лечения больных.

Формула изобретения

Способ прогнозирования течения jy- беркулезного процесса путем проведения реакции агглютинации, отличающий- с я тем, что, с целью упрощения способа, в реакции торможения агглютинации определяют R-белки с анти-Р-сывороткой и эритроцитами 0(1) группы и Rh(+) человека и при титре R-белков 1:12800 прогнозируют благоприятное течение, а при титрах 1:25600 и выше - неблагоприятное.