Способ получения норстатин и норциклостатинсодержащих пептидов Советский патент 1992 года по МПК C07K5/06 A61K37/02 

31

Изобретение относится к способу получения норстатин и норциклостатин содержащих пептидов, новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения - способ получения новых производных пептидов мало- токсичных и обладающих более высокой антигипертензивной активностью.

Экспериментальная часть.

Высокоэффективную жидкостную хро- матографию (ВЭЖХ) проводят при следующих условиях: при детектировании мм, в колонке Дироп 4,6x250 мм с Zorbax-C8 при скорости элюирова- ния 1,5 мл/мин. Использованы следующие системы растворителей для ТСХ: система А этилацетат: гексан соответственно в соотношении, которое указано в примерах, на двуокиси кремния система 8 « простой эфир : гексан, соответственно в указанном соотношении на двуокиси кремния система С 18:1 :t 4CCl,:EtOH:HOAc на двуокиси кремния, система D 9:2:2 хлороформ гэтзнол:уксусная кислота.

Пример 1. Сложный метиловый эфир морфолинкарбонил PheHisnor-c- Sta (1,Z-морФолинкарбониламино, М- фенил, Q - Н, RI - имидазол- -илмети W - CH/III/OH, Z -COjCHj, иХ - цикло гексил).

А. Сложный бензилоаый эфир (S)-2- изоцианата 3 Фенилпропионовой кислоты.

18 г хлористоводородной соли бен- зилового эфира 1-фенилаланина в 15 нп толуола перемешивают при нагревании с обратным холодильником в атмосфере фосгена в течение 1,5 ч, охлаждает и концентрируют с выходом твердого вещества, перекристаллизованного из 120 мл гексана, с получением 16,1 г бесцветных игольчатых кристаллов.

Найдено,: С 72,59; Н 5,37;

N ,98.

С |Ј N0 з

Вычислено,: С 72,32; Н 5,35;

. 68-72°C. 80,4° (с - 1,02, )-

ИК(СНС13) - 22,50 1750 см .

В. Сложный бензиловый эфир морфо- линкарбонилфенилалинина.

Продукт примера 1 А растворяют в 5 мл дихлорметана, обрабатывают 930 мкл морфолина и через 30 «ин

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

полученную смесь концентрируют до воскообразного твердого вещества, которое перекристаллизовывэют из горячей смеси гексан:этилацетат Д:1 с получением 1,92 г названного вещества, т.пл. 87-89°С. MS (химическая ионизация, изобутан) 369 (мН , основной пик).

С. Морфолинкарбонилфенилаланин.

Продукт примера 1 В (1,85 г) растворяют в 30 мл абсолютного метанола и 5 мл уксусной кислоты и интенсивно встряхивают 0,5 г 10% Pd/C г. (Pd/C - Pd-чернь) в течение 1 ч в атмосфере водорода при 3,726 кгГсм. Полученную суспензию фильтруют, концентрируют, трижды упаривают совместно с добавлением толуолом-и высушивают с выходом 1,3 г бесцветной печы.

Д. Сложный метиловый эфир Вое Hisnor-c-Sca.

В соответствии с методикой получения и очистки продукта по приготовлению 1 С, за исключением того, что вместо BocPheHis im Вое) используют ди BccHis, из 200 мг продукта из . приготовления 3 Н получают мг смеси, состоящей из названного вещества с Rr 0,38 и соответствующего производного 0 BocHis (im Вое) с R, 0,50 в соотношении 1,5:1 (ТСХ на двуокиси кремния в этилацетате). Указанную смесь используют без разделения в приготовлении 3 Е. Смесь можно разделить препаративной ВЭЖХ в колонке 25«9,8, упакованнойZorbax С-8, с элюированием в системе ацето- нитрил:вода 85:15 при скорости элю-г ирования 6,3 мл/мин с дектированием при 25 нм. Названное вещество элюи- руют при времени удержания ,7б мин, а 0 - ацилированное производное при 6,8 мин. В результате хроматог- рафии получают чистые образцы каждого вещества.

Е. Сложный метиловый эфир BocHis- nor-c-Sta.

Смесь, полученную в примере 1 D (895 г) , растворяют в 2П мл метанола при 25°С и обрабатывают 3 мг безводного карбоната калия. Через 1 ч смесь концентрируют и высушивают с выходом 60 мг желтой пены, которую используют без очистки в следующей реакции. ВЭЖХ в ацетонитрил: 0,1 Н фосфатном буфере, 50:50 рН 2,1 показывает пики элоировзния со временем

Ч

удерживания 3,15 и 1,98 мин Б соотношении 7,8:1. Предположение, ито Пик со временем удержания 1,9 мим относится к Fxicliis OMe, подтвержден анализом ЯМР смеси и последующей конверсией в известное производное, приводимых ниже .

F. Хлоргидрат сложного метилового эфира Hisnor-c-Sta.

Продукт примера 1 Е (595 мг) растворяют в смесь 3, Н хлорид водород диоксан при 25 С и перемешивают 30 мин. Полученную смесь концентрируют и осадок высушивают в вакууме с выходом 555 мг желтого тведого вещества, время удерживания 1,5 мин при ВЭЖХ в ацетонитрил 0,1 М фосфатном буфере, 1,5:95, рН 2. При анализе ЯМР обнаружено названное вешество с примесью дихлор гидрата метилового сложного эфира гистидина.

С,, Сложный метиловый эфир морфо- линкарбонил PheHisnor-c-Sta .

Следуя методике приготовления

1 С, за исключением того, что вместо BocPhePis (ir Бос) используют продукт примера 1 С и 2,2 эквив. триэтиламина вместо 1,1, из 550 мг продукта примера 1 F полумают мг аморфного твердого вещества светло- желтого цвета, которое растворяют в 3 мл метанола и обрабатывает мг безводного карбоната калир при 25 С в течение 2 ч и концентрируют с получением 355 мг светло-желтой пены. Полученную пену растворяют в Ь мл ди хлорметана и интенсивно перемешивают в течение 5 мин с 1 н.соляной кислотой. Образовавшиеся слои разделяют и водный слой экстрагируют 2к 2 мл дихлорметанз. Водный слой обрабатывают достаточным количеством

2 н. NaOH до повышения рН до 10,5 и затем экстрагируют 100 мл ди- хлорметана.

Экстракты из последней порции ди- хлорметэна высушивают (сульфатом натрия) и концентрируют с выходом 225 мг названного вещества в виде грязно-белой пены, TCX:Ri 0,1 в системе Г), ВЭЖХ: время удерживания 2,95 мин в ацетонитрил:Фосфатном буфере 50:50 рН 2,1 (93% от суммарного поглощения с незначительной примесью при времени удерживания 1,9 мин, 5% Ул поглощения),

ЯМР, 3° нГц, ПЧ v , .сти .иге , Д, ч/мин: fl,/-1 ,Ь (м, б,8 Н); 1 ,5 1 ,8 (м, U 64) ; 3, Л8 (и. гл, приблизительно, 8н i ; 3,6 ( ; 3,73 (с., ЗН, OCHji; Ь.ПР и Ь,5 (м. , 1Н) ,: 4,30 (м. , 2Н) ; 5,2 (м . , 1Н); 6,82 и 7,57 (с., 1Н, Са); 6,97 и 8,12 (д. , 1Н, са); 7,1-7,35 (м., Q са , 6н , ароматич.) .

П р и и е р 2. Сложный метиловый эфирморфолинкарбонил PheNlenor-s- Sta (1 г морфолинокарбониламино, М - фенил, Q - Н, RЈ -н-бутил, W - 5 CH/IH/OH, Z - и X - цикло- гексил).

А. Сложный бензиловый нор- лейц|1на.

15,0 г норлеГ-цина (Nle) смешивают с 230 мл бензилового спирта и охлаждают до 0°С. Прибавляют по каплям в течение 15 мин хлористый тионил (25 мл) и реакционную смесь медленно нагревают до 9рСС с бурнмм выделе0

5

0

5

0

5

5 нием S02 , которое происходит примерно при . Через 2 ч смесь при 90°С охлаждают до О С и добавляют еще 25 мл тионилхлорида. втем смесь опять нагревают до 9jJC(- в течение 2 ч, ох6 л простого

лаж.дают , разбавляют эфира и выдерживают в ночи при П°С. Образованнь Ј кристаллы филы руют, промываст и с выходе 3,- г ердого ве1чества, -ч.. г-. рскрис- таг:лизовывг ют из смеси э анол:э ир (23 мл этанола). Отфильтрованное и высушенное твердое вещество весит Г/, 1 г, FJ 0,25 при ТСХ в системе С (хрсматографическую пластину выдерживают в парах аммиака и высушивают до злюированир).

В. Сложный бензиловый эфир МОРФО - линкарОонил PheXle.

Следуя методике получения и очистки продукта приготовления 1 С, из 2,12 г продукта примера 2А и 2,63 г продукта примера 1 С получают 3,30 г названного вещества в виде бесцветной пены, ТСХ: Rr 0,5 в этилацетате на двуокиси кремния, ВЭУХ, время удерживания 3,27 - 25 мин (9/Ј от общего поглощения) в MecN: О, М фосфатном буфере, рН 2,1, 70:30.

С. Морфолинкарбонилфенилаланинно- рейцин.

Продукт примера 2 В (3,3 г) взбалтывают 35 мл метанола и 7 мл уксусной кислоты с 1,U г (10% Pd - черни в те10

71706391

чение 5 мин, фильтруют через целит, концентрируют, несколько раз упаривают вместе с толуолом и эфиром и высушивают с выходом 2,9 г бесцветного твердого вещества, ТСХ: Rr 0,2 в системе С.

D. Сложный метиловый эфир морфолин карбонил PheNlenor-c-Sta.

Придерживаясь методике получения и очистки соединения приготовления 1. С, из 300 мг продукта приготовлеия 3 Н и /00 мл продукта примера 2 С получают 350 мг требуемого продука в виде твердого вещества светло- елтого цвета, ТСХ: R/ 0,33 в этил- цетате на двуокиси кремния, B3JKX: ремя удерживания 6,02 мин в MeCN: ,1 М фосфатном буфере 75:25, рН 2,1.

ЯМР (CDC1,), 300 МГц, частичное, : 0,86 (т., ЗН, J 6-7 Гц, перекрещивающийся I-2H м с центром при 0,9); 1,,36 (м, , примерно 8Н); 1,6 (дд., .Н);:1,46 1,90 (м.,10Н) 3,0 (центр дд., 1Н); 3,05-3,38 (м., 5Н); 3,5 (и..4н); 3,7 (с., ЗН, OCHj); Ь,У. (д., 1Н, ,2 Гц); 14.20 (к. 1Н),: 1,ЗХ-1,50 (м., 2Н); «4,92 (д., 1Н. J 8 Гц); 6,W (д., 1Н, J 9 Гц); 6,5 (д., 1Н, J 10 Гц); 7,12-7,35 (м., 5Н арома- тич.).

г эф

т н

р О в к 5 о эф 15 6 в э

т 2Q г

р л в 25 д ч ч П р в в к с

30

Пример 3. Морфолинкарбонил PheNlenor-c-Sta-N-метиламид (1, Z- морфолинкарбониламино, М - фенил, Q - Н, R - н-бутил, X - циклоге ксил W - CH/III/OH, Z - CONHCH,).

А. Сложный метиловый эфир 3 (s) азидо 2 (R) трет-бутилдиметилсилок- си- -циклогексилмасляной кислоты.

Продукт приготовления 3 С (0,60 г растворяют в 5 мл диметилформамида и обрабатывают при 0°С последовательно k22 мг имидазола и 523 мг трет.-бу- тилдиметилхлорсилана. Через 18 ч при 25°С смесь обрабатывают 211 мг имидазола и 255 мг трет.-бутилдиме- тилхлорсилана, а затем перемешивают при 25°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют, осадок растворяют в этилацетате, экстрагируют водным раствором 1 М хлорида лития, 1 н. НС1, солевым раствором, высушивают, фильтруют, концентрируют (с получением 900 мг прозрачного масла) и хроматографируют на 25 мл двуокиси кремния 1 л смеси эфир: гек сан 1:75 с получением 800 мг чисто8

го продукта. ТСХ: R, 0,55 в смеси эфир:гексан 1:2.

В. Метил 3(5)-азидо-2(К) трет-бу- тилдиметилсилокси- 4-циклогексилмасля ной кислоты.

Продукт примера 3 А (725 мг) растворяют в метаноле и охлаждают до ОС. Полученный раствор насыщают безводным метиламином и перемешивают в колбе, закрытой пробкой в течение 5 ч при П°С. Раствор концентрируют, осадок упаривают вместе с простым эфиром и высушивают с получением 5 мг бесцветного, твердого вещества. ТСХ: К/ 0,18 в системе простой эфир:гексан 1:2.

С. N-Метиламид 3(5)-амино-2 (R) трет-бутилдиметилсилилокси- -цикло- Q гексилмасляной кислоты.

Продукт примера 3 В ( мг) растворяют в смеси из 30 мл метанола и 3 мл уксусной кислоты и взбалтывают с 200 мг 10% Pd-черни .при 5 давлении водорода 3,515 кг/см2 в течение 1 ч при 25°С. Смесь фильтруют через целит, фильтрат концентрируют и осадок растворяют в этилацетате. Полученный раствор промывают водным раствором бикарбоната натрия, высушивают, фильтруют и концентрируют с выходом 550 мг бесцветного масла, которое используют без очистки на следующей стадии синтеза.

D. (0-трет-бутилдиметилсилиловый простой эфир) N-диметиламидморфолин- карбонил PheNlenor-c-Sta.

Используя общую методику получения и очистки продукта приготовления 1 С, за исключением того, что не включают триэтиламин, из неочищенного продукта примера 3 С (250 мг) и 358 мг продукта примера 2 С получают 206 мг названного соединения в виде твердого вещества светло-желтого цвета. ТСХ: R| 0,18 в этилацетате.

0,7 в системе D, ВЭЖХг время удерживания 8,2 мин в MeCN: фосфатном буфере 70:30, рН 2,1.

Е. Сложный метиловый эфир морфо- линкарбонил PheNlenor-c-Sta.

Продукт примера 3 (200 мг) обрабатывают 3 мл смеси 3 Н НС1 диоксан при 25°С в течение 30 мин, концентрируют, упаривают вместе с простым эфиром (трижды) и высушивают с выходом 155 мг твердого вещества блец- но-желтого цвета. ТСХ: RJ 0,8 в

0

5

0

5

0

5

системе, ВЭХХ: время удерживания ,57 мин в яцетонитрил : с осФатном буфере 50:50, рН 2,2.

и ЯМР, 300 МГц, SMSO-d6, частичное,- U : 0,82 (т., ЗН, J - 6 Гц, перекрытие м., ); 1,0-1,32 (м. , поиблиз. ЮН); 1,-1,9 (м); 2,. (д., ЗН, J 6 Гц, 11 СН5); 2,78 и 2,96 (центры м., приблиз. +H); 3,76 (явный д., 1Н, J приблиз. 1 Гц); 1,11 (м., 2Н); 14,28 (м. , 1Н); 6,62, 7,58 и 7,96 (д., 1Н каждый); 7,06-7,3 (м., 5Н).

Пример . N-н-бутиламид мор- фолинкарбонил PheNlenor-c-Sta (1,2-морфолинкарбониламино, М-фенил ,Q - Н, R.J - н-бутил, X - циклогексил W - CH/III/OH, Z - CCNH(CPr)}CH5) .

А. N-н-Бутиламид Х(з)азидс-2 (R) трет-бутилдиметилсилилокси- -цикло- гексилмасляной кислоты.

Продукт примера 3 А (800 мг) растворяют в смеси из 2 мл метанола и 1 мл бутиламина и перемешивают пои нагревании с обратным холодильником в течение И м. Прибавляют (1 мл) бутилаиин и нагревание продолжают 2 ч. Смесь концентрируют и хроматог- рэфируют на 2 г двуокиси кремния, элюируя в системе простой эфир:гек- сан 1:5 с выходом 5 мг бесцветного воскообразного твердого вещества, ТСХ: R{ U, 1 в эфир:гексане 1:5, вместе с 2kV мг выделенного исходного материала.

В. N-н-Бутиламид 3(5)амино-/ (R) трет-бутилд метилсилилокси- -цикло- гексилоксилмасляной кислоты.

Продукт примера b A (5) мг) растворяют в 31 мл метанола в смеси с 3 мл уксусной кислоты и взбалтывают с 27.0 мг Rd-черни в течение 5 м. Смесь фильтруют через целит, фильтра концентрируют, полученный осадок упаривают вместе с прибавленным толуолом, растворяют в этилацетате, промывают 3 порциями водного раствора бикарбоната, высушивают над сульфатом магния и концентрируют с получением ЗбО мг бесцветного масла, которое используют без очистки на следующей стадии синтеза.

С. 0-трет-бутилдиметилсилиловый простой эфир N-н-бутиламид морфолин- карбонил PheNlenor-c-Sta.

По методике получения и очистки продукта приготовления 1 С, кроме того, что не включают триэтиламин,

o

5

0

5

г

0

5

0

0

5

из 355 мг продукта прпмеоа В в смеси с ЗОН мг продукта примера 2 С получают 313 мг соединения в виде бесцветного твердого вещества в системе D, РЗЖХ: 7,5 мин в смеси ацетонит- рил:вода 85:15D. N-н-Бутилэмид мопфолинкарбо- нил.

Продукт примера С (305 мг) растворяют при 7.5 С в смеси 3, н. НС1:диоксана. Через 5 мин смесь концентрируют, осадок трижды упаривают с простым эфирои и высушивают с выходом 239 твердого вещества бежевого цвета, ТСХ: Rr С,6 в системе D, ВЭЖХ: время удерживания 10,2 мин в ацстонитрил:фосФэтном буфере . 50: :50, РН 2,1.

РЯМР, SMSO-d6, 300 МГц, частичное, Д: 0,9 (т., 6Н, в сумме, перекрытие 1 2Н м); 1,0-1,85 (м., приблиз. 2 ОН); 2,76 (центр лг.. , 1Н); 2,9-3,5 (м); 3,7 (явный д., 1Н, J приблиз. 1 Гц); 4,1 (м., 2Н); Ь,27 (м., 1Н); 6,60 (д., 1Н); 7,05- 7,3 (м., 5Н); 7,58 (т., 1Н); 7,98 (д., 1Н).

П р и м е р 5. Сложный изопропило вый эфир морфолинкзрбонил PheNl enor- c-Sta (1,Z - мсрфолинокарПониламино, М - фенил , Q - F , Р. - - н -псоп.1Л , X - цикле -ексил, w -сн/11Г/он v г - сгу::к(снд

А. Хлорп- драт сложного метилового эС Ира L-нореалина.

Безводный хлористый водород бар- ботируют в суспензию, содержащую 2,0 г L-норвалина ( Chemical Dynamics) в 50 ил безводного метанола при 0°С в течение 15 мин. Полученный раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с выходом белого твердого вещества, которое пезекристал- лизовывают из смеси этанол простой эфир для получения требуемого сложного метилового эфира.

В. Сложный метиловый эфир N-(мор- фолинкарбонил)-L-фенилаланин-L-норвалина .

К раствору, состоящему из 0,50 г N-(морфолинкзрбонил)-1-фенилаланина и 0,.6 г L-норэалинозого сложного метилового эфира в 10 мл безводного метиленхлорида, прибавляют 0,22 мл триэтиламина, 0,33 г оксибензотри- азола и 0,38 г 1 -(3-диметилзмино- )-3 этилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, после иего разбавляют 50 мл этилацетата и промывают ( мл) 0,1 н.раствором соляной кислоты и ( мл) 0,1 н. NaOH. Органические слои высушивают сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме для получения 0,62 г сырого дипептида.

С. N-(Морфолинкарбонил)-L-фенил- аланин-Ь-норвалин.

К раствору, содержащему 0,62 г сложного метилового эфира N-(мор- фолинкарбонил)-L-фенилаланин-Ь-нор- валина в 0 мл метанола и 20 мл воды, прибавляют 1,2 г карбоната калия Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 60 ч, после чего концентрируют в вакууме до образования водного раствора, а затем промывают ( мл) простым эфиром. Водную фазу подкисляют 1 0 мл н.раствором соляной кислоты и экстрагируют ( мл) хлористым метиленом. Объединенные экстракты высушивают над сульфатом магния, фильтруют с выходом 0,6 г неочищенной кислоты.

D. Сложный изопропиловый эфир Морфолинкарбонил PheNvanor-c-Sta.

К раствору, содержащему 0,13 г N-(морфолинкарбонил)фенилаланин-L- норвалина и 0,10 г сложного 2 пропи- лового эфира 2(К)окси ЗСЗЭамино- - циклогексилбутеновой кислоты (пример 6 А) в 5 ил безводного хлористого метилена, прибавляют 0,С55 мл триэтиламина, 0,60 г оксибензотриазо ла и 0,75 г 1(диметиламинопропил)- З этилкарбодиимида

Реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего разбавляют 0 мл этилацетата и промывают (2x25 мл) 0,1 н.раствором соляной кислоты, а затем .Н5 мл 0,1 н.раствора NaOH Органическую фазу высушивают сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме. Осадок хроматографи- руют на двуокиси кремния (29:1, :Et.OH) для получения 0,17 г чистого пептида (77%).

ЯМР (300 МГц, О)С1Э): Л,86 (м., ЗН); 1,27 (д., J 8 Гц, 6Н); 1, 09 (м. , 1Н); Ц, /5 (м., 1Н) ; k,k6 (м., 1Н); .51 (м., 1Н); 7,25 (м., 5Н).

П р и м е р 6. Сложный изопропиловый эфир мосх-золинкарбонил Fhe-Sметил-Cysnor-c-Sta(1 ,Z - морфолинкар- бонилэмино, М - фенил, Q - К, R - СгЦ5СН2, X - циклогексил, W - (СН/Ш/ОН-и 7.1 - СОгСН(СН5)2) .

А. Хлоргидрат 2-пропанолэфира-2 (R)oKCn-3(S )амино- 4-циклогексилбу- теновой кислоты.

охлажденный льдом раствор, содержащий 1 ,П гN-трет-бутоксикарбонил- )(5)эмино- -циклогексилбу- теновой кислоты в 50 мл Х-пропанола, барботируют безводный хлористый водород в течение 2U мин. Раствор согревэют до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Затем раствор концентрируют в вакууме и высушивают при высоком давлении с выходом 0,93 г требуемого хлоргидрата

аминоэфира.

В. Хлоргидрат сложного метилового эфира 5-метил-Т цистеина.

Суспензию,-охлажденную льдом, содержащую 2,5 г S-метилцистеина (фир5 ма Chemical Dynamics) в 25 мл безводного метанола, насыщают безводным хлористым водородом, пока не растворятся, все компоненты. Раствор нагревают до комнатной температуры и пере0 мешивают в течение 20 ч. Затем раствор концентрируют в вакууме с получением нелтого твердого вещества, которое перекристаллизовывают из смеси эфир:этанол с выходом 3,0 г (87Ј) хлоргидрата аминметилового сложного эфира.

С. Сложный метиловый эфир М-(мор- фолинкэрбонил)-Ь-фенилаланин-5-метил- L-цистеина.

0 К раствору, содержащему 0,96 г - N- (морфолинкарбонил)-L-фенилаланина- 3 и 0,55 г сложного метилового эфира З-метил-Ь-цистеина в 50 мл безводного митиленхлорида, прибавляют

с при комнатной температуре 50 мл триэтиламина, 0,51 г 1-оксибензотриазо- ла и 0,70 г хлоргидрата 1 -(3 диметил- аминопропил)-3 этилкарбодиимида. После перемешивания в течение ч раствор разбавляют 100 мл этилацетата и промывают / ЗЗ мл 0,1 н. НС1 и 2 35 мл 0,1 н. NaOH. Органическую фазу высушивают над сульфатом магния, фильтруют.и концентрируют в вакууме с получением 1,15 г требуемого дипеп0

5

тида в виде твердого вещества.

П. N-(Морфолинкарбонил)-L-Фенил- аланин-3-метил-1,-цистеин.

К охлажденному льдом раствору, содержащему 1,15 г сложного метилового эфира N-(морфолинкарбонил)-L- фенил Эланин-5-метил-Ь-цистеина в 30 мл воды и 61 мл метанола, прибавляют 3,5 г карбоната калия. Полученную смесь перемешивают при ОвС в течение 15 мин и при комнатной температуре в течение ч. Раствор концентрируют в вакууме ло образования водного раствора, который подкисляют концентрированной НС1 и экстрагируют мл метиленхлоридом. Соединенные экстракты высушивают над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме с выходом 1,0 г (89%) неочищенной кислоты.

Е. Сложный изопропиловый эфир морФслинкарбонил Phe-S-метнп Cysnor- c-Sta.

К раствору, содержащему 0,3 г N- (морфолинкарбонил}-L-фенилаланин- 5-метил-Ь-цистеина 5 и 0,3 г 2(про- панолэфира 2(Р)окси 3 (З)амино- -цик- логексилбутеновой кислоты в 2П мл безводного хлористого метилена, прибавляют il, 1 7 мл триэтиламина, 0,18 г оксибензотриазола и П,23 г 1-( метиламинопропил)-3-этилкарбодиими- да. Раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 16 ч, после чего разбавляют 50 мл этилацетата и промывают 25 мл 0,1 н. НС1 и 25 мл 0,1 н. NaOH. Органическую фазу высушивают над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме. Осадок хрометографиру- ют на силикагеле (29:1, СН2С12 : : EtOH) с выходом 0,2 г чистого пептида (Ь2) .

ЯМР (300 МГц, ODC12): 1,30 (дд., 6Н); 2,13 (с., ЗН); М9 (м., ЗН); 5,07 (м., 1Н); 7,75 (м., 5Н).

П р и м е р 7. Моофолинкарбонил PheNlenor-c-Staэтилкетон (1,Z - морфо .линкарбониламино, М - фенил, О - К, R - н-бутил, X - циклогексил, W - CH/III/OH и Z - СОСН,СК3).

А. 5(5)-Восамино 4(R) бензилокси- 6-циклогексил 3(R,S)гексанол.

Продукт примера 5. А растворяют в 5 мл простого эфира и обрабатывают при 0°С 1,5 мл 2,8 М этилмагнийбро- мида в эфире. Через 20 млн прибавляют еще 650 мкл 2,8 М этилмагнийброми да, а через 30 иин раствор обрабатывают 1 мл насыщенным водным раствором хлористого аммония. Смесь разбав0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

гяст простим эфиром, экстрагируют 1 н. НС1 , бикарбонатом, солерым раствором, высушивают над сульфатом магния и концентрируют с получением 530 мг вязкого масла, ТСХ: Rr 0, и 0,25 (система А, 1:3).

В. 5 (s)-Весамино- -(R)-бензилокси- 6-циклогексил-Зтексанон.

Продукт примера / А (525 мг) растворяют в 5 мл эфира и обрабатывают 1,0 мл раствора хромистой кислоты.

Через 1 ч прибавляют простой эфир и раствор промывают 1 н. NaOH, солевым раствором, высушивают над сульфатом натрия, концентрируют, полученный осадок очищают на колонке с двуокисью кремния, элюируя в смеси простой эфир:гексан 1:7 с выходом 250 мг бесцветного масла. ТСХ: Rr 0,6 в системе А, 1:3.

С. Хлоргидрат 5(5)-амино- -(R)- бензилокси-6-циклогексанона.

Продукт примера 7 В ( мг) растворяют в 3 мл смеси k н. НС1:диоксан, перемешивают 5 мин при 25°С, концентрируют, полученный осадок упаривают вместе с добавленным эфиром с выходом 19 мг пены бледно-желтого цвета, ТСХ: R 0,58 в системе С(хроматог- рдфичес-.ую пластину выдерживают в парах j до элюирования на пластину).

Г. Простои бензиловый эСир мооС О- гин-карбонил PheMenor-c-S{.а-этилке- тэна .

В соответствии с методикой получения и очистки продукта приготовления 1 С, из 95 мг продукта примера 7 С и мг продукта примера 2 С получают 133 мг названного вещества в виде бесцветной пены.

Е. Морфолинкарбонил PheNlenor-rc- Sta-этилкетон.

Продукт примера 7 D (120 мг) растворяют в 3 мл смеси метанол:.уксус- ная кислота 2:1, взбалтывает с 75 мг раствора Pd-мерни в атмосфере водорода при давлении 3,515 кг/см2 в течение 20 ч при 25 С. Полученную смесь фильтруют через целит, фильтруют, концентрируют, упаривают вместе с прибавленными толуолом (5х.) , простым эфиром (5х) и высушивают с выходом 100 мг твердого вещества светло-бежевого цвета.

ВЭЖХ: время удерживания 2,96 мин, аацетонитрилфосфатном буфере, рН 2,1 ТСХ: Rf 0,3 (этилацетат, двуокись кремния) .

iw

ЯМР, CDClj, З Ю МГц, мастичное,

1. ч.млн: 1,8R и 1,05 (т., ЗН каждый)

2.М и ,78 (дк., 1Н, каждый); 3,Ю (м., 2Н); 3,17 и 3, (м., , каждый),: 4,13; ,1б и 3,98 (м., 1Н, каждый); ,52 (м., ХН); 5,17 и 5,14В (д., 1Н, каждый); 7,1-7,35 (м., ароматическ.).

П р и м е р 8. Морфолинкарбонил РпеН1бпог-с-5са-М-метиламин(1,Z - мор- фолинокарбониламино, М - фенил, Q-H, R2 - имидазол- -илметил, X - циклогек- сил, W - CH/III/OH, и Z1 CONHCH3T

А. Сложный бензиловый эфир диВос- гистидина.

ДиВос-1-гистидин (0,317 моль) растворяют в 800 мл сухого диметил- формамида и 3,9 безводного карбоната калия прибавляют к указанному раствору. Реакционную смесь перемешивают в ледяной бане и прибавляют 37,8 мл бромистого бензила. Смесь перемешивают при О С и нагревают до 25 С в течение номи, затем фильтруют через целит (промывают простым эфиром), фильтрат концентрируют, осадок растворяют в 700 мл этилацетата, после чего раствор промывают мл 1 М хлорида лития и M хлорида лития, мл 1 н. NaOH, водой, солевым раствором, высушивает над сульфатом магния и концентрируют с выходом маслянистого твердого вещества. Указанное вещество интенсивно перемешивают в 500 мл гексана, после чего получают кристаллическую массу, которую измельчают в мельнице и промывают 2x100 мл гексана при 25°С на фильтре. В сухом состоянии полученное вещество весит 120,5 г т.пл. 99-99,5°С, ТСХ: УЦ 0,35 в системе

А 6 1:1 , Ми М (с-1,09, СНС13).

В. Дигидрохлорид сложного бензи- лового эфира гистидина.

Продукт примера 8 А (92 мг) растворяют в 00 мл смеси из охлажденной 4 н. НС1:диоксан, образующуюся суспензию перемешивают 2k ч при 25°С. Большую масть жидкости декантируют, а остаток концентрируют, просушивают, промывают 3 порциями простого эфира и высушивают с получением названного продукта в виде бесцветного твердого вещества в количественном выходе. повысилась до +6, (с-2,865, МеОН).

С. Сложный бензиловый эфир морфо- линкарбонилфенилаланингистидина.

-

.

,

70 39116

В соответствии с методикой синтеза и очистки продукта приготовления 1 С,

10

из 1,37 г продукта примера 1 С и 1,21 г продукта примера 8 В получают 1,8 г желтой пены (сырой). Полученную пену тритурируот простым эфиром и высушивают с выходом 1,68 г пены светло-зеленого цвета (ВЭЖХ: время удерживания 2,92 мин и ацето- нитрил:фосфатном буфере, рН 2,1, 5):5П, которую используют без дополнительной очистки.

D. Сложный бензиловый эфир иор- 5 фолинкарбонил PheHis (im Вое).

Продукт примера 8 С (1,68 г) растворяют в 30 мл диоксана и 15 ил воды, и рН доводят до 11 водным раствором 1 н. NaOH. Затем прибавляют ди-трет- 20 бутилдикарбонат (850 мл) и рН поддерживают в интервале при прибавлении гидроокиси натрия. Через 5 мин прибавляют мкл ди-трет-бутилди- карбоната (рН удерживают в пределах 5 10,5) и через 1 ,5 ч в сумме рН доводят до 5 1 н. НС1. Затем раствор частично концентрируют и далее экстрагируют J+MOO мл этилацетата. Полученные экстракты промывают водной гид- 30 роокисью натрия, бикарбонатом, высушивают над сульфатом магния и концентрируют с выходом 1,85 г маслянистой пены, которую очищают на двуокиси кремния, элюируя в градиенте этанола 35 в дихлорметане (2 до 8% EtOH), с получением 1,05 г бледно-желтой пены, ВЭЖХ: 3,10 мин ацетонитрил:фосфатном буфере 70:30, ТСХ: RJ 0,13 (этилаце- тат, двуокись кремния), до Е. Морфолинкарбонилфенилаланинсис- тидин.

Продукт примера 8 (500 мг) растворяют в 25 мл метанола и 2 мл уксусной кислоты и взбалтывают с 250 мх 45 10 Pd-черни в атмосфере водорода при давлении 3,515 кг/см2 в течение г мин при 25°С. Смесь фильтруют через целит, фильтрат концентрируют, упаривают вместе с прибавленными (Зх) толуолом, (k) толуола) и высушивают с получением 23 Мг бесцветного твердого вещества, ТСХ R 0,3 в системе С.

F. Простой трет-бутилдиметилсили- ловый эфир морфолинкарбонил PheHis (ira Boc)-c-Sta N-метиламида.

В соответствии с методикой получения и очистки продукта приготовления 1 С, из мг продукта примера 3 С

50

55

и 28S мг продукта примера 8 Е полумают 223 мг бесцветной пены, ВЗЖХ: время удерживания 9,95 мин в ацетонит- рил:фосфатном буфере, рН 2,1, 70:30.

С. ТВ DMS-эфир морфолинкарСонил PheHisnor-c-Sta, N-метиламида .

Продукт примера 8 F (218 мг) растворяют в 3 мл метанола при и обрабатывают 10 мг безводного карбоната калия. Через 1 ч смесь концентрируют с получением 193 мг бесцветного твердого вещества, ТСХ: RJ 0,06 в системе С.

Н. Хлоргидрат морфолинкарбонил PheHisnor-c-Sta N-метиламида.

Продукт примера 8 G (185 мг) растворяют в 3 ил смеси k н. НС1 диоксан, перемешивают в темение 1 ч при 25°С, концентрируют и упаривают вместе с прибавленным простым эфиром с выходом 15 мг бесцветного твердого вещества, НЭЖХ: 1 ,83 мин в ацето- нитрил:фэсфатном буфере, рН 2 , 1, ТСХ: Rr 0,25 в системе (разделяемое вещество выдерживают в тарах NH j до элюирования).

НЯМР, DMSO, т 250 МГц, мастичное Д, ч/млн: 2,5В (д., ЗН); 3,94 ,12; 427 и 45Ь (м., 1Н, каждый); 6,87; 7,60; /,82 и 8,33 (п., 1h, каждый); W3-7,3 (м. , ерсматическ.); 7, и , 02 (с . , 1 Н , каждый ) .

Пример. м.орС Олинкарбонил 0-НеТугNifti: . г -г а-зтилкетон 11,Z - ьорОолинокарОоннлймино, М-метоксифе- нил, 0-Н, Р.-н-бутил, X - циклогек сил, W - СН/HI/ОН, Z - СОСН.СН,,).

Аг Вензиловый эфир морфолинокарбо нил-0-MeTyrFleHop-c-Sr а-этилкетона.

По методике получения и омистки продукта приготовления 1 С 150 мг морфолинокарбонил О-MeTyrNle и 57 мг продукта примера 7 П дают мг бесцветной пены, ТСХ: Яд. ,38 (этилаце- тат, двуокись кремния).

В. Морфолинокарбонил-0-MeTyrNle- нор-c-Sta этилкетон.

Продукт примера 9 А (128 мг) растворяют в 3 мл метанола и 1 мл уксусной кислоты и встряхивают с 130 мг 10% Pd/C при давлении водорода 50 фунтов на кв.дюйм ( атм) в течение 18 ч при /5°С. Смесь фильт- .руют через броунмиллерит, концентрируют и остаток выпаривают с добавленными толуолом (5) и эфиром (5), получая после высушивания светло-желтое твердое вещество, ТСХ: RЈ 0,25

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

(эти.-,г5Ц( : т ;чт ддуоиись кремния), 3, мин в смеси 7 :3П ацетонитрил: Фосфат , рН 2, .

)НЯМР, СПС1з, ЗОН мГЦ) частичный, и, мл: П,91 и 1,11 (т., ЗН кажд.); 44 и 2,79 (д.кв. , 1Н кажд.) ; 3, (м., .Н); 3,29 и 3,6 (м., ЬН кажд.); 3.BU (с., ЗН); 413; Мб; 4,25,и 435 (м. , 1Н кажд.); «4,95; 6,28 и 6,в (д., 1Н кажд.); 6,8 и 7,12 (д.,. 2Н кажд.).

П р и м е р 10. Морфслинокарбо- нил FheNlenor-c-Sta-метилкетон (l,Z- морфолинокарбониламино, М - фенил, Q - Н, R - н-бутил, X - циклогексил, W - CK/I1I/OH, Z1 - СОСН5) . i

А. 4(5)Восамино 3(R) бензилокси- 5-циклогексил-2-пентанон,

3(S) т-Бутоксикарбониламино-2-(R)- бензилокси- -циклогексилбутиральде- гид (315 мг) растворяют в мл эфира при I) С и обрабатывают 530 мкл 1 ,9 М метилмагнийбромида в н-бутиловом эфире. Через 20 мин добавляют еще 530мкл реагента Гриньяра и через 1C мин реакцию гасят насыщенным водным раствором хлористого аммонии и экстрагируют эфиром.

Эфирные слои промывают 1 н. НС1, водиь м бикэ онэтом натрия, соляным раствором, сушат над cyrь.том и концентрируют, получая мг желтого масла. Этот млтериаг растворяют в 5 мл эфира и обрабатывают 1 мл раст вора хромовой кислоты. Через 3 мин смесь разбавляют и промывают 1 н. гидроокисью натрия (3 мл), сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 250 мг светло-желтого масла, которое очищают на двуокиси кремния (эФир:гексан), получая 125 мг бесцветного масла, ТСХ Rjf 0, (1:4 система Б) .

В. (5)-/ мино-3 (R)-б нзилокси-5- ц ик логе к с ил 2 -пс-нтансна гидрохлорид.

Продукт примера ТОЛ (120 мг) растворяют в 3 мл смеси ч н; FC1:диоксан и перемешивают при 25 С в течение 1,2 ч. Смесь концентрируют и остаток выпаривают 3 раза с добавляемым эфиром и высушивают, получая 100 мг бесцветной пены, ТСХ Rr 0,22 (система С, пластинка с пятнами экспонируется аммиаком до элюирования) .

С. Бензиловый морфолинсжар- брнил PheN lcnor-c-Stл-метилкетона.

По методике получения и очистки продукта приготовления 1 С 95 мг продукта примера 10 В и 150 мг продукта примера 2 С дают светло-желтую пену, ТСХ Rt ;),30 (этилацетат, двуокись кремния ).

D. Мопфолинокарбонил PheNlenor-c- Sta -яетилкетон.

Продукт примера 1(1 С (iBO мг) растворяют в 3 мл метанола и 1 ил ук сусной кислоты и встряхивают с 102; Pd/C(l8CMr) при 25°С и давлении водорода 50 фунтов на кв.дюйм (1 А6 атм) в течение ч. Смесь фильтруют, концентри- руют, выпаривают с добавленным толуолом и высушивают,получая 160 мг бесцветной пены, которую хромэтографируют на двуокиси кремния (градиент этанола дихяорметанэ), получая 55 мг бесцветного твердого вещества, ВЭХХ: 3,37 мин в смеси 70:30 ацетонитрил: :фосфат, рН 2,1.

1НЯМР, CDC1 ъ, МГц, частичный, Д ид: 0,86 (т.,.ЗН); 2,1б: (с., ЗНТ; 3,5 и 3,09 (дд., 1Н кажд.); 3,21 и 3,59 (м., 4Н кажд.); 3,89; 4,08; А,15; М7 и ,55 (м., 1Н кажд.); 4,92; 6,11 и 6,8 (д., 1НЛ кажд.); 7,13-7,35 (м., ароматичес- кий) .

П р и м е р 11. Морфслинокарбонил Рл.е-0-ЕсБегпог-с-51а- ;-метиламид (1 ,Z - мор олинокэрбонилэмино, М - фе нил,р-Г,К4- С НуОСКг, X - циклогек- сил, W - CH/III/OH, Z - ССНСНз). A. TBSMS эфир морфолинкарбонил Phe-O-EtSernor-c-Sta-MeTnnaMHfla.

По методике получения и очистки продукта приготовления 1 С 70 мг продукта примера 3 С и 75 мг формо- линкарбонил Phe-0-Et-Ser дают 50 -г бесцветного твердого вещества.

В. Морфолинкарбонил Phe-O-Et Ser- nor-c-Sta-N-метиламид.

Продукт примера 11 А (8 мг) растворяют в 2 мл смеси k н. НС1:дио сан и перемешивают 1 ч при 25 С. Смесь концентрируют и остаток выпаривают с эфиром и высушивают, получая АО мг бесцветного твердого вещества, ВЭЖХ: 3,6 мин в смеси ацето- нитрил:фосфат, рН 2,1, ТСХ RЈ 0,28 в системе С.

, DMCOdg, 300 мГц, частичный, 4 мд: 1,12 (т., ЗН); 2,57 (д., ЗН); 2,81 и 3,03 (дд., 1Н, кажд.); 3,20 (м., АН); 3,5 (м.); 3,78 и 4,13 (м., 1Н качд.) ; А,35 (м., 2Н);

0 ,

5 0

5

0

5

Q

5, 6,68; 7,5 и 8,08 (д., 1Н кажд.); /,12-7,35 (м., ароматический).

Приме р 12. Морфолинокарбонил PheN lenor-c-Sta-L-пропилкетон (1 ,Z- морфолинокарбониламино, М - фенил, Q - Н, н-бутил, X - циклогексил,

w - CH/III/OH, г -соосн(снз)г).

А. 5(5)Восамино (К)бенэилокси- 6-циклогексил-2-метил-Зтексанон.

3(S) т-Бутилоксикарбониламино-2- (R)-бензилокси- -циклогексилбутираль- дегид (k00 мг) растворяют в 3 мл эфира при и обрабатывают 1,17 мл изопропилмагнийбромида (2,0 М) в ди- этиловом эфире. Через 20 мин добавляют еще 0,6 мл реагента Гриньяра, затем через 5 мин 1 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, соляной раствор, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 350 мг прозрачного масла. Этот материал растворяют в 2 мл эфира и обрабатывают 2 мл раствора хромовой кислоты, через 3 мин смесь экстрагируют эфиром, который промывают водной гидроокисью натрия, соляным раствором, высушивают и концентрируют, получая 25Q г желтого масла, которое очищают на двуокиси кремния (эфир:гексан), получая 125 мг светло-желтого масла, ТСХР R| П,33 О:, система А).

В. 5(5)Амино Мк)бенэилокси-6- циклогексил-2-метил-3 гексанонгидрохлорид.

Продукт примера 12 А (120 кг) растворяют в 2 мл смеси k н. НС1:ди- оксан и перемешивают 1,2 ч при 25°С, концентрируют и остаток выпаривают с эфиром, получая 95 мг бесцветного твердого вещества, ТСХ R 0,4 в системе С (пластинки с пятнами экспонируют аммонием до элюирования).

С. Бензиловый эфир морфолинокарбо- нил PheNlenor-c-Sta изопролилкетона.

По методике получения и очистки продукта приготовления 1 С 95 мг продукта примера 12 В 136 мг продукта примера 2 С дают 1бО мг бесцветной пены, ВЭЖХ: 3,56 мин в смеси 95:15 ацетонитрил:вода.

D. Морфолинокарбонил PheNlenor-c- Sta-i-пропилкетон.

Продукт примера 12 С (155 мг) растворяют в 3 мг метанола и 3 мл уксусной кислоты и встряхивают с 155 мг 10% Pd/C в течение 18 ч при 25°С, фильтруют через броунмиллерит, концентрируют, остаток выпаривают с толуолом иг

эфиром и высуживают, получая 10П мг сеетло-желтого твердого веществ, ТСХ RI 0,1) (этилацетат :двуокись

Кремния ) .

МЯКР, CDC1}, 250мГц, частичный,

мд: 0,87 (т., ЗН);1,08 и 1,13 (д.,

ЗН кажд.); 3,09 (м., 3,62 (м.,

Н),: ,15 (м., 1Н); ,32 (с., 1Н); ,99; 6,38 и 6,51 (д., 1Н кажд.); 7,,3/ (м., ароматический).

П р и м е р 13- Моофолинокарбонил PheNlenor-c-Sta-i-бутилкетон (l, Z- морфолинокарбонилдиамино, М - фенил, Q - Н, Rj н-бутил, X - циклогексил, W-CH/III/OH, Z1 - COCH2CH(CH})2).

А. 6(5)Восамино-5-(R)-бензилокси- /-циклоге ксил-2-метил- -гексанон.

3 (S) т-Бутоксикэрбониламино-2-(Я)- бензилокси- -циклогексилбутиральде- гид (1,ОП г) растворяют в 10 мл эфира при О С и обрабатывают 1,6 мл 2,0 М эфирного раствора изобутилмаг- ний хлорида. Через 3 мин добавляют еще 3 ил реагента Гриньяра и раст- вор нагоевзют до 25°С. Через 1 ч реакцию гасят водным раствором хлористого аммония i- экстрагируют эфиром. Эфир промывают соляньм раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют, получая 1,02 г проз- млела. Этот материал раство- Б 2П мл и обг-эбатывест

мл растЕора ромовой, кислоты. После перемеи..ия при С С в течение 1 ч и при 25°С в течение ЗС мин смесь разбавляют эфиром и промывают 1 н. гидроокисью натрия, соляным раствором, сушзт над сульфатом магния, концентрирую и ;ырой продукт очищают на двуокиси кремния (эфир: :гексан), получая мг бесцветного масла, ТСХ К| Г,,33 в 1:3 системе В.

В. 6 S) Амино-5-(PJ -5ензилокси-7- циклогексил-2-метил-г1-гьксанонгидро- хлорид.

Продукт примера 13 А (30 мг) растворяют в 3 мл смеси k и. НС1:диок сан и перемешивают 1,2 ч при 25°С, концентрируют, трижды выпаривают с эфиром и высушивают, получая 325мг бесцветного твердого вещества, ТСХ RЈ 0,29 в системе С (пластинки с пятнами экспонируют аммиаком до элюирования).

С. Бензиловый эфир морфолинокарбо- нил PheNlenor-c-Sta-i-бутилкетона.

По методике получения и очистки продукта приготовления 1 С 150 мг

с;

5

0 5 0

Q

5

Q

5

продукта примерм 13 В и i мг Л г1 глуктл примера 2 С дают 280 мг бесЦй Г- ТИП. ПСНЫ .

КОРФОЛИНОКЭ рбонил I lioN I e nou-c-S ta - i-бутипкетон.

Послукт примера 13 С ( мг) растворяют в 10 мл смеси 1:1 метанол :уксусная кислота и встряхивает с 3(Ш мг j% Pd/C в течение 18 ч при 25 ;° С и давлении водорода 50 фунтов на кв.дюйм ( атм). Смесь фильтруют через броунмиллерит, фильтрат концентрируют и выпаривают с добавленным толуолом и остаток хро- матографируют на двуокиси кремния (градиент этанола дихлорметана), получая 180 мг бесцветного твердого вещества, ВЭЖХ; ,0 мин в смеси 70:30 ацетонитрил:фосфат, рН 2,1, ТСХ RI 0,31 (этилацетат:двуокись кремния).

ЯМР, СРС }, 300 мГц, частичный, & мд: 0,814 (т. , ЗН); 0, 90 и 0,92 (д., ЗН кзжд.); 2,10 (септет, 1Н); 2,38 и 2,53 (лд., 1Н калд.); 3,0 (и., 2Н); 3,26 и 3,58 (м., Н кажд.); Мб (с., 1Н); А,7.2; k ,$. и Ь,6Э (и., 1Н .); 5-26; 6,57 и 7,00 (д., 1Н кажд.); 7,1-7,3 (м., ароматический) .

Пример. Морфолинокарбонил s nor-c-S t тилкетон (l ,Z - морфсли1--окарбоьилзминп, м - фенил. О - Н, RJ. - СН,5СНг, X циклогексил, W - CK/III/OH, Z - СОСН2СН(СК,)г) .

А. Бензиловый эфир норфолинокар- бонил Phe-S-Mt-Cysnor-c-Sta-i-6yTnn- кетона.

По метолике получения и очистки продукта приготовления I С 120 мг продукта npnv.pa 13 В и 129 мг Мог- Phe-S-MeCys дают мг бесцветного порошка,, ТСХ R| 0,58 в системе С.

В. МОРФОЛИНОКЭС--ОНИЛ Phc-S-Me- Cysnor-c-Sca-i-бутилкетон.

Продукт примера 1 А (95 кг) растворяют в 1,0 мл муравьиной кислоты и добавляют 100 мг палладиевой черни (ALFACo). После перемешивания в течение ночи смесь фильтруют через бромунмиллерит, концентрируют и остаток выпаривают с толуолом и высушивают, получая 97 мг рыжевато-коричневого масла, которое очищают на двуокиси кремния (градиент этанола дихлорметана), получая 23,5 мг бесцветного порошка, ТСХ R. С,65 в сиеj317

T(M С, РЭКХ: 3,65 мин в смеси 70:30 а«г. тонит ри л: фосфат , рН 7. , 1 .

ЧЯМР, (1Н:1, 3fl n Гц, частичный, , мл: ;i,9: и 0,92 (д., ЗН какд. 2,10 (с., ЗН); септет, 1Н); 2,38; 2,56; ;:,5; .,92; З.пп и 3,1 (АД., 1Н кажд.); 3 ,1 -3 , 37 (м) ; 3 ,60 (м . ,) 3,97; ,05 и ,65 (м., 1Н кажд.);

1,М-Ч56 (и., 2Н); 6,76 и 6,86

(д., 1Н кажд.); 7,,36 (м., арома тииеский) .

П о и м е р 15. Вое Phe-S-MeCys- nor-c-Sta-i-пропиловый эфир (1,Z- т(СНь)3СОСОШ, М - Фенил, Q-H,Rt - , X - циклогексил, W - CH/I1I/O Z - COtCH(CH3)2) .

А. Вое Phe-S-MeCys.

Метилциетеин (6,26 г) растворяют в 65 мл насыщенного водного рзст- вора бикарбоната натрия при 25 С и добавляют 35 ил ТГФ. Этот раствор обрабатывают за один прием 12,0 г оксисукцинимидным эфиром N-T-BOC-L- фенилаланина. Через 30 мин раствор переносят в делительную воронку и дважды промывают амилацетатом. Добавляют свежую порцию этилацетата и рН доводят до 1,1 с помощью 6 Н.НС1. Отделяют органический слой и водный слой экстрагируют этилацетатом (). Комбинированные органические слои г дважды прерывают 1 н. ИС1, соляным раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 12,0 г бесцветной пены.

В. Бос Phe-S-Me-Cysnor-c-Sta-i- ггропиловын зфир.

Нор С Sta иэопропиловый эфир (1,0 г) растворяют в 20 мл дихлорме- тана и обрабатывают последовательно 1,57 г (1,0 эквив.) продукта примера 15 А, мг (1,5 эквив.) гидрата оксибензтриазола и 788 мг (1,0 эквив.) 1 -(3-диметиламинопропил)3 этилкарбодиимид гидрохлорида (ПЕС). Реакционную смесь перемешивают на ледяной бане, которую в течение номи оставляют нагреваться до 1В С. Смесь концентрируют, остаток растворяют в этилацетате и образующийся раствор дважды промывают 1 н. НС1, дважды 1 н. NaOH, один раз соляным раствором, сушат над сульфатом магния и коцентрируют, получая бесцветное твер- дое вещество, которое очищают на двуокиси кремния (этилацетат гексаны), получая 1 ,85 целевого продукта в ви

5

5 д

5

(Э 5

де бесцветного порошка, ТСХ R, (1(6П в системе С.

дЯМР, CDC1,, ЗИП мГц, частичный, Д , ид: 0,9 (м }; 1,29 и 1.3R (д., ЗН кажд.); 1,39 (с., 9Н); 2,13 (с., ЗН); 2, 2,98; 3,03 и 3,15 (дд., 1Н, кажд.); ,09 U, 1Н); .ЗО- ,50 (м., ЗН); ,9° (м., 1Н); 5,07 (септет, 1Н); 6,66(м., 1Н); 6,86 (д., 1Н); 7,16-7,36 (м., ароматический) .

Пример 16. -т-Воспиперази- нокарбонил Phe-S-MeCysnor-c-Sta-i пропиловый эфир (1,Z - -т-воспипера- зинокарбониламино, М -фенил, Q - Н, R - , X - циклогексил, W - СН/Ш/СН; Z - (СНз)2).

А. -т-Воспипеоазинокарбони-л Phe- S-MeCys метиловый эфир.

По методике получения продукта примера 15 В мг метилового эфира S-метил-цистеина и 500 мг вос-пи- перазинкарбонил фенилаланина дают мг бесцветной пены, которую используют без дальнейшей очистки.

В. -т-Воспиперазинокарбонил Phe-S-HeCys.

. Продукт примера 16 А (67 мг) растворяют в 1 мл диоксана и 0,5 мл воды при Г °С и обрабатывают 33 мг гидроокиси лития. Чепез 2,5 ч смееь концентрируют, остаток растворяют в воде и образующийся раствор экстрагируют эфиром. Этилацетат добавляют к водному слою, который доводят до рН 1 с помощью 1 н. НС1, экстрагируют этилацетатом (Х), экстракты промывают водой и сушат над сульфатом магния, получая М мг бесцветного. твердого вещества.

П р и м е р 17. Пиперазинокарбо- нил Phe-S-MeCysnor-c-Sta-i пропиловый эфир (1,Z - пиперазинокарбонил- змино, М - фенил, Q - Н, ,, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z5 C01CH/CHJ)Tt.

Продукт примера 16 (33 мг) растворяют в 2 мл смеси 4 н. НС1:диок- сан и перемешивают при 25°С в течение 50 мин, концентрируют и остаток выпаривают с эфиром, получая 31 мг белого порошка, ТСХ Rr 0,2 в системе С (пластинки с пятнами экспонируют аммиаком перед элюированием) , ВЭЖХ: 2,98 мин в смеси 50:50 ацето-: нитрил:фосфат, рН 2,1.

НЯМР, DMSO, 250 мГц, частичный, Д , кд: 1,18 и 1,20 (д., ЗН кажд.);

1- ,1- U., ЗН) ; 4,n:i и ,Л (м. , 1Н кажд.); +,14:1 (м., / Н); .Р (септет,

1Н); 5,33; 6.9П; 7,63 и 8,7.2 (л.,

1Н кэжд.); 7,137,33 (и., ароматический) .

П р и м е р 18. Сложный изо ропи- лсвый эфир -гидроксипиперидинокаобо нил-Phe-S-Me-Cysnor-c-Sta-d ,Z - 4- гидроксипиперидинокарбониламино, М - фенил, Q - Н, R2 - CHjSCH, X - цикл гексил, W - CH/III/OH и Z -СО СНССН

Раствор 15 мг продукта прйготовления 3 и мкл триэтиламина в С,8мл дихлорметана прибавляют при О С к раствору 9 мг карбонилдимидазола и 20 мг имидазола в 0,3 мл дихлорметана, полученный раствор перемешивают в течение 1 ч при 0°С, Раствор 25 мг -гидроксипиперидина в 0,3 мл ди- хлорметана прибавляют в смесь, которую затем перемешивают в течение 1 ,5 ч при ;i и 20 С в течение 20 ч, разбавляют этилацетатом и промывают 1 н.раствором НС1 (2 раза), соляным раствором, сушат в присутствии сульфата магния, концентрируют и очищают нз кремнеземе с получением 26,1 мг бесцветной пену, Г.i TCX 0,22 (этил- ацетат, кремнезем), подвергают высо- неэффективной жидкостной хроматогра- Фии (ВЭХХ) в течение 3,1° в смеси ацетонитрил:Фосфат , рн 7,1.

д ЯМР, CDC1,, 250 мГц. иэстичный, Ь. ppi-: 1,27 и 1,.Я (д., ЗН каждой); 2,10 (с., 10, с. ЗН); 2,73 и 3,30 (дд. 1Н, каждый); 3,U8 (м., 3 Н); 3,58 (м., 2Н); 3,8/ (м., 1Mb Ь,Ю (м., 1Н); Ь,5 (м., ЗН); ,82 (д., 1Н); 5,8 септет, 1К); 6,91 и 7, (д., 1Н каждый); 7,19; 7,С (м., ароматический).

П р и м е р 19- Сложный метиловый эОир морфолинокзрбонил PheLeu nor-c-Sta (1,Z - морфолинокйрбонил- амино, М - фенил, Q-Н, R4-CK2CH(CKj)2 X - циклогексил, W -CH/III/OH и Z1- СП1СН(СН3)2).

Л. Хлоргидрат сложного nor-c-Sta- метилового эфира.

Раствор 0,15 г сложного метилового эфира Boc-nor-c-Sta в Ь мл k н. раствора НС1:диоксан перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением 0,15 г твердого тела белого цвета. Материал используют без дальнейшей очистки.

5

g

j Q 5

о

г

0

5

ЯМР мГц, i : ,6f (с. , ЗН); k,7 (м. , И 6.V/ (д. , Л k Гц, 1Н).

В. Сложный метиловый эфир мсчрФо линокарбонил rhel-.cn.

К раствору 0,30 г морфолинокарбо- нил Fne и 0,22 г НС1 LeuOMe в 5 кп безводного раствора прибавляют последовательно OJ2 г триэтанол- амин (ТЭА) , 0,18 г гидроксибензотри- азола (ГБТ) и 0,2 г дициклогексил- карбоимида (ДГЦ).

После перемешивания при комнатной температуре в течение 20 ч раствор фильтруют через целит и промывает дважды 1U мл 0,1 н.раствора гидроокиси натрия. Органическую фазу сушат в присутствии MgS04, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток хрома- тографируют на Si02 (2:1 EtOAc:Hex) с получением 0,3 г чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDC13), Л : 0,89 (д., J 7 Гц, 6Н); 3,71 (с., ЗН); М8 (м., 1Н); 4,57 (м. , 1Н); 6,25 (д., J 7 Гц, 1Н).

С. Морфолинокарбонил FheLeu,

К раствору 0,3 г морфолинокарбо-- нил PheLeu OMe в 10 мл МеОН прибавляют 0,1 г KjC05, затем полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 и. Реакционную смесь концентрируют ь вакууме до объема 10 мл и подкисляют 1 н рзствооом НС1 , после чег зкстра -и- руют три рчза в 25 мл CVLCL, . Объединенные экстракты сушат в присутствии MgSO., Фильтруют и концентрируют с получением неочищенной кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDC1,)A : 0,87 .(2д., 6Н); k,k$ (м., 1Н); ,65 (м., 1Н) ; 5,36 (д., J « 7 Гц, 1Н).

.D. Сложный метиловый эо р моофо- линокарбонил PheLeunor-c-Sta.

Морфолинкарбонил PheLeu (96 мг) конденсируют 80 мг nor-c-Sta :ОМе-НС1 с использованием описанной выше методики ДГК.

Сырой продукт кроматографируют на Si02 (29:1 СН2С12:EtOH) с получением 68 мг чистого продукта.

ЯМР (300 МГц, CDCli,) Д: 0,85 (2д., 6Н); 3,72 (с., ЗН); i,28 (м., 1Н); ,1 (м. , 2Н).

Пример20, Сложный метиловый

эфир иорфолинокарбснил PheKet nor-c- Sta(1,Z -морфолинокарбониламино, МФенил, О -Н , R2 CH3(C1,.U , X - циклогексил, W - ГН/Ш/ОН и /. -

А. Сложный метиловый эфир морфоли- нокарбонил PheMet.

Морфолинокарбонил Phe (0,30 г) соединяют с 0,2Ь г НС1 метионин ОМе, используя методику ДГК в примере 19. Сырой материал хроматогрэфируют на SiOj (2:1, EtOAc:Hex) с получением 0,3° г чистого дипептида.

ЯМР (ЗПО мГц, CDC13) Д: 2,05 (с., ЗН),: 3,72 (с., ЗН); ,57 (м., 2Н).

В. Морфолинокарбонил PheMet.

Сложный метиловый эфир морфолино- карбонил PheMet (0,36 г) омыляют, используя методику примера 19, что позволяет получить 0,3 г сырой кислоты, которую используют без даль- нейшей омистки.

ЯМР (300 мГц, СОС13)Д : 2,01 (с., ЗН); 2,M (м., 1Н); Ц,61 (м., 1Н).

С. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил PheMet-nor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PheMet (0,10 г) соединяют с 0,С80 г nor-c-StaOMe НС1 (пример 19), используя ДГК. Сырой продукт хроматографируют на SiOj (29:1, CHzCl2 :EcOH), получая 5) иг чистого продукта и 32 мл загрязненного продукта.

ЯМР (300 МГц, О)С1Э)Д: 1,98 (с., ЗН); 3,7 (с., ЗН); 438 (м. , 2Н); (м., 1Н).

П р и м е р 21. Сложный метиловый эфир морфолинокарбонил Phe-S-MeCys-. nor-c-Sta (1,Z - морфолинокарбонилами но, М - фенил, Q - Н, R2 - ,, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z - COtCH(CHj)4).

А. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил Phe-S-MeCys.

Морфолинокарбонил Phe (0,96 г) и S-MeСу8ОМе HCi (0,55 г) подвергают взаимодействию с использованием водорастворимого реагента ДЭК вместе с ТЭА и ГЕТ, как в примере 19- Реакционную смесь разбавляют 100 мл ТеОАс, промывают дважды 35 мл 0,1 н. раствора НС1 и дважды 35 мл 0,1 н. раствора NaOH. Органическую фазу сушат в присутствии , фильтруют и концентрирует в вакууме. Сырой продукт (1,15 г) является достаточно чистым.

ЯМР (300 мГц, CDC1,) Л: 2,0 (с., ЗН); 3,72 (с., ЗН); 458 (м., 1Н); 465 (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонил Phe-S-MeCys.

Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил Phe-S-MeCys (1,15 г) омыляют как в примере 19, за исключением того, что реакционную смесь первона«ально перемешивают при 0°С в тече- ие 15 мин, а затеи при комнатной температуре.

Сырой продукт (1,0 г) используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, СБС1,)Д: 2,03 (с., ЗН); 463 (м., 1Н); i,77 (и., 1Н).

С. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил Phe-S-MeCys nor-Sta.

Морфолинокарбонил Phe S-MeCys (130 мг) подвергают взаимодействию с nor-c-StaOMe HC1 (69 мг) с использованием методики ДГК, описанной.в примере 19- Сырой продукт хроматографи- руют на Si02 (19:1 ) с получением 58 мг чистого продукта.

ЯМР (ЗПО мГц, CDC1,) Л: 2,06 (с., ЗН); 3,72 (с., ЗН); Ь ,ЬП (м., 2Н).

П р и-м е р 22. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил Phe S-EtCys ; nor-c-Sta (1,Z - морС ОЛинокарбонилами но, М - фенил, О - Н, Кг - CH,SCKi, X .- циклогексил, W - CH/II1/OH и Z - COiCHCC 3)z).

А. Сложный метиловый эфир морфо- линокарбонил Phe S-EtCys.

Морфолинокарбонил Phe (0,2) г) подвергают взаимодействию с S-EtCys ОМе НС1 (0,15 г) с использованием ДГК, как описано в примере 19. Сырые соединения хроматографируют на Si02(3:1 Et oAc:Hex) с получением 0,20 г чистого продукта.

ЯМР (340 мГц, СВСЦ) U : 2,16 (тг, J 7 Гц, ЗН); 2, (кв., J 7 Гц, 2Н); 3,73 (с., ЗН); ,6А (м., 2Н).

В. Морфолинокарбонил Phe S-EtCys.

Сложный метиловый эфир формолино- карбонил Phe S-EtCys (0,20 г) омыляют как в примере 19, с получением 0,11 сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, СОСЛАН : 2,16 (т., J 7 Гц, ЗН); 2,50 (кв., J 7 Гц, 2Н); Ь,ЬЬ. (м., 1Н); k,79 (м.,1Н).

С. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил Phe S-EtCys-nor-c-Sta.

Морфолинокарбонил Phe S-EtCys (0,11 г) подвергают взаимодействию с nor-c-StaOMe-HCl (75 мг) с использованием методки ДГК, описанной в примере 19- Сырые соединения очищают хроматографией на S102 (9:1

СН2П2 :EtO |) с получением 0 , I С г чистого продукта.

ЯМР (.300 мГц, СПС1 ) /V : 2,21 (т. , J - 7 Гц, ЗН); 2,50 (м., 2Н); 3,75 (с., ЗН); Ь,Ы (м., 2Н).

Пример 23. Сложный метиловый эфир морфолингжарбонил Fhe Nvanor (c-Sta (1,Z - морфолинокарбониламино, м - фенил, О - H, Rj - н-пропил, X - цик- логексил, W - CH/1II/OH, Z -СОгСН(СН4), А. Сложный метиловый эфир морфоли нокарбонил PheNva.

Морфолинкарбонил Phe (П,20 г) и NvaOMe HC1 ((.,Ш г) конденсируют с использованием методики ЛТК, описанной в примере 19. Сырой материал хроматографируют на SiOz (A1, 1 EtOAc: :Нех) с получением 0,22 чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, СПС13)Д : 0,92 (т., J 7 Гц, ЗН); 3,65 (с., ЗН); Ь ,k2 (м., 1Н); k,5b (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонил PheNva. Сложный метиловый морфолинокзрбо- нил PheNva (0,22 г) омыляют стандартным способом (пример 19) с получением 0,1 г СЫРОЙ кисло ы, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 МГц, ГГС1 Д : П,8Э (т., J 7 Гц, 3); Ь,Ь6 (м. . in); 462 (м., 1Н

С. М-- ТМЛГ ЫЙ -ОС -Олинокаэбснил Phi Nv rv. r-c-St a ,

МорФолинокарг Нил Phe -Va (0,10 г) и nor-c-StaOMe- : (О,И75 г) подвергают взаимодействию с использеванием ДГК, как описано в примере 19. Сырой продукт очищают хроматографией (29:1 :EtOH) с получением 0 , 1 2 чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDCl,) Д : 0,96 (т. , J 7 Гц, ЗН); 3,7 (н., ЗН); А,29 (м. , 1Н); МО (м., 1Н); «4,53 (м. ,.

1Н).

П р и м е р 2k, н-Пропильмид морф линокарбонил PheNlenor-c-Sta (1,Z- морфолинокарбониламино, М - Сенил, Q - H, R2 - н-бутил, X - циклсгексил

w - cH/iii/OH, г - сскн(гч 2)).

Л. Boc-nor-c-Sta н-пропиллмид.

К раствору 1 мг Boc-nor-c-Sta и 21 мг н-пропиламина в 5 мл сухого СН2С12 прибавляют 5 мг ГБТ и 70 мг ДЭК, полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Раствор разбавляют 200 мл EtOAc и промывают два раза 20 мл воды, два раза 2.0 мл 0,1 н. раствора

П

5 0

5

0

,, 0

45

50

5

НГ1 , г.:--} раза /V мл 4,1 н.раствопэ NaOH. Оргямиие-гкую зу сушат в присутствии МяьОд, фильтруют и концентрирует в с получением мг ck- poro амида, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (ЗПО мГц, СЮС1)Л : 0,91 (т., J Гц, ЗН); 1. (с., 9Н); 3,85 (м., 1Н); 1,П1 (д., J 3 Гц, 1Н).

В. Хлоргидрат nor-c-Sta н-пропил- амида .

Смесь 139 мг Boc-nor-c-StaNHnPr в з мл k н.раствора НС1 в диоксане перемешивают при комнатной температуре в течение 3 м. Раствор концентрируют в вакууме с получением 9& мг сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDC1.,) Д : 0,91 (т., J 7 Гц, ЗН); 1, (с) 9Н); 3,85 (м., IHl; k, (д. , J 3 Гц, 1Н).

С. н-Прош памил морфолинокэрСонил Phe Nitnor-c-Sta.

НорСолинкарбонил {И5 мг) подвергают взаимодействию с HCl-nor- c-StaJv 4n (96 мг), используя методику ДЗК, описанную в примере 21. Сырой продукт . псматографируют на (9:1 СН. :ЬеОН) с получением 113мг чистого .

ЯУГ (30 мГц, : Г,С (т., 7 ГС, ЗН); Ч,ГЯ Ь. , J Гц, 1Н ) ; 43:: м. , .н; ; ;,,6о (м. , 1н) .

Гример. Пролиламид линк- рвснил Pht Nlen.-r-c-Sta (1,Z - M.opft злингкэрбониламино, М - нил, О - К, Р2. - н-бутил, X - ц клогексил, W - СН/II I/OH, Z1 - CONHCH(CH3)2).

А. Изопропиламид Boc-nor-c-Sta.

Изопропиламид (29 мг) подвергают взаимодействию с Boc-nor-c-Sta . (1UC м.г), используя методику ЛГК, описанную Б примере 19- материал хэометогрзфируют на SiOz (9:1 CH Cl :МбСН ) с получением 73 мг чистого f, ми да .

ЯМР ( мГц, : 1,11 (д. , J 5 Гц, ЗН); 1,12 {л., J 5 Гц, ЗН); 1,37 (с. , 9Н); 3,82 (м., 1Н); 3,97 (м., 1Н); А.ОЗ (м., 1Н).

В. Хлоргидрат изопропиламида nor-c-Sta.

Boc-nor-c-Sta :HiPr (62 мг) разблокируют путем перемешивания в 2 мл Ь н.раствора НС1 в диоксане в течение 3 м. Раствор концентрируют в ва- .кууме с получением 52 мг белого тверлого теля. Сирую соль Н 1 использует без дальнейшей омистки.

ЯМР (У)1-: мГц, DMCO-df)A : 1,10 (и. 6Н1; 3,92 (м. , 1Н); 3,98 (м., 1Н).

С. Изопропиламид морфолинкарбо- нил Phe Nlenor-c-Sta.

Морфслинкарбонил PheNle (8 мг) подвергают взаимодействию с HCl-ncr- c-StaNHiPr (8 мг) с использованием методики ДГК, описанной в примере 19. Сырой материал хроматографируют на SiOt (19:1 ) с получением 60 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, 0)С13)&: 1,09 (т., J 6 Гц, 6Н); «,1)0 (м., 1Н); 1,03 (м., ЗН); МЗ (м., 2Н).

П р и м е р 26. Изобутиламид мор- фолинскарбонил Phe Nlenor-c-Sta (1, Z - морфолинокарбониламино, М - фенил Q - Н, R 2 -н-бутил, X - циклогексил,

w - cH/iii/oH и z - сокъ:сигсн(сн,)2)

А. Изобутилэмид Boc-nor-c-Sta.

Изобутиламино мл) подвергают ьзаимодействию с Boc-nor-c-StaNHiBu (10(1 мг), используя методику ДГК, описанную е примере 19- Сырой материал очищают хроматографией (9;1 :МеОН) с получением 75 мг чистого продукта.

ЯМР (U) кГц, СПС1)Д : 0,89 (д., J 6 Гц, енЬ 1,39 (с., ЭН); 3,83

ц,08 (м., 1Н).

1м. ,

1Н

В. Хлоргидрат изобутиламида nor-c-Sta .

Boc-nor-c-StaNHiEu (Г/3 мг) разблокируют, как в примере 25, с получением Г/О мг неочищенной если, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-db-) Д : 0,85 (д., J 6 Гц, 6Н); 2,93 (м., 2Н);

Мз (-. 1НЬ

С. Изобутиламид морфолинкарбонил Phe Nlenor-c-Sta.

Морфолинкарбонил Phe Me (235 мг) подвергают взаимодействичз с HCl-nor- c-StaNHiBu (16(J мг) , используя методику ДГК (пример 19).. Сырой продукт очищают хроматографией (9:1 СНгС1г: :МеОН) с получением 152 мг -мстого продукта.

ЯМР (З. Ш мГц, 0)СЦ)Л: С,87 (д., J 6 Гц, 6Н); 1,Л8 (д., J 3 Гц, 1Н); k,32 (м., 2Н).

Пример.. N-Иeтил-N-изoпpo риламид морфолинкарбонил Phe Nlenor- c-Sta (1,Z - морфолинокарбониламино,

0

5

о

5

0

М - л.;нил, Q -F, RЈ - н-бутил, X - циклогексил, W - CH/111/Ot:, Z CON(()г).

А. Х-Метил-П-изопропиламид Бос- nor-с-St. a .

К-Ретил-К-изопропиламин (ЦЬ иг) подвергают взаимодействию с Бос-пог- c-Sta (120 мг), используя методику ДГК (пример 19). Сырой продукт хрома- тографируют (39:1 CH CljriMeOH) с получением 56 мг чистого продукта. ЯМР (300 мГц, (ЮС13)Д : 1,0 (с., 9Н); 2,89 (с., ЗН); Ь ,4k (м., 1Н).

В. Хлоргидрат N-мeтил-N-и.зoпpo- пиламида nor-c-Sta.

Boc-nor-c-StaN(Me)iPr (56 мг) разблокируют, как в примере 25, с получением 52 мг сырой соли, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d6) Д : 3,00 (с., ЗН); МО (с., 1Н).

С. N-Метил-К-изопропиламид мор- фолинокарбонид Phe Nlenor-c-Sta.

Морфслинокарбонид Phe Nle (73 иг) подвергают взаимодействию с HCl-nor- c-Sta(Me)iPr (5 мг), используя методику ДГК, описанную в примере 19. Сырой материал очищают хроматографи- ей (19:1 СН2С12:МеОН) с получением 99 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDC13) Д : 2,8 (с., ЗН}; А,1/. (м., 1Н); k, k$ (м., 1Н); 53 (м., 1Н).

Пример 78. М-Метил-К-изобу- тиламид морфолинокарбонил Phe Nlenor- c-Sta(1,Z - морфолинокарбониламино, М - фенил, Q - Н, HT. - н-бутил, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z - .CONHCHiCHCCH i).

А. N-Meтил-N-изoбyтилaмид Вос- nor-c-Sta.

Ь -метил-К-изобутиламин (56 мг) подвергают взаимодействию с Boc-nor- c-Sta (128 мг), используя методику ДГК, описанную в примере 19- Сырой материал хроматографируют (9:1 :МеОН) с получением 130 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDC13) & : 1,38 (с., 9Н); 3,03 (с., ЗН); ,28 (м., 1Н).

В. Хлоргидрат -мeтил-N-изoбyтил- амида nor-c-Sta.

Boc-nor-c-StaN(Me)iPr (123 мг) разблокируют, как описано в примере 19, с получением 118 мг сырой соли, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР ( мГц, DMCO-d,) i : 3,67

4.61

м.

(с., ЗН); 4,54 (м., 1Н).

С. К-Метил- -изобутиламид морфолинокарбонил The Nlenor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PheNle (Г/3 мг) подвергают взаимодействию с HCl-nor- c-Sta(Me ) iPr (118 мг) , используя ке- тодику ЛГК, описанную в примере 19- Сырой материал хроматографируют (19:1 : МеОН) с получением 184 мг чистого вещества,

ЯМР (30U мГц, СВГ1г) U : 3,04 (с. ЗН) ,: «4,18 (и., 1Н); 4,36 (м. , 1Н) ; 4,43 (м., 1Н); 4,5/ (м., 1Н).

пример 29. н-Пентил-змид мор- фолинокарбснил Phe Nlenor-c-Sta (1 , Z - морфолинокарбониламино, М - фени Q - Н, R 2 - н-бутил, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z1 - СП. Н(СНг)4СН5) . А. н-Пентиламид Bcc-nor-c-Sta.

н-Пентиламин (29 мг) подвергают взаимоде твию с Boc-nor-o-Sta (100 мг) .icnorv ;ур методику ДЭК, описанн;. в п;: -ере 2. Сырой материал (1/.Я мг) использую без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц. (НС,) Д : 1 ,41 (с., 9Н); 3,25 U-., 2Н); 3,86 (м., 1Н); 4,05 (м., 1Н).

В. Хлоргидрат н-пентиламида пог- c-Sta.

Boc-nor-St,THnPn (128 мг) разблокируют, как Р примере 24, с полуие- нием °В мг CSDC-. ; соли, которую используют Пез ддггней1уей очистки.

ЯМР (З )0 мГц, DMCO-d6) Д : 3,09 (м,, 2Н); 4.0U (д., J 4 Гц, 1Н).

С. н-Пентиламид морфолимокарбонил Phe Nlenor-c-Sta.

Морфолинскарбонил PheNle (138 мг) подвергают взаимодействию с НС1- nor-c-StaNHnPn (Ш8 мг) , используя методику ДЭК, описанную в примере 21. Сырой материал хроматографируют (19:1 CHjCb.-MeOH) с получением 140 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, )Д : 4,08 (м., 1Н); 4,32 (и., 2Н); 4,4 (м., 1Н).

П р и м е р 30. Сложный иэопропи- овый эфир морфолинокэрбонил пог-с- я. (1,Z - Морфолинокарбониламино, М нил,р-Н, Кг-н-бутил, X - цикло- ,-ексил, W - CH/III/OH и Z1 - Т04СН(СН3)2.) А. Хлоргидрат сложного изопропи- лового эфира nor-c-Sta.

,

л.

- -

О

35

40

45

Раствор DO мг тх-; -п.. г-.- -S : с-, в мл безводного ., нэсьша- от безводным раствором НС1, полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением 58 мг сырой соли, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-dg) Д : 1,20 (д., J 6 Гц, 6Н); 3,28 (м., 1Н); 4,05 (д., J 5 Гц, 1Н); 4,92 (м., 1Н).

15В Сложный изопропиловый эфир мор- фолинокарбонил Nlenor-c-Sta.

МорФолинокарбонил PheNle (142 мг) подвергают взаимодействию с RCl-nor- c-StaiPiv (92 мг), используя стандарт- 20 ную реакцию ДГК (пример 19). Сырой материал хроматографируют (9:1 : EtOH) с получением 60 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDCl) U : 1,24 (д., 25 J 1 Гц, 6Н), 4,06 (шир., 1Н); 4,19 (м., 1Н); 4,43 (м., 2Н); 5,ПО (и.,1Н).

П р и м е о 31 Сложный изопропи- эфир морфолинокарбонил РЬеО- Mc-slenor-c-Sta (1,Z - морфолинокарбо- 30 нилгмино, М - фенил, Q - Н, 2

СНрСН2-, X - циклогексил,-W -CK/II1/OH, ,Z - ГОгСпССНэ)).

А. Слокьый метилов&1Й морС О- линокарбомил PhtOMf-Ser .

Коофолинокпрбонил Phe (0,5 г) подвергают взаимодействию с DI.-0-метил- серих ПМе (0,34 г), используя стандартную реакцию ДЭК, списанную в примере 21. Сырой материал (0,37 г) используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (один изомер, 300 мГц, CDClj) А : 3,24 (с., ЗН); 3,76 (с., ЗН); 4,65 (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонид PheO-MeSer,

Морфолинокарбонил PheOMSerOMe (С,37 г) омыляют, как описано в примере 19, с получением 0,16 г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (один изомер, 300 мГц, CDC1,) 50 А, 3,18 (с.. ЗН); 4,58 (м., 1Н); 4,73 (м., 1Н).

С. Сложный изопропиловый эфир морфолинокарбонил PheO-He-Sernor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PheOMeSer 55 (0,15 г) подвергают взаимодействию с HCl-nor-c-StaOiPn (0,10 г), используя стандартную реакцию ДЭК (пример 21). Сырой материал хроматографиру33

ют (29:1 CrUClj : EtOH) с получением 3 мг чистого продукта и 36 мг эпимера серима.

ЯМР (основной изомер, 300 иГц, CDCl Д : J,k (с., ЗН); ,13 (п., 2Н); U,45 (и., 2Н); ,96 (м., 2Н).

П р и м е р . Сложный иэопропи ловый эфир морфолинкарбонил PheO EtSer nor-c-Sta O,Z - морфолинокэр бониламино, М - фенил, Q - Н, R W

СН}СНгСНг-, X - циклогексил, CH/III/OH, Z- - СО СНССН,)).

A. Boc-c-Et-Sta.

К раствору 0,9 г BocSer в 66 мл тетрагидрофурана прибавляют раствор 1,1+7 г NaOMe в 2,6 мл МеОН с последующим прибавлением 11,7 г Et 1. Через 15 мин прибавляют дополнительно NaOMe (0, г) и Et 1 (2 мл), реакционную смесь перемешивают при ком- ;натной температуре в течение ночи. Еще прибавляют NaOMe и Е 1 , реакционую смесь перемешивают 6 ч.

Смесь концентрируют в вакууме, растворяют в 25 ил воды и промывают два раза 25 мл простого эфира. Водную фазу подкисляют концентрированной НС1 и экстрагируют четыре раза 25 мл СН2С1г.

Объединенные экстракты сушат в прсутствии MgSO, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением 0,3 сырого продукта, который подлежит использованию.

ЯМР (300 мГц, CDC13) U : 1 ,19 (т., J - 7 Гц, ЗН); 1, (с., 9Ю; 3,53 (кв. J - 7 Гц, 2Н); Ц, (., 1Н).

В. Хлоргидрат сложного метиловог эфира 0-EtSer.

Раствор 0,51 г BocOEtSer в 25 ил безводного МеОН насыщают безводным раствором НС1 и перемешивают при конатной температуре в течение 18 ч. Раствор концентрируют в вакууме и твердый остаток перекристаллизовыва ют (EtOH):простой эфир) с получение 0,31 г чистой соли.

ЯМР (300 мГц, DMCO-di) U : 1,10 (т. , J 8 Гц, ЗН); 3,8 (м., 2Н); 3,75 (с., ЗН); 1,28 (м., 1Н).

С. Сложный метиловый эфир мерфо- линкарбонил 0-EtSer.

Морфолинокарбонил Phe (0,36 г) подвергают взаимодействию с НС1- OEtSerOMe (0,25 г), используя стандартную реакцию ДЭК (пример .1), сырой материал хроматографируют (19:1

36

П .22

0

5

5

0

0

CHjCljp : EtOH) с получением чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, СОС1%) & : 1,10 (т. , J 7 Гц, ЗН); 3,И (кв., J У Гц, 2Н),: 3,73 (с., ЗН); «4,62 (м.,2Н).

D. Морфолинокарбонил PheO-EtSer.

Морфолинокарбонил PheOEtSerOMe (0,22 г) омыляют, как описано в примере 19, с получением 0,15 г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDC1))& : 1,12 (2т., 5 ЗН),: 14,62 (м., 1Н); k ,П (м., 1Н).

Е. Сложный изопропиловый эфир Морфолинокарбонил PheOEtSernor-c-Sta, . Морфолиокарбонил PheOEt (75 Mr) подвергают взаимодействию с НС1-рог- cStaOiPr (5 мг), используя стандартную реакцию ДЭК (пример 21). Сырой материал хроматографируют (19:1 : EtOH) с получением 50 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDC1,) & : 1,12 (т., J 7 Гц, ЗН),: З,1 (кв., J 7 Гц, .Н); Ь,30 (м., 1Н); (м., 2Н) ; 5,ОЦ (и., 1Н).

П р и м е р 33- Сложный изопропи- 0 левый эфир Морфолинокарбонил PhePGly- nor-c-Sta (1,Z - иорфолинокарбонилами- но, К - фенил, Q - Н, Кг-СН3(СНг)г э X - циклогексил, V - CH/III/OH, Zr согсн(сн3)2).

А. Сложный этиловый эфир PG IV. Раствор 10 г GlyOEt-бензофенон- имина, 8 г йодопентана и I1 rUBu4NH- HHS04 в 15« мл СНгС12 и 33 ил ного раствора NaOH перемешиэайт при комнатной температуре в течение 16- ч., Органическую фазу отделяют, сушат в присутствии сульфата иагнир, фильтруют и .концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 50 мл тетрагидрофурана 5 и 50 мл 0,1 н.раствора НС1 и перемешивают при комнатной температуре в течение 21 ч. Смесь концентрируют до водного раствора и промывают трижды 50 мл простого эфира. Водную фазу делают основной и экстрагируют три раза 50 мл 2. Объединенные экстракты сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют и концентрируют. Остаток хроматографируют (1:1 EtOAc: :Нех) с получением 0,51 чистого продукта. Соответствующую соль F.C1 получают обработкой указанного выше амина безводным раствором НС1 в простом эфире,

ЯМР (330 мГц, n :;-p-Hb) С, : 1 ,Л5 (т. , J 7 Гц, ЗН); 1 ,77 (м. 2Н);

3,97 (м.,1Н); Ь,2П (и., 2Н).

В. Сложный этиловый эфио морфолино карбонил PhePGly.

Морфолинскэрбонил РЬе (0,0 г) подвергают взаимодействию с HCl-PGlyOEt (0,33 г), используя стандартную реакцию ЛЭК (пример 21). Сырой материал хроматографируют (1:3 EtOAc:Hex) с получением 0,0 г продукта в виде сме си диастереомеров при РГЛу.

ЯМР (300 мГц, GDC1,) Д : 43 (и., 2Н),: Ь,Ъ7. (м., 1Н); ,57 (м., 1Н).

С. Морфолинокарбонил PhePGly.

Морфолинокарбонил PhePGlyOtt омыляют, как описано в примере 19, с получением 0,33 г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (ЗОС мГц, CDC1,) Д : ОЗ (м. , 2Н); 472 (м. , 1Н) ; 493 (и. , 1Н).

D. ИЗРПРОПИЛОЕЫЙ эфир морфолинокарбонил PhePClynor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PhePGly (0,16 г) подвергают взаимодействию с HCl-nrr- c-Staoi (11,10 г), используя стандартную реакцию ЛЭК (пример 21). Сырой материал хромэтографируют (1:1 EtOAc: :} ех) с получением 0.11 г требуемого L-пподуктэ и t 6fi г В-изомерэ.

ЯМР (основной изомер, мГц,

CDC1

2 Г/ (п - - - ,

т

7 Гц, 6Н) ;

425 (м., 14); (м., 1Н), 4 53 (м., 1Н); 5,3 (м., 2Н).

П р и м е р 3. Сложный изопропи- ловый эфир Морфолинокарбонил РЪе-0- Me-H-S-enor-c-Sta (1,Z - морфолинокар бониламино, М - фенил,Q - Н3 RJ - СН(СР})г-. X - циклегексил, W CH/iii/cH и z - согсн ;сн4).

А. Вос-П-метилго осерин.

Вос-гомосерин (0,51 г) метилируют как описано в примере 32 для Вос-се- рина. Это позволяет получить 0,5 г сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (ЗПС мГц, CDC13) Л : 1 № (с., 9Н); 3,16 (с., ЗН); 3,90 (м.,2Н

В. Сложный изопропиловый эфир Boc-0-MeHSenor-c-Sta.

Boc-0-M-c-HSe (П,5 г) подвергают взаимодейст вию с nor-c-Sta (0,5 г), используя методику ДЭК, описанную в примере 21, за исключением того, что ТЭА не используется. Сырой материал хроматографируют (1:1 EtOAc:

5

0

0

5

0

0

5

0

5

с получением 0, чистого проД к т д. .

Я D (30(.l мГц, (Т-С1 3 Д : 1 ,21 (д., J 7 Гц, Г.ЗЯ (с., 9Н); 3,/ (с., ЗН); .19 (и., 1Н); ,38 (м. , 1Н1 ; 4,56 (м. , 1Н).

С. Слохмый изопропиловый эфир

0-MeH enor-c-Stа.

Boc-0-MeHSe-nor-c-StaOiPr (0,52 г) разблокируют, используя стандартные условия НС1:диоксан, описанные в примере 2k. Это приводит к получению 0,66 г сырого продукта, который ис- поль-зуют без дальнейшей очистки.

ЯМР (ЗОН мГц, DMCO-d6) U : 1,18 (д., J 7 Гц, 6Н); 3,2 (с., ЗН); 1,18 (м., 1Н); А,80 (и., 1Н).

D.. Сложный изопропиловый эфир иорфолинокарбонил PheO-MeHSenor-c-Sta,

Морфолинокарбонил Phe (0,19 г) подвергают взаимодействию с КС1-0- Me-HSb-r.or-c-StaOiPr (0.20 г), используя стандартную методику ЛЭК, описанную в примере 21. Сырой материал хроматографируют (29:1 СН2С12 : МеОН) с получением 0,31 г чистого продукта.

ЯМР (З Н) мГц, Q)) Д : 1 ,23 Д., Гц, ЗН); 1,25 (Д., J 7 Гц, ЗН); 3,19 (с., ЗН); А,29 (м. , 1Н); Д.Д2 (м. , 2Н); 5,0t« (м. , 1Н).

П р и м е р 35. Слг-г.ньч изопроп - .lOBti. зфир иорф-ол ноклрбс - ил FheAl- nor-c-Sta , 1 ,Z - мсрСолинокарбонил- амино, М - фенил, Q - Н, Р - (СРг)г СН}, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z - ООгС:-:(СН3)е

А. Морфолинокарбонил PheAla.

А.ГВНИН (П,2А г) и морфолинокарбо- нил PheOSuc (0,50 г) подвергают взаимодействию, как описано в примере приготовления А с получением 0,15 г сырого продукта, который используют без дзльиейией очистки.

ЯМР (ЗОС мГц, DMCO-d) Д : (д., J 7 Гц, ЗН); Ь,20 (м., 1Н); ,32 (м., 1Н).

Р. Сложный изопропиловый эфир Морфолинокарбонил FheAlenor-с-Sta.

Морфолинокарбонил PheAla ((,15 г) подвергают взаимодействию с пог-с- StaOiPr (0,13 г), используя методику ЛЭК, как описано в примере 3. Сырой материал хроиатографируют ( : EtOH) с получением 0,18 г чистого продукта.

ЯМР (ЗО 1 мГц, CDC1,) U : (д., J- 7 Гц, ЗН); 429 (м., 1Н); 38

39

(м., 1Н); Ц,Ы (м., 1Н); 1,9б (м. , 1Н).

П р и м е р 36. Сложный изопропи - евый эфир морфолинокарбонил PheGlu nor-c-Sta (1,Z - морфолинокарбонил- амино, Н - фенил, Q-H, Кг- (CHp CONHj X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z - СОгСН(СН,)г .

А. Морфолинокарбонид PheGlu. Глутамин (0,30 г) подвергают взамодействию с морфолинокарбонил Phe Sue (0,5П г), как описано в примере приготовления , получая 0,37 г сырого продукта, который использует без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 иГц, DMCO-d6) U : 3,3 (м., ); 1,15 (м., 1Н); 1,31 (м., 1Н).

В. Сложный изопропиловый эфир морфолинокарбонил PheGlunor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PheGlu (0,37 г) подвергают взаимодействию с пог-с- StaOiPr (U,21 г), используя ДЭК, как описано в примере Сырой материал хроматографируют (9:1 : EtOH) с .получением 0,18 г чистого продукта.

ЯМР (300 МГц, DMCO-d) Д : 1,17 (д., J 7 Гц, 6Н); 3,9 (м., 1Н); k,B (м., 2Н); 1,25 (м., 1Н); ,80 (м., 1Н).

П р и м е р 37. Сложный 3-метил- 2-пропаноловый эфир морфолинокарбо,- нил PheNlenor-c-Sta (I ,Z- морфолино- карбониламино, М - фенил, Q - Н, Kg - н-бутил, X - циклогексил, W-CH/III/CF и Z1 - COjrCHCCHj)) .

А. Хлоргидрат сложного 3-метил- 2-пропанолового эфира nor-c-Sta.

Раствор 100 мг Boc-nor-c-Sta в 5 мл З-метил-2-пропанола насыщают, безводным раствором НС1 и перемешивают в течение ночи. Раствор концентрируют в вакууме с получением 89 мг сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d) Д : 1,17 (д., J 7 Гц, ЗН); ,10 (м., 1Н); k,JQ (м., 1Н).

В. Сложный 3 метил-2-пропаноло- вый эфир морфолинокарбонил PheNlenor c-Sta.

Морфолинокарбонил PheNle (113 мг, пример 2й) подвергает взаимодействию с HCl-nor-c-Sta, З иетил-2-про- паноловым эфиром (89 мг), используя .стандартную реакцию ДЭК, описанную в примере 21. Сырой продукт хромаг-

F

10

15

70639140

тографируот (19:1 : MeOH) с получением 79 мг чистого продукта в виде смеси диастереомеров в положении эфирметил.

5ЯМР (300 мГц, СБС1,)Д : 1,13 (д., J 6 Гц, ЗН); k,k (м., 1Н); ,71 (м., 1Н).

П р и м е р 38. Сложный т-бутиловый эфир морфолинокарбонил PheMeCys nor-c-Sta (1,Z - морфолинокарбонил- амино, М -,фенил, Q - Н, R CH SCH2-, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Zf - С01С(СН)з).

А. Сложный т-бутиловый эфир пог- фенил Sta.

Повторяют методику для получения norPhStaOBu (пример 37), используя 3,0 г нитрила в 200 мл т-бутанола. Это приводит к получению 18А мг сыро го продукта после переработки, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 МГц, CDC1,) U : 3,6 (м., 1Н); 3,83 (д., J 3 Гц, 1Н).

В. Сложный т-бутиловый эфир nor- c-Sta.

Nor-PheStaOtBu (75 мг) гидрируют, как в примеое 37, с получением 6 мг сырого продукта после переработки.

ЯМР (300 мГц, CDC1,)Д : 1,32 (с., 9Н); 3,7 (м.. 1Н); 3,18 (шир., 1Н).

С. Сложный т-бутиловый эфир морфолинокарбонил PheSMeCysnor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PheMeCys (97 мг пример 21) подвергают взаимодействию с 60 мг nor-c-StaOtBu, используя методику ДЭК, описанную в примере 4Q Сырой материал хроматографируют. (19:1 : MeOH) с получением 50 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, СВСЬ) Д : 1,35 (с., 9Н); 2,13 (с., ЗН); 3,98 (м., 45 1Н); ,30 (м., 1Н); ,57 (м., 2Н).

Пример 39. N-Метиламид морфолинокарбонил PheMeCysnor-c-Sta(1, Z- морфолинокарбониламино, М - фенил, Q - Н, R.J. - CHjSCHj., X -циклогексил, W - CH/III/OH и Z - OCONHCH3).

20

25

30

35

50

А. N-Метиламид Boc-nor-c-Sta.

Boc-nor-c-Sta (0,25 г) подвергают взаимодействию с 57 мг ветияамин-- НС1, используя стандартную реакцию ДГК, описанную в примере 19. Сырой продукт хроматографируют (2:1 EtOAc: :Нех) с получением 0,16 г чистого продукта.

7

i

ЯМР I 30 U мГц , d Cl j ) i : 1 ,И (с. , 2,82 (л- , J 5 Гц, ЗН); 3,85 (м.( 14).

В. N-Метиламид nor-c-Sta.

Boc-nor-c-StaNHMe (0,16 г) разблокируют, используя НС1 в диоксане, как описано в примере , с получением 0,13 г сырой соли, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d6) Д : 2,62 (с., ЗН); 3,97 (д., J Гц, 1Н).

С. N-Метиламид морфоли окарбо- нид PheS-MeCysnor-c-Sta.

Морфолинокарбонил PheSMeCys (98мг( пример 21) подвергают взаимодействию с 73 мг HCl-nor-c-StaNHMe, используя методику ДЭК, описанную в примере 21. Сырой материал хроматографируют (19:1 СНгС12 : EtOH) с получением 52 г продукта в виде смеси эпимеров SMCys.

ЯМР (один изомер, 300 мГц, GDC1) Д : 2,02 (с., ЗН); 2,79 (д., J 5 Гц, ЗН); А,29 (и., 1Н); А,57 (м., .Н).

П р и м е р Ц1 . Сложный изопропи- лсзый Э .;- .р морФол.1нокарбсчил MeCys- nor-Ph-Pta (1,Z - мсрфолинскарбонил- амино, К фенил, Q -Н, C i3SCH2,

X - циклогексил, W - CH/1II/OK, Z - СО,Н П -Ji .

А. С изсг-ропилсе.ь-й по г -фе н иг - S t a .

Ксг-Fh-S .aOiFn получают из 118 мг нитрила так we , как получают сложный изобут илевый эфир (пример приготовления 5). Это позволяет получить 89 мг сырого продукта, который ис- пользуют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDClj) Д : 1,26 (д., J МГц, 6Н); 3,3 (м., 1Н); Ml (Д., J в 2 ru. 1H); 5,10 (м., 1Н).

В. Сложный изопропиловый эфир мор Фолинокэрбонил PheMeCys-nor-фенил- Sta.

Морфолинокарбонил PheSMeCys (0,96 г, пример 21) подвергают взаимодействию с С, 55 г nor-PhStaOiPr, используя методику ДЭК, описанную в примере 3. Сырой материал .хрома- тографируют (19:1 СНгС1г : МеОН) с получением 0,91 г чистого продукта.

ЯМР (30U мГц, СИС1з) Л : 1 ,18 (д., J 7 Гц, ЗН); 1,21 (д., J 7 Гц, ЗН); 2,00 (с., ЗН); k,k} (м., 2Н);-Ь.ЬЭ (м., 1Н); 5,00 (м., 1Н).

5 0

5

0

5 0

5

0

5

П р и м е р 1 . Сложный изопс .)пи- ловый эфир морфолинокарбонил 0-МеТуг- N1 -St а 1 ,Z - морфогингкарбснил- ..лмино, - п-метоксифеиил, О -Н, RJ - н-бутиг., X - циклогексил, V -СИ/111/ОН и Z - СОгСН(СН,)г ).

А. Слоимый метиловый эфир ВосО- МеТуг .

Раствор 7,3 г ВосТуг в 100 мл i МеОН обрабатывают большим избытком диазометана в 250 мл простого эфира. Через 2-4 и 8 ч проявляют дополнитель но диазометан. Через 72 ч реакционную дмесь охлаждают последством НОАс, концентрируют, разбавляют 100 мл EtOAc и промывают дважды 50 мл насыщенного раствора NaHCOj. Органическую фазу сушат в присутствии MgS04 фильтруют и концентрируют. Остаток хромэтографируют (9: 1 Hej :EtOAc) с получением 6, г чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, СТ)) Д : 1 ,2 (с., 9Н); 3,69 (с., ЗН); 3,76 (м., ЗН),: А,51 (м., 1Н).

В. Хлоргидрэт сложного метилового эфира 0-МеТуг.

Boc-0-MeTyrome (6, г) разблокируют, используя НС1 в диоксане, как описано в примере 2k. Это приводит к получению 5,1 г сырого- продукта, в ксторь й используют без дальнейшей

ОЧИСТКИ,

ЯМР 330 МГц, nMCO-dp .i i : 3,76 (с., ЗН); 3,7 (с., 3); М9 (м., 1Н).

С. Иэоцианат сложного метилового эфира С-MeТуг.

В суспензию 5,1 г НС1-0-MeТуг ОМе в 150 мл толуола барботируют фосген при температуре, медленно повышающейся до температуры дефлегмации. После того, как весь материал растворился, раствор охлаждает и концентрируют в вакууме с получением 7,0 г изоцианата.

ЯМР (300 МГц, СРС1,) Д : 3,85 (с., 6Н); 4,2 IM., 1H); 6,8о (д., J 8 Гц, 2Н); 7,1 (д., J 8 Гц, 2Н).

D. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил 0-МеТуг.

К раствору 0,5 0-МеТуг ОМе-иэоци- аната в 150 мл . при температуре 0°С прибавляют 2,ч г морфолина. После Перемешивания в течение 15 мин раствор концентрируют и остаток хро- матографируют (EtOAc) с получением 3,5 г чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, СПСЦ) Д : 3,66 (с.,ЗН); 3,72 (с., ЗН); ,67 (м., 1H)j ,91 д., J 8 Гц, 1Н).

Е. Морфолинокарбонил 0-МеТуг,

МорФоличокарбонил 0-МеТугОМе (3,6 г) омыляют, как описано в примере 19, с получением 3,0 г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей омистки.

ЯМР (330 мГц, CDC1,)U : 3,78 (с., ЗН); 1,61 (., 1Н); Г,,82 (д., J 8 Гц, 2Н); 7,08 (д., J - 8 Гц,

2Н).

F. Сложный бензиловый эфир морфо- линокэрбонил 0-МеТуг.

Морфолинокарбонил 0-МеТуг (0,50 f) подвергают взаимодействию с 0,i2 г HClNleOBn, используя стандартную реакцию ЛЭК (пример 21). Сырой материал хроматографируют (19:1 : :МеОН) с получением П,77 г чистого продукта.

ЯМР (ЗОП «Гц, CDC1 ,) Д : 3,76 (с., ЗН); ,5П (и., ХН).

G. Морфолинокарбонил 0-МеТуг.

I

Смесь 0,77 г Морфолинокарбонил О-MeTyrNleOBu и 0,3В г 10%-ного пал- ладированного угля в 60 мл EtOH гид- рируют при давлении 50 фунтов на кв.дсйм (3,5155 кг/смг) в течение

3 ч.

Смесь фильтруют через целит и концентрирует в вакууме с получением 0,63 г сырой кислоты.

ЯМР (300 мГц, ,)й : 3,72 (с., ЗН); Ц,1 (м., 1Н).

Н. Сложный изопропиловый эфир Морфолинокарбонил О-MeTyrlenor-c-Sta.

Морфолинокарбонил 0-MeTyrNle (У мг) подвергают взаимодействию с 51 мг HCl-nor-c-StaOiPr, используя стандартную реакцию ЛГК, описанную в примере 19. Сырой материал хроматографируют (19:1 : МеОН) с получением 98 мг чистого продукта.

ЯМР (ЗОЯ мГц, СВСЦ) Д : 3,78 (с., ЗН); Ml (м., 1Н); 1, (м., 2Н); 5,03 (м.. 1Н).

10

15

20

взаимодействию с 0,36 г HCl-S-MeCys ОМе, используя стандартную реакцию ДЭК, описанную в примере 21. Это приводит к получению 0, г сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDC15) U : 2,01 (с., ЗН); 3,71 (с., ЗН); 3,7 (с., ЗН); 4,55 (и., 1Н); (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонил 0-МеСуз.

Морфолинокарбонил 0-MeCysOMe (0,32 г) омыляют, как описано в примере 19, с получением 0,28 г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, СЮСЦ) & : 2,11 (с., ЗН); 3,78 (с., ЗН); i,69 (м 1НЬ 1,77 (м., 1Н).

С. Сложный изопропиловый эфир Морфолинокарбонил 0-MeTyrSMeCys-nor- c-Sta.

Морфолинокарбонил 0-MeCys (0,17 г) подве ргают взаимодействию с 0,10 г- 25 HCl-nor-c-StaOiPr, используя стандартную реакцию ДЭК, описанную в при- мере 21. Сырой материал хроматографируют (19:1 СК2С1г : EtOH) с получением 0,18 г чистого продукта. 30ЯМР (300 гМц, CDCl}) U : 2,08 (с., ЗН); 3,75. (с., ЗН); ,39 (м., ЗН); 5,01 (м., 1Н).

П р и м е р 3- Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил 0-MeTyrNlenor- 35 c-Sta (1 ,7Z -морфолинокарбсниламино), М - п-метоксифенил, Q -Н, R. н-бу- тил, X - циклогексил, W - CH/III/OH,

г ,).

Морфолинокарбонил TyrNle (100 мг, 40 пример 1) подвергают взаимодействию с 65 кг HCl-nor-c-StaOMe (пример 19), используя стандартную реакцию ЛЭК (пример XI). Сырой материал хроматографируют (19:1 СНгС1г : МеОН) с 45 получением 121 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDClj) Л : 3,80 (с., ЗН); 3,82 (с., ЗН); ,26 (м., 1Н),: 1, (м., 2Н).

П р и м е р М. N-Метиламид мор i nncp-n. in-ПС Т И J Id МИД f

Пример.. Сложный изопропи- фолинокарбонил OMeTyrNlenor-c-Sta ловый эфир морФолинокарбонил О-MeTyrS- (, морфолинок бониламино м. . MeCysnor-c-Sta(l,7Z-Морфолинокарбонил- ТОКсифенил,Q - Н, Rt - н-бутил, X циклогексил, W - CH/III/OI1 и z - CONHCHj).

Морфолинокарбонил 0-МеTyrNle (132 мг, пример 1) подвергают взаимодействию с 78 мг HCl-nor-c-StaNM-le

амино, М - п-метоксифенил, Q - Н, RЈ - CH,SCH2, X - циклогексил,W -CH/III/OH

и 2- С02СГ.(П з)2)

А. Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил 0-MeTyrSMeCys.

Морфолинокарбонил 0-Метуг (0,25 г, пример приготовления 6) подвергают

(пример 39), используя стандартную

10

15

20

бзэГ

взаимодействию с 0,36 г HCl-S-MeCys ОМе, используя стандартную реакцию ДЭК, описанную в примере 21. Это приводит к получению 0, г сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDC15) U : 2,01 (с., ЗН); 3,71 (с., ЗН); 3,7 (с., ЗН); 4,55 (и., 1Н); (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонил 0-МеСуз.

Морфолинокарбонил 0-MeCysOMe (0,32 г) омыляют, как описано в примере 19, с получением 0,28 г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, СЮСЦ) & : 2,11 (с., ЗН); 3,78 (с., ЗН); i,69 (м 1НЬ 1,77 (м., 1Н).

С. Сложный изопропиловый эфир Морфолинокарбонил 0-MeTyrSMeCys-nor- c-Sta.

Морфолинокарбонил 0-MeCys (0,17 г) подве ргают взаимодействию с 0,10 г- 25 HCl-nor-c-StaOiPr, используя стандартную реакцию ДЭК, описанную в при- мере 21. Сырой материал хроматографируют (19:1 СК2С1г : EtOH) с получением 0,18 г чистого продукта. 30ЯМР (300 гМц, CDCl}) U : 2,08 (с., ЗН); 3,75. (с., ЗН); ,39 (м., ЗН); 5,01 (м., 1Н).

П р и м е р 3- Сложный метиловый эфир Морфолинокарбонил 0-MeTyrNlenor- 35 c-Sta (1 ,7Z -морфолинокарбсниламино), М - п-метоксифенил, Q -Н, R. н-бу- тил, X - циклогексил, W - CH/III/OH,

г ,).

Морфолинокарбонил TyrNle (100 мг, 40 пример 1) подвергают взаимодействию с 65 кг HCl-nor-c-StaOMe (пример 19), используя стандартную реакцию ЛЭК (пример XI). Сырой материал хроматографируют (19:1 СНгС1г : МеОН) с 45 получением 121 мг чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDClj) Л : 3,80 (с., ЗН); 3,82 (с., ЗН); ,26 (м., 1Н),: 1, (м., 2Н).

П р и м е р М. N-Метиламид мор i nncp-n. in-ПС Т И J Id МИД f

фолинокарбонил OMeTyrNlenor-c-Sta - (, морфолинок бониламино м. . л- ТОКсифенил,Q - Н, Rt - н-бутил, X Морфолинокарбонил 0-МеTyrNle (132 мг, пример 1) подвергают взаи действию с 78 мг HCl-nor-c-StaNM-le

(пример 39), используя стандартную

реакцию ЛГК, описанную в примере 19. Сыгюй материал роматограФируют (9:1 СНгС, : МеОН) с получением .155 мг чистого продукта.

ЯМР (3; 0 мГц, CDC1 О Д : 2,79 (д., J - 5 Гц, ЗН); 3,75 (с., 3H)i Ь,22 (м., 1Н); U.30 (м., .Н).

П р и м е р 5. Сложный изопропи- ловый эСир морфолиномет.- лфосфинико PheNlenor-c-Sta (1,Z - моофолино ,Р(ОСН 0) амино, М - фенил, Q - II, R - н-5утил, X - циклогексил; W CH/III/OH, г - со2сн(сн%)г).

А. Сложный бензиловый эфир морфо- линометилФосфинико PheNle.

Раствор 0,30 r PheNleOBn, OJD r ТЭА и d,kk r хлорангидрида норфолино метилфосфиновой кислоты в 10 мл перемешивают в течение 60 ч. Раствор разбавляют 50 мл EtOAc и промывают 25 мл 0,1 н.раствора НС1 и 25 мг 0,1 н.раствора NaOH. Органическую фазу сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют и концентрируют. Остаток .хромато -рафируют (19:1 СН2С1г : EtOH) с получением 0,18 г продукта в виде смеси изомеров в пол жении фосфора,

ЯМР (300 мГц, CDC1}) Д : 3,57 (д., J 10 Гц, ЗН); 1,50 1м., 1Н); 5, 09 (м., 2Н)

В. МорФог. н.,.мети лФосФинико FheN Ie

Вышеприведенное .-;ство разблокируют, как описано в примере 1 В, с получением 0,10 г сырого продукта.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d6) Д : 3,26 (д., J 10 Гц, ЗН); 3,96 (м., 1Н).

С. Сложи-,и изопропиловый эфир морфслинометилФосФинико PheNlenor-c- Sta.

Продукт псимера 5 В (0,10 г) подвергают взаимодействию с 5В мг НС1-nor-c-StaOiPr, используя методику ДЭК. описанную в примере П. -Хро- иатограЛия (19:1 СКгС12 : EtOH) позволяет получить 28 мг чистого вещества.

ЯМР (3-1С мГц, СВС1з) U : 3,61 (д., J 11 Гц, ЗН); Ъ,М (м., 1Н); ,3 (м., 1Н).

П р и м е р 6. Сложный бензиловый эфир морфолинокарбонил PheS-MeCy nor-c-Sta (1,Z - морфолинокарбонилам но, М - Фенил, Q-H, Кг - CH3SCH2-, X - циклогексил, W - CH/III/OH и Z СОгСН2СЈН5).

А. Слокный бензиловый эфир Вос- nor-c-Sta.

P C-ncr-c-5 Ui (П,10 г) эстери ици- руют 1),11 г ензилс. вого спиртд, используя стандартную реакцию /1ЭК (пример /.) с 0,25 эквивалентами DMAP. Сырой материал хроматограФи- руют (39:1 СН2С12 : МеОН) с получением Л, 11; г чистого сложного эфиэа.

ЯМР ( мГц, CDC13 Д : 1 ,19 0 (с., 9Н); А,П (с., 1Н); it,13 (с., 1Н); 5, Т (АВ, 2Н).

В. Хлоргидрат сложного бенэилово- го эфира Nor-c-Sta.

Продукт поимера 26 А (Л,10 г) разблокируют, как описано в примере 24, с получением 96 мг сырой соли, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (ЗОН Гц, DMCO-d6) Д : 1,1б 0 (н-, 1Н); 5,12 (м., 2Н).

С. Сложный бензиловый эфир мор- фолинокарбонил PheS/MeCysnor-c-Sta.

Продук полимера 6 В (0,12 г) подвергают взаимодействию с б мг 5 HCl-nor-c-StaCBn, используя стандартную реакцию ЛЭК, описанную в примере 21. Сыоой материал хроматографи- руют (19:1 :МеОК) с получением 9 мг чистого соединения. 0ЯМР (300 мГц, CDCb) Д : 2,С8 с., ЗН); МП (м., ЗН);- 5, Т (АВ.2Н),

Пример /. Сложнь й циклогек- сил,/етилозый эфир мо.о.инскэрбснил PheS-MeCvsnor-c-Sta (1,Z - морФолинс- карбсниламино, М - сенил, Q - Н, R - СКЭ5СК2 X циклогексил, W CH/III/OH и гх-согсн.сен,, ).

Р-. Сложный циклогексил метиловый эфир Boc-nor-c-Sta.

Бос-nor-c-Sta (7 мг) эстерифици- руют 80 мг циклогексилметанола, как описано в примере 6, с получением 0 мг чистого вещества после хрома- тогоафии (39:1 : МеОН). , ЯМР (ЗСО мГц, CDC13)A : 1 ,35 (с., 9Н); 3,39 (д., J 6 Гц, 1Н);

(м., 1Н).

0

В. Хлоргидрат сложного ииклогексилметилового эфира nor-c-Sta.

Продукт примера 1 (0 мг) разблокируют, как описано в примере 2, с получением 37 мг сырой соли.

ЯМР (310 мГц, DMCO-dg) Д : 3,53 (с., 1Н); if.HJ (м., 1Н).

С. Сложный циклогексилметиловый эфир морфолинокарбонил Phe4ieC snor- c-Sta.

4717

Морфолинокарбонил The-MeСуs ( мг) подвергает взаимодействию с 3 мг продукта примера 7, используя реакцию ДЭК (пример 21), хроматогра- фия (19:1 СР2С12:МеОН) позволяет по- лучить 50 мг чистого продукта.

ЯМР (30D мГц, CDC1 5) : 2 ,1 V. (с., ЗН); Ь,Ь. (м., ЗН).

П р и м е р «В. Сложный метиловый эфир морфолинокарбонил Phes-MeCysnor c-Sta (1,Z - морфюлинокарбониламино, М - фенил, Кг - CH SCHj-, Q - Н, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z; со;снэ).

Следуя обычной методике сочетания, находят, что 135 мг хлоргидра- та сложного метилового эфира S-MeCys nor-0-Sta, 88,2 мг морфолинокарбонил Phe, 32,1 мг N-метилморфолинв , ,9 мг ГБТ и 65, мг ДГК в 20 мл метиленхлорида дают сырой продукт, который после хроматографии на сили- с использованием хлороформ:

гтанол (99:1 объемн.) приводит

получению 103 мг чистого продукта идентичного тому, который получен в примере 5В.

ЯМР (300 мГц, CDC1}) Л : 2,1 (с., ЗН); 3,7 (с., ЗН); З.О-З, (м., МН); 3,5-3,814 (м., ); 7,3 (с., 5Н).

П р и м е р 9- Сложный изопро- пиловый эфир (k-метоксикарбонипирро- лд-1-ил)-карбонил PheS-MeCysnor-c- са (1,Z - 1 -(2-метоксикарбонилпирро идилкарбониламино, М - фенил, Q - Н

г CHjSCH -, X - циклогексил, W CH/III/OH иг - соснсснз)).

А. Сложный бензиловый эфир U-ме -

токсикэрбонилпирролид-1-ил)-карбо- нил Phe.

Раствор 66 мг хлоргидрата сложно- го прплинметилового эфира в 10 мл CHjClfc и 70 мкл К,К-диизопропилэтил- амина обрабатывают 112 мг 1-бензил- оксикарбонил-/ -С €нетилизоцианата при U°C, реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Переработка позволяет получить 153 мг требуемого промежуточного продукта.

В.(2-Кетоксикарбонипирррлид-1 -ил) карбокси Phe.

Используя методику примера 1В, продукт примера 9 А дебензилируют С получением Г/О мг промежуточного продукта.

ч8

С. Сложный изопропиловый эфир 2- (иетоксикарбонилпирролид-1 -ил)карбо- нил Phes-MeCysnor-c-Sta.

Используя обычную методику сочета ния, находят, что продукт приготовления 8 В (1/1 мг) , вышеуказанный промежуточный продукт ( мг) , 82мг ДГК, 55 мг ГБТ и 5 мкл N-метилмор- фолина в 10 мл СН2С12 приводят к получению 230 мг сырого продукта.

Хромат.ография на силикагеле с использованием 2-1,5%-ного метанола в хлороформе позволяет получить 102 г чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDC1})& : 1,21 (м., 6Н),: 2,09 (с., ЗН); 2,78-2,89 (м., 2Н); 3,0-3,2 (м., 2Н); 3,65 (с., ЗН),: 7,12-7,32 {м., 5Н),

Пример 50. Этиленкеталь сложного изопропилового эфира 4-оксо- пиперидинокарбонил Phe-MeCysnor-c- Sta (1,Z - 4-оксопиперидинокарбонил Phe-MeCysnor-c-Sta(1,Z - А-оксопипери динокарбониламино этиленкеталь, М - фенил, Q - Н, Кг - СН,5СНг-, X - циклогексил, W - CH/III/OH и Z - OOrCH(CH5)fc).

В соответствии с методикой получения и очистки продукта примера 18 150 мг продукта приготовления 3 и 32 нкл этиленкетеля -пиперидона приводят к получению 60 мг бесцветного порошка, Rr TCX 0,30 в этилаце- тате, ВЗЖХ:2,76 и 3,09 мин (приблизительно 2:1) в 80:20 ацетонитрил:во да. Основной компонент отделяют по- лупрепаративной ВЗКХ с обращенной фазой на колонке 9, Zorbax C-8 в смеси 70:30 ацетонитрил:вода, 60 мг смеси, получая 28 мг ранее элюируемо го соединения.

1МЯМР, CDCl, 250 мГц, частичный, &: ррш: 0,92 (м., 1,26 и 1,28 (д., ЗН каждый); 2,09 (с., ЗН); 2,72; 2,93; 3,08 и 3,29 (лд., 1Н каждый); 3,3 (м.,) 3,92 (c.JiH); i,1C (шир. 1Н); М5-«4,53 (м-, ЗН); 478 (д., 1Н)j 5,06 (септет, 1Н); 6,95 и 7,11 (д., 1Н каждый); 7,18-7,38 (м., аромат .).

П р и м е р 51. Сложный изопропиловый эфир -оксопиперидинокарбонил Phe-MeCysnor-c-StA d,Z -Д-оксопипери динокарбониламино, М - фенил, Q - Н, RZ - CHjSCHz-, X - циклогексил, W - CH/III/OH и Z - СОгСР(СН3)2)

А. Сложный бензиловый эфир -оксо пиперидинокарбонил Phc.

vi:-T

Хлор идрэт -сжсопиперидонэ (819 мг) растворяют в 15 мл дихлор- метана и обрабатывают при 03С триэтиламина и 1,50 г продукта при- меря 1 А (изоцианато T heOBn). Через 1,5 ч смесь растворяют в этилацета- те, промывают 1 н. раствором, сушат в присутствии сульфата магния, концентрируют, растворяют в 10 мл горя- чей смеси 2:1 этилацетат:гексан, охлаждают и фильтруют, получая 0,6 г твердого тела, ГЦ ТСХ 0,53 в 1 : 1 системы А. Маточные растворы хроматогра - фируют на кремнеземе в смеси 1:1 этилацетат : гексан, получая 322 мг светлого масла, ГЦ ТСХ 0,13 в системе А, причем ЯМР-спектр соответствует указанной в заголовке структуры.

В. А-ОксопиперидинокарСонил Phe.

Продукт примера 51 А (/97 мг) растворяют в 15 мл 1:1С уксусная кислота;метанол и встряхивают при 25°С и давлении водорода 50 Фунтов на кв. дюйм (3,5155 кг(см2) с 150мг 1Ci;-Horo Pd/C в течение 30 мин, затем фильтруют, концентрируют и совместно упаривают с добавлением толуо ла, получая 227 мг бесцветной пены. Rr ТСХ и,05 в этилацетате.

С. Сложный изопропиловый эфир k- сксопиперидинокарбонил PheS-MeСуsпог c-Sta.

С использованием получения и очистки продукта примера 15 В, эд исключе- нием того, что триэтиламин используют для нейтрализации хлоргидрата амина, 100 мг хлоргидсатэ сложного изопропилового эфира S-MeCysncr-c- Sta (продукт приготовления 90) и 73 мг продукта примера 1 .8 В приводят к получению 116 мг бесцветного твердого тела К ТСХ 0,29 Б этилацетате.

П р и м е р 52. Сложный изопропи- ловый эфир карбоксибутилкарбонил Phe S-MeCys-nor-c-Sta(1,Z - HOsCCCH CONH М г Фенил, Q - Н, RZ - CH3SCH2-, X - циклогексил, W - СН/И1/СЯ1 и Z1 СОгСН(.)-

А. Сложный изопропиловый эфир

(CHj)3С02С(СНг)4СОРпе S-MeCysnor-c- Sta.

Моно-трет-Путиловый эфир гексан- дикарбоновой кислоты (0,10 г) кон- денсируют с 0,10 г хлоргидрата сложного изопропилового Эфира Phe S-MeCys nor-c-Sta, используя методику ДЭК, как описано в примере 21. Хроматогрчфия на SiO,, (1:1Q V-: Ci::fl-:.;i.b ) позволяет получить 95 мг - истог- продукта .

ЯМР (30 мГц, СИП ,) Д : 1 ,41 (с. , 9Н),: ,3« (м., 2Н); Ц,62 (м. , 1Н),: 5,01 (м. , 1Н).

Р. Слочный изопропиловый эфир . карбокси утилкарбон.щ РheS-MeСуsnor- c-Sta.

Раствор 90 мг вышеуказанного сложного т-бутилсвого эфира в 2 мл три- Йторуксусной кислоты и 2 мл перемешивают при комнатной температуре в- течение 1 ч. После стандартной обработки кислота - основание сырой материал очищают роматографией (9:1 СН С14:МеОН) с получением 52 г чистого продукта.

ЯМР (300 Мгц, CDC1,) Д : 2,08 (с., ЗН),: Ь,Ы, (м., ХН); 1,73 (и., 1Н),: ,97 (м., 2Н).

П р и м е р 53. Сложный изопропиловый эфир морфояинокарбонил PheVal- nor-c-Sta(1,Z - морфолинокарбонилами но, М - фенил, Q - Н, R z - СН(СН3)г; X - циклогексил, W - CH/1II/OH и г -СО СН(СН3)г).

А. Мороолинокарбонил FheVal.

Валин (0,0 г) обрабатывают 0,60 г сложного гидроксисукцинимид- ного эфира морФол нокарбонил Phe, как описано в приготовлении . Сырой матерел (-,53 г) используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (3-1 мГц, DMfO-O Л : 0,92 (Д., -т - 7 Гц, ЗН); ,18 (м., 1Н); ,3 (м., 1Н).

В. Сложный изопрспиловый эфир морфолинокарбонил PheValnor-c-Sta.

Вышеуказанный продукт (0,17 г) подвергают взаимодействию с 0,10 г сложного изопропилового эфира nor-c- Sta, используя ст ндартную реакцию ДЭК (пример ЗМ. Сырое вещество хроматографируют ( СН2С1г :МеОН) с получением 0,15 г чистого продукта

ЯМР (30:; мГц, CDC13) : «,77 (д., J 6 Гц, ЗН); 0,8 (д., J 7 Гц, ЗН); k,kS (м., 2Н); ,52 (м., 1Н); 5,ПС (м.,1Н).

П р и м е р 5. Морфолинокарбонил гексагидро Phe-S-MeCysnor-S-Sta-i пропиловый эфир (l ,Z - морфолинокарбо нил-амино, М - циклогексил, Q - Н; Ri CH3SCH2, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z - COj,CH(CH3)2 ).

А. Морфолинокарбонилгексагидро-L- фенилаланин.

Продукт примера 1 С С,0 г) растворяют в 55 мл смеси 10:1 метанол . уксусная кислота и встряхивает с 1,0 г 10% Rh/C при давлении водорода 50 фунтов на кв.дюйм ( эти) при 25 С в течение 3,5 ч. Смесь фильтруют через броунмиллерит, концентрируют и выпаривает с эфиром, получая ,15 г бесцветной пены, которую очищают на двуокиси кремния (пропитанной этилацетатом, элюирование этилацета- том, градиент этанола-дихлорметана), получая мг бесцветной пены, ТСХ Rt 0,4.

Пример приготовления 1 .

BocPheHisnor-c-StaNKCH3)(1,Z - т ре бутоксикарбонилэмино, М - фенил, QR i - имидазол- 4-илметил, W-CF...OH Z - ССЖНСНз и X - циклогексил).

А. К-Метил-(8)-3-т рет-Вос-ами- но- -циклогексил(к)-2-гидроксибутир

амид.

100 мг (5)-3-трет-Вос-амино-|4-цик20 Д°й дважды промывают этилацетатом и доводят рН до 1,1 с помощью 1 н. НС1 в присутствии этилацетата. Отделяют органический слой, водный слой экстрагируют четырьмя порциями этил логексил(к)-л-гидроксимасляной кисло- 25 ацетата, комбинированные органические

ты, растворяют в смеси из 0,9 мл тет- рагидроАурана с 55 мкл триэтиламина, полученную смесь обрабатывают изобу- тилхлороОорматом (5 мкл) при -ЗСЙС. Через 1,5 ч смесь охлаждают до -60°С, прибавляют 1,5 мл 1,6 М раствора метиламина в тетрагидрофуране , смесь доводят до 25°С. Барботируют излишек метиламина в реакционную смесь, которую затем разбавляют 25 мл простого эфира, дважды экстрагируют насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушивают и концентрируют. При хрома - тографии в смеси из 2:1 этилацетата с гексаном на двуокиси кремния получают 5 мг (Ь2%) названного пептида в виде бесцветного твердого вещества, Ri 0,16 в системе 2:1 этилацетат: :гексан, на двуокиси кремния и при ВЗЖХ: время удержания 3,32 мин в 0/60 MeCN, рН 2, 1М фосфатном буфере.

В. К-Метил-1 (5)-3-эмино- -цикло- гексил-(к)-2-оксибутирамид.

1+5 мг продукта, полученного по примеру приготовления 1 Л, растворяют в 2 мл смеси из н.хлористого водорода с диоксаном и перемешивают при 25°С в течение 1 ,5 ч.

В. Оксисукцинимидный эфир морфоли- нокарбонилгексагидро Phe.

Продукт примера 5 А (700 мг) растворяют в 5 мл диметоксиэтана и обрабатывают последовательно при О С

30

35

40

слои дважды промывают 1 н. НС1, соляным раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 79& мг бесцветной пены.

D. Норфолинокарбонилгексагидро Phe-S-MeCysnor-c-Sta-i nponиловый ЗФир.

По методике получения и очистки продукта примера 15 В 9 мг пог-с- Sta-изопропилового эфира и 170 мг про дукта примера $Ь С дают 178 мг бесцветного порошка, ТСХ RJ 0,83 в системе С, ВЭЖХ ,1б мин в смеси 70:30 ацетонитрил:фосфат, рН 2,1.

НЯМР, О5С13, 250 мГц, частичный, Л, мд: 0,83 (и., itH); 1,26 и 1,27 (д., ЗН кажд.); 2,13 (с., ЗЮ; 2,76 и 3,11 (дд., 1Н кэжд.); 3,39 (м., М-0; 3,70 (м., АН); Ц,08 (шир., 1Н); 45 14,28 (м., 1Н); Ц,И (м., 2Н); «4,82; 6,83 и 6,93 (д., 1Н кажд.); 5,С4 (септет, 1Н).

Полученную смесь концентрируют и несколько раз упаривают вместе с прос тым эфиром с выходом 50 г названного продукта в виде бесцветного твердого вещества, время удержания при ВЭЖХ 3,05 мин, в MeCN (рН 7,0) 01 М фосфатном буфере.

С. Вое PheHisCim Boc)nor-с-StaNHC

Раствор продукта из приготовления 1 В мг) и 0,5 мкл дихлорметана обрабатывают при U°C 30 мкл триэтиламина, 112 мг BocPheHis(im-Boc),

50

55

283 мг оксисукцинимида и 507 мг ди- цикяогексилкарбодиимида. Реакционную смесь оставляют нагреваться до 18°С в течение ночи, фильтруют, концентрируют, остаток растворяют в этилацета- те, который промывают дважды насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, соляным раствором, сушат над

сульфатом магния и концентрируют, получая 701 мг бесцветной пены.

С. Морфолинокарбонилгексагидро- S-Phe-MeCys.

S-Метилцистеин (М2 мг) растворяют в k,6 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и добавляют 2,5 мл ТГФ, а затем 890 мг продукта примера $Ь В. После перемешивания 20 мин при 25е С смесь разбавляют воД°й дважды промывают этилацетатом и доводят рН до 1,1 с помощью 1 н. НС1 в присутствии этилацетата. Отделяют органический слой, водный слой экстрагируют четырьмя порциями этилацетата, комбинированные органические

0

5

0

слои дважды промывают 1 н. НС1, соляным раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 79& мг бесцветной пены.

D. Норфолинокарбонилгексагидро Phe-S-MeCysnor-c-Sta-i nponиловый ЗФир.

По методике получения и очистки продукта примера 15 В 9 мг пог-с- Sta-изопропилового эфира и 170 мг про дукта примера $Ь С дают 178 мг бесцветного порошка, ТСХ RJ 0,83 в системе С, ВЭЖХ ,1б мин в смеси 70:30 ацетонитрил:фосфат, рН 2,1.

НЯМР, О5С13, 250 мГц, частичный, Л, мд: 0,83 (и., itH); 1,26 и 1,27 (д., ЗН кажд.); 2,13 (с., ЗЮ; 2,76 и 3,11 (дд., 1Н кэжд.); 3,39 (м., М-0; 3,70 (м., АН); Ц,08 (шир., 1Н); 5 14,28 (м., 1Н); Ц,И (м., 2Н); «4,82; 6,83 и 6,93 (д., 1Н кажд.); 5,С4 (септет, 1Н).

Полученную смесь концентрируют и несколько раз упаривают вместе с прос тым эфиром с выходом 50 г названного продукта в виде бесцветного твердого вещества, время удержания при ВЭЖХ 3,05 мин, в MeCN (рН 7,0) 01 М фосфатном буфере.

С. Вое PheHisCim Boc)nor-с-StaNHC

Раствор продукта из приготовления 1 В мг) и 0,5 мкл дихлорметана обрабатывают при U°C 30 мкл триэтиламина, 112 мг BocPheHis(im-Boc),

0

5

8 иг оксибенэотриазола и 6 мг ди циклогексилкарбодиимида соответствен но полученную смесь перемешивают при i)5C в течение 6 ч, а затем на:-рева- ют до 25 С в течение номи. Смесь отфильтровывают, преципитат промывают дихлорметаном, объединенные фильтраты концентрируют и растворяют в этил ацетате. После перемешивания в течение нескольких минут полученную суспензию в этилацетате фильтруют, а а фильтрат промывают 1 н, гидроокисью натрия (дважды), высушивают над сульфатом магния и концентрируют. При хроматографии на двуокиси кремния пр элюировании в этанол-дихлорметане со следующим постепенным повышением полярности (1, 2, k, 6 и 10%-ный эта- нол) получают 57 мг названного пеп- тида в виде бесцветного аморфного твердого вещества.

D. Вое PheHisnor-c-StaNHCH.

Продукт из примера приготовления 1 С растворяют в смеси уксусная кис- лота:вода 80:20 (об/об) и перемешивают при 25 С в течение 12 ч. Полученную- смесь концентрируют, три раза упаривают вместе с простым эфиром и дважды с дихлорметаном с получением 7 мг названного продукта в виде светло-коричневого порошка.

ВЗКХ: в 50:-С MeCN (рН 2, 1), 0,1 М фосфата, tyg 3,61 .

|ЙЯМР, DMSO, 300 мГц, частичное, Ь, ч/млн: 1,32 (с., 9Н, Вое); 2,60 (д., ЗН, NCHj); 3,90; 66 и 7,3 (м., 1Н еа); Ц,18 (м., 2Н); 7,12; 7,7; 8,28 (д., 1Н еа); 7,32 (с., 1Н); 7,2-7 Л (и., аромати.).

Пример приготовления 2.

Сложный метиловый эфир индол-2- карбонил His-nor-c-Sta (П,К --имида- зол- -илметил, R ОСН}ги L СН).

А. Простой эфир -циклогексил- 2-пентил-1-илпетрагидропиран-1-ила.

192 г пропаргилтетрагидропира илового эфира и 750. ил сухого тет- рагидрофурана (с золотой этикеткой Aldrich) загружают в 5 л простери- эованную, трехгорловую колбу с лым дном, оснащенную механической мешалкой, термометром, капающей воронкой и отверстием для азота. Пере- мешанный раствор выдерживают при 0°С не Сане с сухим льдом и ацетоном, одновременно прибавляя в течение ми мл 2,5 М н-бутиллития. К полученному темному раствору прибавляют

рлглвоо vз иик/югексилметилЬ ооми а в r-рчсаметчл ОСФ р миде 1пнстиллирп- ваннсго |чз гидрида кальция при пониженном давлении) в течение Г мин при и продолжают перемешиваО

0

5

0

5

0

0

5

ние ч гри 25°С. Указанный смешанный раствор выливают в перемешанную смесь из 2 л гексана. Органический слой промывают раствором мл 1,0 М хлористого лития, высушивают сульфатом натрия, концентрируют и перегоняют в 20,3 см колонке Vigreux с получением 1П2 г тетрагидропиранис левого эфира пропаргила, т.кип. 90°С с последующим выходом названного продукта, т.кипения 125-13 С/ 0,5 мм рт.ст., ТСХ: RI 0,5 в системе В 1:А.

В. -Циклогексил-2-бутин-1-ол. 1М г продукта, полученного по примеру приготовления 2 А, и 700 мл метанола загружает в 2-литровую трех- горлую колбу, оснащенную механической мешалкой, впускным отверстием для азота и термометром.Перемешанную смесь охлаждают до 2-3°С и прибавляют 560 мг пара-толуслсульфскислоты, после чего охлаждающую ванну заменяют -на ванну с теплей водой для повышения температуры реакции до . Чеаез ,5 u .-ют 5 мл раствора 2 н гидроокиси натрия и уделяют большую часть метанола при пониженном давлении в роторном испарителе. Образовавшийся осадок растворяют в 700 мл гексана и промывают раствором 1 н.гидроокиси натрия ( мл), выт сушиваот карбонатом калия, фильтруют, концентрируют и отгоняют из карбоната калия в 20,3 см колонке Vigreux с получением 76 г продукта с т.кип. 90°С/ 1 мм рт.ст. в виде светло-желтой жидкости, загрязненную, как уста5 новлено, при ЯМР 1%-ным метанолом и 1%-ным гексаметилфосфорамидом. Указанный продукт используют на следующей стадии синтеза без дополнительной очистки.

ТСХ: RJ П,5, система В 1:1. Найдено,%: С 78,90; Н 10,59.

Вычислено,%: С 87,31; Н 10,72.

С. г- -Циклогексил-2-бутен-1 -ол.

В 5РР мл склянку Парра загружают 35,2 г продукт приготовления 2 В, 250 мл толуола, 250 мг к$твлитическо- ГО яда Undlaf Catalyst Poisort (Flu ka). В Полученный раствор вводят

азот и 1,8 г катализатора Lindlar (aldrich).

Смесь интенсивно встряхивают при давлении водорода 2,6 кг/см2 в течение k5 мин, во время которых реакционная температура спонтанно повышается до примерно 5°С. Охлажденную суспензию фильтруют через цеолит и объединяют с другой реакционной смесью, полученной аналогичным способом из еще 35,2 г того же исходного материала. Соединенную смесь концентрируют при перегонке при атмосферном давлении из карбоната кальция через 30,5 см колонку Vigreux, затэм в роторном испарителе при давлении аспиратора и 25° С с последующим нагреванием при 80 С при 0,3 мм в той же самой склянке, оснащенной колонкой Vip.reux, пока не достигнут мягкого орошения. Оставшаяся жидкость в виде светло-желтого масла весит 77, г и как вытекает из данных ЯМР, загрязнена % метанола и 1% гексаме- тилфосфорамида. При ТСХ: R П,, система В 1:1, указанный продукт показывает единичное пятно и при ЯМР не обнаружено никакого детектируемого трансизомера.

D. 2(5), 3(К)-Эпокси- -циклогек- сил-1-бутанол.

В 1-литровую трехгорлую колбу, оснащенную термометром, механической мешалкой, впускным отверстием для.1 азота и охлаждающей баней, загружают 1 5 г А ° 600 меш молекулярных сит, 00 мл дихлорметана и 7,23 мл (+) ди- изопропил L-тартрата (Aldrich). Перемешанную смесь охлаждают до -5°С и прибавляют 6,75 мл тетраизо- пропоксида титана с последующим добавлением 227 мл 3,0 М трет-бутилгид- ропероксида в толуоле (Aldrich), при этом ни один из них не произвел заметного экзотермического эффекта. К перемешанной смеси при -2С°С прибавляют раствор, содержащий 70 г продукта приготовления 2 С в 30 мл дихлорметана в течение 10 мин, так чтобы температура удерживалась примерно при -2С°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 6 ч при -10°С, а затем помещают (без перемешивания) в холодильник (-11)°С) на 60 ч. Смесь опять перемешивают в ледяной бане, прибавляют 120 мл воды с последующим введением 30 мл 6 н, раствора гидроокиси натрия и насыщают хлорисi1

тым натрием. Затем прибавляют метанол, фильтруют, обрабатывают 100мл 0,1 М фосфатного буфера, рН 7, и пос- ле сильного встряхивания выдерживают, пока не произойдет частичное разделение. Отделяют нижний (органи-. ческий) слой, а верхний (водный) и средний (эмульсия) слои экстрагируют дихпорметаном ( мл). Оставшуюся эмульсию (средний слой) фильтруют через целит, в результате чего происходит ее полное выделение в органический и водный слой. Объединенные органические слои промывают фосфатным буфером, рН 7 ( мл), водным раствором бикарбоната, раствором соли, высушивают (сульфатом магния), фильтруют и концентрируют с получени- 0 ем 85 мг вязкого масла, которое отгоняют в 20,3 см колонке Vidreux с выходом 12 г продукта т.кип. 60-122°С/ 0,5 мм рт.ст., а затем 51 г названного вещества, т.кип. 22-130°С/ 5 /0, мм рт.ст., ТСХ R/ 0,20, система В, 2:1.

Вычислено.: С 70,55, Н 10,66 Найдено,: С 69,89, Н 10,50. Е. 2(8), 3(К)-Эпокси- -циклогек- 0 сил-1-бутановая кислота.

3 г продукта приготовления 2 Д растворяют в ацетонитриле (30 мл) и л последовательно прибавляют 5 мл воды; 30 мл тетрахлорметана, 690 мг три- гидрата треххлористого рутения и 10,0 г исходной кислоты. Температуру реакционной смеси постепенно повышают, но удерживают ее при 30-35 С охлаждением в мягких условиях. Через 1,5 ч добавляют 75 мл раствора соли и 00 мл хлороформа. Органический слой отделяют, а водный слой трижды экстрагируют хлороформом (00 мл). Объединенные органические слои про- 5 мывают 50 мл 2 н.НС1, насыщенной хлористым натрием, высушивают (сульфатом магния), фильтруют через целит и концентрируют с получением 2,55 г названного соединения в виде вещества пурпурного цвета в результате ТСХ: RJ 0,0 система В, которое используют без очистки на следующей стадии синтеза.

F. 3(5)Азидо-2-(К)-окси- -цикло- гексилмасляная кислота.

Продукт приготовления 2 Е (2,65 г) растворяют в 10 мл абсолютного этано- ла и вводят при 25°С в смешивающийся , раствор, содержащий ..,11 г азида

5

0

0

5

лития и 6,3 мл тетраизопропилата титана в 1Й1) ил абсолютного этзнога. Реакционную смесь перемешивают в теме ние 20 м при 25 С, затем 5 ч при 35 С и 1 ч при 7.5° С, после чего концентрируют, растворяют в смеси из Х51 мл простого эфира и /5 мл серной кислоты, перемешивают У м.ин и разделяют. Полученный органический слой промывают . серной кислотой ( мл), фосфатным буфером, рН 7 .(дважды), высушивают (сульфатом мзг- (ния) и концентрируют с получением Г, 82 г рыжевато-коричневого масла, которое кристаллизуется при хранении. Указанный продукт показывает ррга ТСХ: Ri 0,35 (система С) и ИК-спектр

(СНС1

: К, С1Я):

2100 см

(

G. Сложный метиловый эфир 3(s)- азидо-2 (к)-окси-г4-циклогексилмасля- ной кислоты.

Лиазаметан получают путем обработки ,5 г М - нитрозо-1;-метилнитро- гуанидина в 75 мл простого эфира раствором, содержащим 31 мл 6 н. гид оксида натрия, при О С с последующим декантированием и непродолжительным высушиванием органического слоя 5 г КОН. Указанный раствор помещают в капельную воронку и вводят по каплям в перемешанный оаст-зор, содержащий 2,82 г продукт при.-отселения 2 и 5 мл простого , при Г°С. Через м;-н прибгзвл.-от 21 мл уксусной кислоты, а затем реакционную смесь экстрагируют насыщенным бикарбонатом натрия ( мл), раствором гидроокиси натрия ( мл), высушивают (сул фатом натрия), фильтруют и хроматог- рафируют на двуокиси кремния с элюи- ровэн.-ем смесью этилацетат:гексан 1:8, 2,3 г.вещества получает при кон центрировании соответствующих фракций.

ТСХ: R.J. 0,58, система Л, 1:1 ИК (СНС13) Xl- iS- , + 10,1 (с- 1,19, СНС13).

Н. .Хлоргидрзт сложного метилового эфира 3(S)-амино-2-(R)-окси-А-цик логексилмасляной кислоты.

Продукт приготовления 2 G (2,23 г) интенсивно перемешивают с 100 мг 10%-ного Pd/C в 15 мл этанола л Oj мл уксусной кислоты при давлении водорода 3,515 кг/см2 в течение 0 мин при 25°С. Полученную смесь фильтруют через целит, концентрируют, упаривают вместе с толуолом

(.1 1 . мл , растворяет в мл смеси 3,- М хлооигтыГ- р.о,-,..-рс,г лнскг ли , кон центрирует ие сколь ко Р-ЭЗ вместе с простым эсером с гогуч- нисм маслянистей светло-желтой пены, ТСХ: R- П ,15, разделительную пластину выдерживают п парах аммиака до элЮиоов-дния в системе С.

I. Сложный метиловый эфир индол-2- карбонилгистидина.

5,5 г дихлорида сложного метилового эфира гистидина суспендируют в мл дихлорметана и очищают при

Oj C 6-,92 мл триэтиламина с последующей последовательной обработкой: суспензии k,2 г индол-2-карбоновой кислоты, 5,56 г оксибензотриазола и 5,35 г дициклогексилкарбоимидэ.

Смесь перемешивают в ледяной бане и дают нагреться до 25°С в течение ночи Реакционную смесь фильтруют, преципитат промывает дихлорметаном, фигьтрат концентрируют, осадок растворяют в

200 мл хлороформа и экстрагируют

1 н. NaOH (хЗ мл), раствором соли, еысуи ивают (сульфатом натрия,) и концентрируют с выходом 7,2 г желтой nenti. Эту пену растворяют в смеси из

5 мл хлороформа, а затем рН я°водят до 6 раствором гидроокиси ндтрия. Смесь концентрируют и рысушив :-ст с выходом светло-желтого твердого вещества с временем -удержания ,6 мин.

ТСХ в МеСУ - i,1 М фосфатом буфере, . рН 2,1, 35:65 ($5/- от полного поглощения) с незначительным загрязнением при 2,36 и 1,66 мин. ТСХ: К . в систе- С составлял 0,07. Полученный продукт

применяют на следующей стадии синтеза без дополнительной очистки.

J . N-L- (Индол-2-карбо -|ил) -N( its) - трет-бутоксикгрбонил-1-гистидин.

г 3 г продукта приготовления 2 J растворяют в 60 мл метэнола и 2П кл воды, охлаждают до и обрабатывают 7,6 г безводного карбоната калия. Через 1 ч при °С смесь доводят до 25°С в течение 2 ч, затем охлаждают доводят до рН 3 6 н.соляной кислотой, концентрируют, охлаждают до О0С, доводят до рН 1),5 6 н, раствором гидрооки- си натрия, обрабатывают 150 мл диок- сана и прибавляют h,2 мл ди-трет-бутилкарбоната (Вое)20 при G°C. Затем реакционной смеси даст смещаться при 25°С при добавлении раствора 6 н,гидроокиси натрия поддерживают рН в ин

Ь91706391

тервале между . Через 75 мин прибавляют еще 2 мл (Вое) , и через 15 мин смесь концентрируют для удаления большей части диоксана, вводят 100 ил воды и полученный раствор промывают трижды простым эфиром (25 мл каждый). Водный слой охлаждают в ледяной бане, прибавляют 51) мл этил- ацетата И рН вОДНОГО СЛОЯ ДОвОДЯТJQ

до 1,3 6 н. соляной кислотой. Органический слой отделяет, водный слой экстрагируют этилацетатом, органические слои объединяет, промывают раство60

остаток выпаривают с эфиром, получ 60 мг белого порошка, ТСХ R{ U,2S в системе С (веи ество обрабатывают

/триэтиламином в дихлорметане и зат переносят на пластинки для ТСХ),

.05 миув, ...50 ацетон

,Јил:буфер, рН 2,1-,

|ИЯМР, DMSO, мГц., частичны Д мд.: 1,20 (перекрывающийся, д. 6Н),: 2,11 (с., ЗН); 2,55; Z,fr2{ 2,93 и 3.-18 (дд., 1Н кажд.); ,01 ,08; ,23 и ,57 (и., 1Н кажд.); 7,3 (с., ароматический); 5,38; 7

ром соли, высушивают (сульфатом нат- 15 и 8,89 (д., 1Н кажд.); 8,18 (шир. рия), фильтруют и концентрируют сЗН). выходом 3,1 г вещества в виде сухого желтого порошка ВЗЖХ в МеСМ: 0,1 Н фосфатном буфере, рН 2,1, 5С:50, при времени удерживания ,57 мин (93% от всей ИК-интеграции) и П( + Ю,5 (с 0,88, СНСЦ).

К. Сложный метиловый эфир 2-карбо« нил His(im Вое) норциклоостатина.

20

Пример приготовления . Сложны иэопропиловый эфир морфолинокарбо Phesernor-c-Sta (1tZ - морфолинока ниламино, М - фенил, Q - Н, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z

согсн(сн)2).

А. Морфолинокарбонил РЬоЕ-сукц имид.

Согласно методике приготовления 25 и очистки продукта приготовления 1 С, 500 мг продукта по приготовлению 2 Н объединяют в 25 мл дихлорме- тана с 911 мг продукта примера 3 с выходом 550 мг названного вещества, JQ ТСХ: RJ 0,58, система С. Кроме того, присутствует второстепенный компонент

Rf 0,55.

L. Метиловый эфир индол-2-карОо- нил His норциклостатина.

К раствору 25 г морфол Phe и 15,5 г М-гидроксису в 800 мл СНгС1г прибавляю После перемешивания в теч при комнатной температуре промывают дважды 200 мл н раствора NaHCO, сушат в MgS04, фильтруют и концен вакууме, получая при этом го продукта в виде белого

-. I vj yk wiwjir 1 T€ ЛЭ

Продукт приготовления 2 К (55 мг) 5ЯМР (300 мГц, О)С13)Д

перемешивают р 10 мл смеси уксусная кислота:вода 5:1 в течение 16 ч при 2$°С, концентрируют,несколько раз упаривают совместно с эфиром и высушивает с выходом Ol мг бледно-желтого порсмл- ка, ВЭЖХ в ацетонитрил: 0,1 М фос.фат- ном буфере, 0:60, рН 2,1 показывает время удерживания 5,53 (39%) и 6,3 (58%) мин.

ЯМР, DMCO, частичное,Д, ч/млн: 2,9 (м.), 3,53 (с. ЗН, ОСН3); 1,02; ,18; 46 (м.); 6,80 (с., 1Н); 6,96-7,6 (ароматич.м.); 7,0 (т.); 7Л (л.); 7,6 (д.).

Припер приготовления 3Phe-S-MeCys nor-c-Sta-i пропило- вый эфир (1,Z - N-Hr, М - фенил, Q-H Rz - , X - циклогексил, - CH/III/OH, 7/ - СОС/СН(СН3)г) .

Продукт примера 15 В (50С мг)

(м., ); 1|,81 (д., 8 Гц) (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонил P

Ю

Раствор С,50 г морфоли PheOSue в 5 мл тетрагидро бавляют к раствору 0,30 г 10 мл насыщенного раствор полученную смесь перемеши 45 ние 15 мин. Реакционную с ляют Зп мл 0,1 н. раствор промывают три раза 0 мл Водную фазу подкисляют ко ванной НС1 и экстрагирую 65 мл EtOAc. Объединенные сушат в присутствии сульф фильтруют и концентрируют нием 0,0 г сырого продук используют без дальнейшей

ЯМР (ЗСО мГц, CDC10 Л 2Н); Ь,25 (м-., 1Н); 1,37

50

55

растворяют в 3 мл смеси k н. НС1-ди- оксан и перемешивают при 25 С в течение bft мин. Смесь концентрируют и

60

остаток выпаривают с эфиром, получая 60 мг белого порошка, ТСХ R{ U,2S в системе С (веи ество обрабатывают

/триэтиламином в дихлорметане и затем переносят на пластинки для ТСХ),

.05 миув, ...50 ацетонит,Јил:буфер, рН 2,1-,

|ИЯМР, DMSO, мГц., частичный, Д мд.: 1,20 (перекрывающийся, д.,, 6Н),: 2,11 (с., ЗН); 2,55; Z,fr2{ 2,93 и 3.-18 (дд., 1Н кажд.); ,01; ,08; ,23 и ,57 (и., 1Н кажд.); 7,3 (с., ароматический); 5,38; 7,96

и 8,89 (д., 1Н кажд.); 8,18 (шир. ЗН).

и 8,89 (д., 1Н кажд.); 8,18 (шир. ЗН).

Пример приготовления . Сложный иэопропиловый эфир морфолинокарбонил Phesernor-c-Sta (1tZ - морфолинокарбо- ниламино, М - фенил, Q - Н, R -HOCHj- X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z согсн(сн)2).

А. Морфолинокарбонил РЬоЕ-сукц ин- имид.

К раствору 25 г морфолинкарбонил Phe и 15,5 г М-гидроксисукцинимида в 800 мл СНгС1г прибавляют 19 г ДЭК. После перемешивания в течение 20 ч при комнатной температуре раствор промывают дважды 200 мл насыщенного раствора NaHCO, сушат в присутствии MgS04, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом 29 г сырого продукта в виде белого твердого

ЯМР (300 мГц, О)С13)Д

2,78

(м., ); 1|,81 (д., 8 Гц); 5,09 (м., 1Н).

В. Морфолинокарбонил PheSer.

Раствор С,50 г морфолинокарбониц PheOSue в 5 мл тетрагидрофурана прибавляют к раствору 0,30 г серина в 10 мл насыщенного раствора NaHCOj, полученную смесь перемешивают в тече- ние 15 мин. Реакционную смесь разбавляют Зп мл 0,1 н. раствора NaOH и промывают три раза 0 мл . Водную фазу подкисляют концентрированной НС1 и экстрагируют шесть раз 65 мл EtOAc. Объединенные экстракты сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют и концентрируют с получением 0,0 г сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (ЗСО мГц, CDC10 Л : 3,66 (м., 2Н); Ь,25 (м-., 1Н); 1,37 (м., 1Н).

Пример приготовления 5. Сложный изобутиловый эфир Морфолинокарбонил PheS-MeCys-nor-c-Sta (1 ,Z морфолино

карбониламино, м -фенил, Q- H, R - СН ,,(Ј, X - циклог-ексил: V - СИ.. HI/O и г -С СН СН г).

А. Сложный изобутиловый эфир nor- фенил Sta.

Раствор М-Вос-2(К)-гидрокси-3(s)- амино- -фенилбутанитрилэ (1, 1 г) в ЬО мл изобутилового спирта насыщают безводным раствором НС1 и перемешива- ют при комнатной температуре в тече ние А8 ч. Раствор концентрируют и остаток разбавляют 1011 мл 0,1 н .раствора НС1. После перемешивания в течение 15 мин раствор промывают дваж- ды 1СП мл простого эфира.

Водную фазу делает основной и экстрагируют два раза 10 П мл ЕсОАс. Объединенные экстракты сушат, фильтруют и концентрируют в вакууме с по- лучением 0,3 г сырого продукта, который используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, CDCljH : Л,93 (д., J 6 Гц, ЗН); 3,3 (м., 1Н); 3,97 (м., 2Н); М7 (д., J 3 Гц, 1Н).

В. Сложный изобутиловый эфир пог- c-Sta.

Смесь 95 мг nor-PhStaOiBu и 190 мг 10%-ного Ph/C в 5 мл Me ОН гидрируют при давлении 5) Фунтов на кв. дюйм (3,5155 кг/см- -) в течение 3& u Смесь фильтруют через целит и концентрируют. Остаток растворяют в 50 мл П,1 н.раствора НС1 и промывают дважды 50 мл простого эфира. Водную фазу делают основной и экстрагируют два раза 51 мл EtOAc. Объединенные экстракты сушат в присутствии MgS04, фильтруют и концентрируют с получением Ik мг сырого продукта, который использует без дальнейшей очистки.v

ЯМР (300 мГц, СРС1 3) U : 0,92 (д., J 6 Гц, ЗН); Ч; 3 (и., 2Н).

Пример приготовления 6. Морфоли- нокарбонил PheNlenor-c-статол (1,Z- морфолинокарбонмламино, М - фенил, Q - Н, RЈ - н-бутил, X - циклогексил, W - CH/III/OH, Z - )

А. 3(5)-Амино-2(R)-бензилокси- - циклогексил-1-бутанол.

3(5)-т-Бутоксикарбониламино-2-(R)- бензилокси- -циклогексил-1-бутанол (108 мг) растворяют в 0,5 мл эфира и охлаждают до Г С. В раствор вводят избыток безводного НС1 и раствор перемешивают при 25°С в течение 2 ч и концентрируют, получая 88 мг бесцветного твердого вещества, ТСХ Р. г 0,;. 8 в системе А.

В. 3 (S ) -Моофолинокэгбонил I heMe амино-2 (R)-бензилокси- -циклогексил- 1-бутзнол.

Пр-одукт приготовления 6 А (85 мг) растворяют в мл диметоксиэтана и обрабатывают последовательно при 0°С 38 мкл триэтиламина и 13 мг продукта приготовления 7 С. Через 18 ч смесь концентрируют и хроматог- рафируют на двуокиси кремния (этил- ацетатгексаны), получая 139 мг бес- цвет ного твердого вещества, ТСХ Rr 0,25 (этилацетат-двуокись кремния).

С. Морфолинокарбонил PheNlenor- с-статол.

Продукт приготовления 6 В (80 мг) и 90 мг 10%-ной Рс /С смешивают в 5 мл метанола и 5 мл уксусной кислоты и встряхивают при давлении водорода 8 фунтов на кв.дюйм ( атм) и 25°С в течение 21 ч. Смесь концентрируют и остаток хроматографирую на двуокиси кремния (градиент этэно- ла-дихлоометана), получая 6 мг бесцветного твердого вещества, ТСХ R 0,5 в системе С, ВЗЖХ: 4,95 мин в смси 50:5П ацетонитрил:вода.

НЯМР, СРС1 ,, / 50 МГц, частичный,

и м.д: О,, (т., ЗЮ; 1,9 (л-д.. 1Н 3,05-3, :; (п-нрекрыаан: ийср, м.); ,1 ,3/ (м., гоибл., ЗН); Ь,9; 6,28 и 6,93 (д., 1Н ка«д. ); 7,20-7,8 (м., ароматический).

Пример приготовления /. Морфолинокарбонил PheNlenor-c-Sta метокси- амид (1,Z - морфолинокарбониламино, М - фенил, Q - H,R -н-бутил, X - цилогексил, w - CH/III/OH, г - caNHQCH

А. Вое-nor-c-Sta-метоксиамид.

По методике получения продукта приготовления 1 С 5 мг метоксиами- на-гидрохлорида и 98 мг Вос-пог-с- Sta (продукт примера 1 С) получают 102 мг сырого продукта, который очищают на двуокиси кремния (этил- ацетдт-гексаны) , получая iiO мг целевого продукта.

В. Nor-c-Sta-метоксиамид-гидро- ллорид.

Продукт приготовления / А (38 мг) перемешивают в У. мл смеси k н. НС1- диоксан при 25 С в течение 1,2 ч и концентрируют до бесцветного твердого вещества, которое трижды промыва1 ют эфиром, получая 25 мг твердого вещества.

15

С. Эфир морфолинокарбонил PheNleuN- оксисукцинимида.

Продукт примера 2 А (1,05 г) растворяют в 5 мл диметоксиэтана и обрабатывают при ()°С 350 мг Н-оксисукцин имида и 573 мг дициклогексилкарбоди- имида и перемешивают в течение ночи на ледяной бане, которая постепенно нагревается до 18°С. Смесь фильтруют. JQ отфильтрованное твердое вещество про- мывают диметоксиэтаном, фильтраты кон- центрируют и остаток суспендируют в этилацетате. Суспензию этилацетата промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, соляным раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 960 мг бесцветной пены.

Пример приготовления 8. Сложный изопропиловый эфир Морфолинокарбонил Tyrs-MeCys nor-c-Sta (1,Z - морфолино карбониламино, М - п-гидроксифенил, Q Н, RЈ - CHjCH-, X - циклогексил, W - CH/III/OH, -7. - С02СН(СН,)г) . А. Сложный изопропиловый эфир Bocs-MeCys nor-c-Sta.

Boc-tleCys (1,1 г) подвергают взаимодействию с nor-c-Sta, используя методику ДЭК, как описано в примере 30 З1, с получением 1,8 г сырого материала, который используют без дальней- шей очистки.

ЯМР (300 МГц, СОС1Э) : 1,25 . (J - П,6 Гц, 6К); 1,3 (с., 9Н); 2, И (с., ЗН); «,П8 (м., 1Н); «4,143 (м., 1Н); 4,9в (м., 1Н).

В. Хлоргидрат сложного иэопропило20

25

35

Пример приготовления 9. Сложный пиперидинокарбонил Phe S-MeCysnor- c-Sta-изопропиловый эфир (1,2 - пипе ридинокарбониламино, М - фения,Q -H

вого эфира S-MeCys nor-c-Sta. .. .

Bocs-MeQys-nor-c-StaOiPr (0, г) до ( х циклогексил, W - разблокируют, используя НС1 в диокса- CH/III/pH иг - COtCH(CH5)z) . не, как описано в примере , с получением 0,38 г сырой соли, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d6) Д : 1,19 45 (д,, J - 6 Гц, ЗН); 1,20 (д., J - - 6 Гц, ЗН); 2,16 (с.,. ЗН); 3,95 (м., 1Н); 1,20 (м., 1Н); «,83 (м., 1Н).

С. Морфолинокарбонил 0-бензил Тут. JQ

К раствору 0,5 г 0-бензил Туг в 20 мл диоксана и 5 мл 2 н. раствора NaOH прибавляют 0,31 г морфолинокар- бонилхлорида, и полученную сиесь пере мешивают при комнатной температуре ,, в течение ночи. Раствор концентрируют и остаток разбавляют 200 мл воды и промывают дважды .00 мл простого эфира. Водную фазу подкисляют и экстраА. Сложный пиперидинокарбонил Phe бензилоеый эфир.

Продукт примера 1 А (1 , г) раст воряют в 13 ил дихлорметана и обраба тывают 0,61 мл пиперидина при 0°С. Через 15 мин прибавляют 0,1 мл пипе ридина и раствор упаривают и оста/то .хроматографируот на кремнеземе, элюи руя смесью этилацетатгексян с получением 1,61 г бесцветного масла. R/ ТСХ (тонкослойной хроматографии) 0,36 при 1:1 системы 1.

В. Пиперидинокарбонил Phe.

Продукт приготовления 9 А (1,6 г растворяют в.50 мл смеси 10:1 мета- нол:уксусная кислота и встряхивают с 0,6 г 10 -ного палладиевого-уголь ного (Pd/C) кятализатора при давле5

0

0

5

5

гируют дважды 200 мл CHClj. Объединенные экстракты сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют и концентрируют с получением 0,18 г сырого продукта, который используют без даль нейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d6) Д : 4,13 (м., 1Н); 5,01 (с., 2Н).

Д. Морфолинокарбонил Туг.

Смесь 0,18 г морфолинокарбонил 0-бензил Jyr .и 0,18 г 10 -ного палла- диевого угля в 20 мл ТеОН гидрируют под давлением 50 фунтов на кв.дюйм (3,5155 кг/см2) в течение 18 ч. Смесь фильтруют через целит и концентрируют с получением 0, г сырой кислоты, которую используют без дальнейшей очистки.

ЯМР (300 мГц, DMCO-d6) & : b,Qb (м., 1Н); 6,58 (д., J - 8 Гц, 2Н); 6,95 (д., J - 8 Гц, 2Н).

Е. Сложный изопропиловый эфир морфолинокарбонил Туг MeCys nor-c-Sta.

Морфолинокарбонил Туг (0,13 г) подвергают взаимодействию с 0,27 г HClS-MeCys-nor-c-StaOiPr., используя стандартную реакцию ДЭК (пример 21). Сырой продукт ,хроматографируют (9:1 CHaCl MeOH) с получением 0,15 г чистого продукта.

ЯМР (300 мГц, CDClj) Д : 1, (д.,, J 6 Гц, ЗН); 1 ,26 (д., J - - 6 Гц, ЗН); (м., ЗН); 5,02 (м., 1Н).

Пример приготовления 9. Сложный пиперидинокарбонил Phe S-MeCysnor- c-Sta-изопропиловый эфир (1,2 - пипе- ридинокарбониламино, М - фения,Q -H,

о ( х циклогексил, W - CH/III/pH иг - COtCH(CH5)z) .

( х циклогексил, W - CH/III/pH иг - COtCH(CH5)z) .

А. Сложный пиперидинокарбонил Phe бензилоеый эфир.

Продукт примера 1 А (1 , г) растворяют в 13 ил дихлорметана и обрабатывают 0,61 мл пиперидина при 0°С. Через 15 мин прибавляют 0,1 мл пиперидина и раствор упаривают и оста/ток .хроматографируот на кремнеземе, элюи руя смесью этилацетатгексян с получением 1,61 г бесцветного масла. R/ ТСХ (тонкослойной хроматографии) 0,36 при 1:1 системы 1.

В. Пиперидинокарбонил Phe.

Продукт приготовления 9 А (1,6 г) растворяют в.50 мл смеси 10:1 мета- нол:уксусная кислота и встряхивают с 0,6 г 10 -ного палладиевого-уголь- ного (Pd/C) кятализатора при давле

нии водорода 50 Фунтов на кв. длим (3,5155 кг/см2) и температуре 25С С в течение 30 мин. Смесь фильтруют через целит, фильтрат упаривают и остаток совместно упаривают вначале с добавленным толуолом, а затем с эфиром, получая 1,17 г бесцветной пены, ТСХ, R Л,5 в системе С.

С. Сложный Бос S-MeCys nor-c-Sta- изопропиловый эфир.

В соответствии с методикой получения и очистки продукта примере 15 В 900 мг сложного nor-c-Sta изопропило- вого эфира и 871 мг Bos З-метил-L- цистеина дают 1,0 г бесцветного порошка, R ТСХ 0,1. при 1:1, системы А.

D. Гидрохлорид S-MeCys nor-c-Sta- изопропилового эфира.

Продукт приготовления 9 С (1,03 г) растворяют в 6 мл k н. растворе НС1-диоксан , перемешивают 5 мин при 25°С и концентрируют с получением 998 мг бесцветного твердого тела, R ТСХ 0,8 в системе С.

Е. Сложный пигюридинокарбонил Phe S-McCys nor-c- ta изопропиловый .

В соответствии с методикой полуме- ния и очистки продукта примера 15 В, за исключением того, что триэтиламин используют дл ней тозпизации хлор- г дрита амина, 13 г продукта приготовления 9 Л и V мг продукта г приготовления 9 R 117 мг бесцветного твердого тел-т, R- ТСХ П,Н

f этилацетат-крем езем.) .

(VlSMP, CDC1з, 5- мГц, частичный, Л ррпк 1,27 и 1,29 (л., ЗН кажд.);.Q 2,VB (с., ЗН); 2,75; 2,92; 3,13 и 3,31 (д.д. , 1Н ..); 3,2С (м.); 4,11 (с., 2Н); 433 (58 (м.); ,72 и 6,90 (л., 1Н кажд.); 5,09 (септет, 1Н); 7,,;4 (м., аромати- д, ческий).

Биологическая Јктизность соединений, полученных в условиях предлагаеого способа, в качестве ингибитоов ангиотензг н - р а еще пляющего действия ренина определяется при исследовании их способности ингибировать ан- гиотензиногенрасцепляющую активность человеческого ренина в опытах in vit- ro.

Результаты испытаний приведены в таблице.

Из данных таблицы видно, что предагаемые соединения превосходят из50

5

10

.,.

25

д

35

.Q д,

50

вестнле соединение Sir-Pro-Pho-hiр- St ,eu-Phe-NH по ре ичинги рг У ОШРи активности (JCi;c ,1) ). Кроме того, они имеют белес- простое строение, чем известное соединение, т.е. они более доступны.

Предлагаемые соединения могут быть отнесены к категории малотоксичных соединений.

Формула изобретения

Способ получения норстатин и нор- циклостатинсодержащих пептидов формулы

Л Q о х :

-N С. НА

% WI О хЧп

z

Нг

1

где Z - группа ) - (д). ; Y - А - NH; га и ,

Q - Н,

Rl )-алкокси, карбокси (С,-С4)-алкил, морфолино, оксипиперидино, пиперазино, г -oкcoпипepv1динoэтилe кe - таль, -оксопипегидино, 4- (С -Cq.) -а ям ок с;-карбон ил пипе- разино, пиридил, (С -Сз -алк- оксикарбснил(S)-пирролид-2- ил;

И - фенил, -метоксифенил, (СьС 7)циклозлкил;

R2 (С,-С5-)-алкип, (С.-Сз)алкил- тио(С,-С2)-алкил, (С,-С3)- элкокси (С,-С2)-алкил, карба- моил (С,-С2)-алкил; X - циклогексил; Z,- R - S - Т, О где R - -Ј-, s 0 NH химицеская

связь, соединяющая R и Т;

Т - -С,-С -алкил, бензил;

W - CH/III/OH,

отличающийся тем, что осуществляют дегидгатирное сочетание соединений формул

(и) (пг)

У fx

Z-K С(Н и (;H w z4

Г

м

н

I

если к -Г.Н, то Р (H-CON

fci

671706391 68 -.м Г Н при этом функциональные группы, не

г п „ /-1-эа вовлеченные в реакцию, могут быть или если K-CHCON-gJ -. тс Р - простая блокированы с слДе

связь,

необходимости, селективным отщеплени

необходимости, селективным от

эначения Z,.Z и w имеют указанные 5 ем защищающих групп, значения,

- мигн6 руем (JCct еовлжввниЛ, попучвммыя спо«йо, )« t

Лf f

..............«i,.......,.....:........,........

.-.. „r3t

jjiyV . -|--;;----y- Ґ---1--;----i-i-------

i::::i::: :: :i:::::i::::;:::::::::i:i:::;::i:i:::3::::iiz:i:ir

t(te on««o- taHHK tV, СИ/II I/OH OOOCH, ««« (tat в/н

i------.Г-.j,,,

необходимости, селективным отщеплением защищающих групп,

м-Syrnfl (t«

.«,.

.«о- ммг

ИврбОММЛ

м-Пропил

Нор оляно- И о«еи- « рвоиил- «ммл

ся.вся,

и-SyTnn- t,

)ivw on -ил«тил

M-Sym/l С4

и-Ьх И С4

CfljOCjH,

12 OQN-CNH .«.

M-ljr

(mff&xm

v-r NH ««

Г° - VNH.

0

HoONct

y

oO °

NH I NH

oQNcf

NH

C4,SCIIt

ея,9оц

,

СЯ,9СЯ|

СЯ,СИГСВ,),

сн(ся,),

ся,яси,

и-С, и-С,

.и. ..,

ODKBCH,.«

ся/Ш/оя ooim(CT,),c«,Цм«пог «-7.0И

,

)j

k.S.te

5,«10- -W«T б/н

в/и Ibouier - 5,-|(г

Ожлогмс- 5,5-1в сел

в/и

,

UMtnor -,5 I

ем

«,S 1в

l «nort«-5.1.11Г1

CMK

.-l.j.lf

) ,H ЧО

S,S 1C1

-.li.l

l.iox r«i€-5,1-10

СНГ

.-5,1 ie 1

-.k.li-io

СОНЖСР,),,lV«K« r«ic- 1 СИЛ

,),

CI ,5СЯ,

соединит SarProPbiKJtSfiLxinvinf

,4 10

4 10