Способ получения 6-замещенных метиленпенициллановых кислот,или их сложных эфиров,или их солей с щелочными металлами Советский патент 1988 года по МПК C07D499/04 A61K31/43 A61K31/431 A61P31/04 C07D499/861 

Изобретение относится к способу получения новых соединений пенамового ряда, а именно 6-замещенных метилен- пеняциллановых кислот, или их сложных эфйров,или их солей с щелочными металлами, которые являются ингибиторами j6 -лак тамазы.; или полупродуктами в синтезе ингибиторов |5-лактамазы, и являются перспективными для использования в медицине.

Целью изобретения является создание новых соединений, усиливающих ин- гибирующее fi-лактамазу действие антибиотиков пенициллинового ряда,

Пример Г. Сложные эфиры 6-альфа-оксипенициллановой кислоты.

А. Сложный аллиловый эфир. Раствор 85 г (0,39 моль) 6-альфа-оксипенициллановой. кислоты в 300 мл диметилформамида обрабатьшают 34 мл (0,39 моль) бромистого аллила, 54 мл (0,39 моль) тризтиламина и 2 г бикарбоната натрия .и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15ч. После прерьшания реакции добавлением воды и экстракции диэтиловым эфиром объединенные эфирные соли промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме, получая 43 г неочищенного продукта. Этот неочищенный материал очищают на х.роматографической колонке с силика- гелем, элюируя смесью хлороформ: этилацетат (9:1)и получают 22,75 г (23%) сложного аллилового эфира. Спектр ПНР (CDClj), м.д. (хим.сдвиг) 1,42 (с.ЗН), 1,60 (с.ЗН), 4,45 (с.Ш)

4,5-5,0 (м, ЗН), 5,2-6,2 (м,4Н).

Б. Сложный пивалоилоксиметиловый эфир. Смесь 9 г (0,041 моль) 6-альфа-оксипенициллановой кислоты, 40 мл диметилформамида, 7,4 мл (0,041 моль) диизопропилэтиламина, 6мл (0,041 моль) хлорметилового эфира пивалоиловой кислоты и 6,15 г (0,041 моль) йодистого натрия перемешивают при комнатной температуре в течение 15ч. Добавляют в смесь воду, смесь эк- страгируют диэтиловым эфиром, экстракты сущат и концентрируют, получая 9 г неочищенного сложного эфира, который очищают на колонке с силика- гелем, элюируя смесью хлороформ: этилацетат (9:1). Объединенные фракции продукта составляют 4,384 г (32%).

В. Сложный бензиловый эфир. В смесь 20 г (0,092 моль) 6-альфа-оксипенициллановой кислоты, 12,9 мл (0,092 моль) триэтиламина, 1,105 г (0,013 моль) бикарбоната натрия и 200 мл диметилформамида (ЛИФ) добавляют 12,0 мл (0,101 моль) бромистого бензила. Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч, распределяют ее между диэтиловым эфиром и водой и водную фазу подкисляют до рН 2,0 6 н. хлористоводородной ислотой. Слои разделяют, водный слой дважды экстрагируют снова диэтиловым эфиром. Объединенные слои промывают водным раствором бикарбоната натрия, водой, сушат и вьтаривают растворитель. Остаток кристаллизуют из горяей смеси хлороформа и гексана, получая 9,1 г бесцветных кристаллов с температурой плавления 165-167°С.

Г. Сложный (5-метил-2-оксо-1,3- -диоксол-4-ил)-метиловый эфир. Смесь 15 г (0,078 моль) бромистого (5-ме- ТИЛ-2-ОКСО-1,3-диоксол-4-ил)метила, 18,7 г (0,078 моль) натриевой соли 6-альфа-оксипениЦиллановой кислоты в 225 мл диметилформамида перемеши- вают при комнатной температуре в течение 4ч, выливают смесь на лед и обрабатьшают, как указано, получая целевой сложный эфир.

Пример 2. Сложные эфиры 6- оксопенициллановой кислоты.

А. Аллиловый эфир 6-оксипеницил- лановой кислоты. Смесь 2,84 мл (0,04 моль) диметилсульфоксида, 3,67 мл (0,026 моль) ангидрида три- торуксусной кислоты и 50 мл хлористого метилена перемешивают при -78 С в течение 10 мин. Добавляют раствор 5,14 г (0,02 моль) аллилового эфира 6-альфа-оксипенициллановой кислоты в 10 мл хлористого метилена при-78 С и образовавшуюся смесь перемешивают в течение 40 мин. При этой температуре добавляют 7,24 мл (0,052 моль) триэтиламина, смесь постепенно нагревают до комнатной температуры и . прерывают взаимодействие добавлением воды. После экстракции хлористым метиленом объединенные органические слои трижды промывают водой, сушат и растворитель выпаривают в вакууме, получая в виде желтого масла указанное соединение в количестве 5,1 г (100%). Спектр ПМР (CDCl,), м.д. (хим.сдвиг): 1,60 (с.бН), 4,75 (м,2Н),

3J

А,82 (с, 1Н), 5,1-6,3 (м, ЗН), 5,82 (с, 1Н).

Б. Сложный пивалоиЛоксиметиловый эфир. Смесь 0,36 мл (5,06 моль) ди- метилсульфоксида, 0,47 мл (3,29ммоль) ангидрида трифторуксусной кислоты, 839 мг (2,53 ммоль) пивалоилоксиме- тилового эфира 6-альфа-оксипеницил- лановой кислоты и 5 мл хлористого ме тилена перемешивают при -78°С в течение 30 мин и добавляют 0,92 мл (6,58 ммоль) триэтиламина. Обраба- тьгаают продукт, как указано в п. А, и получают 788 мг (95%) целевого ке- тона. Спектр ПМР (CDClj), м.д. (хнм.сдвиг): 1,3 (с,9Н), 1,65 (с,бН) 4,85 (с,1Н), 5,8 (м,ЗН).

Пример 3, Аллиловый эфир 6(Е)-(2-пиридил)метиленпенициллано- вой кислоты.

Смесь 2,64 г (6,6 ммоль) 2-пико- лилтрифенилфосфонийхлорида и 0,265 г (6,8 ммоль) амида натрия в 6 мл сухого тетрагидрофурана (ТГФ) переме- шивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Образовавшуюся коричневую суспензию охлаждают до -78°С добавляют в один прием раствор 1,8 т (7,0 ммоль) аллилового эфира 6-оксо- пенициллановой кислоты в 4 мл сухого ТГФ и смесь перемешивают при в течение трех минут. Взаимодействие прерывают путем добавления насыщенного водного раствора хлористого аммония, экстрагируют смесь этилацета- том, объединенные органические слои трижды промывают водой, сушат сульфатом магния и. концентрируют в вакууме, получая 3,3 г красного масла. Это масло очищают хроматографически на колонке с силикагелем, получая 1,35 г (60,7%) целевого продукта в виде желтого масла. Спектр ПМР (CDCli), м. д. (хим.сдвиг): 1,50 (с ,ЗН), 1,58 (с,ЗН), 4,57 (с,1Н), 4,65 (д,2Н), 5,15-6,15 (м,ЗН), 6,17 (д, 1Н, Гц), 6,87 (д,1Н, Гц)О 7,2-7,4 (м,2Н), 7,60 (т.дублета, 1Н) 8,62 (дд). С-ЯМР (CDC1,), м.д. (хим. сдвиг): 26,04; 32,99; 62,77; 65,75; 70,01; 70,54; 119,10; 123,24; 124,02; 125,86; 131,06; 136,34; 144,66; 149,94; 152,13; 167,54; 168,73.

Пример 4. Используют методику примера 3, но вместо 2-пиколш1- трифенилфосфонийхлорида берут соответствующий реактив Виттига формулы

г,®

44

() СН,Я,С1 и получают соединения, приведенные в табл. 1.

Пример 5. Натриевая соль 6(Е)-(2-пиридил)метиленпенициллано- вой кислоты.

Смесь 0,120 г (0,38 ммоль) ал- лилового эфира 6-(Е)-(2-пиридил)ме- тилпенициллановой кислоты, 20 мг тетракис-(трифенилфосфин)палладия (О и 20 мг трифенилфосфина растворяют в 3 мл этилацетата и в этот раствор в - атмосфере азота добавляют 0,76 мл (0,38 ммоль) О,5-молярного раствора натриевой соли 2-этилгексановой кислоты в этилацетате. Смесь перемещи- BcUOT при комнатной температуре в течение двух часов, осадок отделяют фильтрацией, промывают этилацетатом и сушат в вакууме, чтобы получить 57 мг (48%) указанного соединения в виде желтого твердого вещества. . Спектр ПМР (DjO), м.д. (хим.сдвиг): 1,55 (c,6H)i 4,33 (с,1Н); 6,17 (д, 1Н, I 0,5 Гц); 7,03 (д,1Н, I 0,5 Гц); 7,17-8,07 (м,ЗН); 8,57 (м.1Н). ИК-спектр (KБr), 1756, 1605 см .

Пример 6. Используя соответствующий исходный материал, выбранный из сложных аллиловых эфиров, получаемых в примере 4, по методике примера 5 аналогичный образом получают следующие натриевые соли, приведенные в табл. 2.

Пример 7. 6-Фенилтиомети- ленпенициллановая кислота.

Смесь 93 мг (0,26 ммоль) аллилового эфира 6-фенилтиометиленпеницил- лановой кислоты (смешанные изомеры), 10 мг тетракис(трифенилфосфин)палладия (О) и 10 мг трифенилфосфина растворяют в 1 мл этилацетата, добавляют 0,52 мл С,5-молярного раствора натриевой соли 2-этилгексановой кислоты в зтилацетате при комнатной температуре, и образовавшуюся смесь пе ремешивают в течение 10 ч в атмосфере азота. Так как в осадок выпадает очень мало соли, смесь разбавляют водой и экстрагируют хлористьм метиленом. Водный слой подкисляют до рН 3,5 и экстрагируют хлористым метиленом. Высушенные экстракты концентрируют в вакууме для того, чтобы получить 63 мг (75%) свободной кислоты в виде смеси изомеров. Спектр ПМР (CDCl,), м.д. (хим.сдвиг): 1,5 (с,2,1Н); 1,55 (с,09,Н); 1,6 (с.2,1Н)

513

1,65 (с,0,9Н); 4,4 (с,0,7Н); 4,5

(с,О,ЗН); 5,38 (д,0,7Н); 5,7 (с,0,ЗН)

6,7 (с,ОЗН); 7,1 (д,0,7Н), 7,5(м,5Н

Пример 8. АллиловыЙ эфир

1,1-диоксо-6(Б)-(2-пиридил)метилен- пенициллановой кислоты..

К раствору 1,30 г (4,09 ммоль) аллилового эфира 6(Е)-(2-пиридил) метиленпенициллановой кислоты в Л 5 мл хлористого метилена добавляют 1,70 г (8,2 ммоль) м-хлорбензойной кислоты чистота 80-85%) и смесь перемешивают в атмосфере азота в течение трех часов при комнатной температуре. После прерьгоания взаимодействия добавлением насыщенного водного раствора тиосульфата натрия и воды смесь эк- страгируют хлористым метиленом, органический слой подщелачивают до рН 7,5 насьщенным водным раствором бикарбоната натрия, промьтают водой, сушат сульфатом магния и растворитель выпаривают в вакууме, получая 1,4 г (98%) продукта в виде желто- го масла. Это масло очищают на хро- матографической колонке с силикаге- лем, при элюироваиии смесью гексан- этилацетат (7:3) получают 0,78 г (55%) указанного в заголовке сульфо- на в виде бесцветных кристаллов. Спектр ПМР (CDClj), м.д. (хим.сдвиг): 1,48 (с,ЗН), 1,63 (с,ЗН), 4,46 (с,1Н), 4,73 (д,2Н), 5.1-6,2 (м,ЗН), 5,77 (д, 1Н, 1 0,5 Гц), 7,27 (д,1Н, I 0,5 Гц), 7,1-8,1 (м,ЗН), 8,6 (м,1Н). ЯМР - c(CDClj) , м.д. (хим.сдвиг)t 18,53; 20,43; 63,18; 64,25;-66,63; 72,04; 119,91; 124,64; 1.26,03; 130,68; 132,83; 136,77; 150,31; 166,86; 168,11. ИК-спектр (КВг), 1323, 1586, 1759, 1783, 3437.

Пример 9. Аллил 1,1-диоксо- -6(Е)-(2-оксиэтилиден)пеницилланат.

К раствору 0,190 г (0,61 ммоль) аллил 1,1-диоксо-6(Е)-формилметилен- пеницилланата в 4 мл сухого тетрагид- рофурана при прибавляют 0,61 мл (0,61 ммоль) 1М раствор диизобутил- алюминийгидрида в гексане. Смесь пе- ремешивают при -78°С в течение 10 мин, гасят метанолом, перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин и фильтруют. Фильтрат концентрируют под вакуумом и получают 0,258 г сырого продукта, который разбавляют водой, экстрагируют хлороформом и высушивают органический слой над суль

с

5 0 5 Q д

5

5

5

446

фатом магния. Выпариванием хлороформа получают 160 мг соединения, которое дополнительно очищают хроматогра- фированием на колонке с силикагелем с использованием в качестве злюента смеси хлороформ: этилацетат (4:1) и получшот 113 мг (60%) указанного соединения. Н-ЯМР (CDC1,), ч/млн (дельта): 1,40 (синглет,ЗН), 1,60 (синглет, ЗН), 2,60 (широкий синг- лет, 1Н), 4,3 (мультиплет, 2Н), 4,4 (синглет, 1 И), 4,7 (дублет, 2Н), 5,1-6,0 (мультиплет, ЗН), 5,25 (дублет, 1Н), 6,38 (мультиплет, 1Н).

Пример 10. Исходя из соответствующего 6-метиленпенициллатного сложного зфира (), полученного по примеру 4, и используя его в качестве исходного.соединения в методике по примеру 8, получают следующие соединения, приведенные в табл. 3.

Пример 15 . Аллил 6(Е)- (1- -оксохинолин-2-ил) метилен -1,1 -ди- оксопеницилланат.

Аллил 6(Е)-(хинолин-2-ил)мети- лен -1-оксопеницилланат, полученный как сопродукт при получении соответствующего сульфона по примеру 10 . (124 мг, 0,313 ммоль), растворяют в 5 мл метиленхлорида и прибавляют 195 мг (0,904 ммоль) 80%-ной мета- хлорпербензойной кислоты. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 48 ч, гасят водой и экстрагируют метиленхлоридом. Экстракты промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, йодой, сушат, концентрируют под вакуумом и получают желтое масло. Масло очищают с помощью колоночной хроматографии на силика- геле и получают 45 мг (35%) целевого N-оксида в виде твердого желтого соединения. Н-ЯМР (CD С1з),..и/мл.н (дельта): 1,45 (синглет, ЗН), 1,6 (синглет, ЗН), 4,45 (синглет, 1Н), 4,.7 (мультиплет, 2Н), 5,0-6,0 (мультиплет, 3H)i 5,85 (дублет, 1Н), 7,3-8,0 (мультиплет, 7Н).

Пример 12. 1,1-Диоксо-6(Е)- -(2-пиридил)метиленпеницш1ланат натрия.

Смесь аллил 1,l-диoкco-6(E)-(2-пи- pидил)мeтилeнпeницшшaнaтa (0,14 г, 0,4 ммоль), 20 мг тетракис(трифенил- фосфин)палладия (0) и 20 мг трифенил- фосфина растворяют в 2 мл этилацета- та и в атмосфере азота прибавляют 0,8 мл (0,4 ммоль) 0,5М раствооа 2

этилгёксаноата натрия в этилацетате Образующуюся смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин Выпавший осадок отфильтровывают, про мьшают этилацетатом, сушат и получают 0,13 г (95%) натриевой соли в виде твердого желтого соединения. Н-ЯМР (DjO), Ч./МЛН (дельта): 1,50 (синглет, ЗН), 1,60 (синглет, ЗН), 4,23 (синглет, 1Н), 5,9б (дублет, 1Н, I 1 Гц), 7,1-8,0 (мультиплет, 4Н), 8,57 (мультиплет, 1Н). Инфракрасный спектр (КВг), 1590, 1621, 1770, 3454.

Пример 13. Аллил 1,1-диок- со-6(Е)-(1-оксо-2-пиридил)метиленпе- ницилланат.

Раствор аллил 1,1-диoкco-6(E)-(2- пиpидил)мeтилeнпeнициллaнaтa (100 мг 0,286 ммоль) в 5 мл метиленхлорида обрабатывают метахлорпербензойной кислотой (120 мг, 0,59 ммоль) и перемешивают при комнатной температуре в течение трех дней. Смесь гасят на- сьщенным раствором тиосульфата натри и экстрагируют метиленхлоридом. Органический слой нейтрализуют насьпцен- ным раствором бикарбоната натрия, промывают водой, сушат, концентрируют и получают 82 мг желтого масла. Желтое масло очищают колоночной хроматографией на силикагеле с использованием этилацетата в качестве элю- ента и получают 22 мг (21%) целевого соединения и 14 мг (13%) сопутствующего продукта 2,3-эпоксипропанил 1,1-диоксо-6(Е)-(1-оксо-2-пиридил) метиленпеницилланата.

Аллил 1,1-диoкco-6(E)-(l-oкco- -2-пиpидил)мeтилeнпeнициллaнaт . Н-ЯМР (CDC1J ) , Ч./МЛН (дельта) : 1,5 (синглет, ЗН), 1,6 (синглет, ЗН), 4,45 (дублет, Ш), 4,7 (дублет, 2Н); 5,1-6,0 (мультиплет, ЗН), 5,8 (синглет, 1Н), 7,1-8,4 (мультиплет, 5Н) .

Пример 14. Гидролизом соответствующего аллилового сложного эфира по методике, описанной в примере 12, получают продукты, представленные в табл. 4.

П р им е р 15. Пивалоилоксиме- тил 6(Е)(метилтио)метиленпеницилла- нат.

Смесь 2,4 ммоль (метилтиометил) трифенилфосфоний хлорида и 2,4 ммоль амида натрия в 5 мл сухого тетрагид- рофурана (ТГФ) перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин.

5

0

5

Q

0

5

0

5

0

5

К образующемуся желтому раствору при -78 С прибавляют раствор 788 мг (2,4 ммоль) пивалоилоксиметил 6-оксо- пеницилланата в 10 мл сухого ТГФ. Смесь перемешивают при в течение 1 мин, выливают в насыщенный раствор хлорида аммония и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель удаляют под вакуумом и получают 774 мг сырого продукта, который очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлоро- формом, и получают 220 мг (24,5%) чистого продукта. Н-ЯМР (СПС), Ч./МЛН (дельта): 1,25 (синглет, 9Н), 1,50 (синглет, ЗН), 1,65 (синглет, ЗН), 2,45 (синглет, ЗН), 4,45 (синглет, 1Н), 6,85 (мультиплет, ЗН), 7,0 (дублет, 1Н).

Пример 16. 6(Е)-(К-Метил- пиррол-2-ил)метилен-1,1-диоксопени- цилланат натрия.

Раствор 46 мг аллил 6(Е)-(Ы-метил- пиррол-2-ил)метилен-1,1-диоксопени- цилланата, 5 мг тетракис(трифенил- фосфин)палладия (0), 4 мг трифенил- фосфина и 1 мл метиленхлорида перемешивают в атмосфере азота в течение 5 мин. Образовавшуюся смесь разбавляют 1 мл этилацетата и прибавляют 0,25 мл раствора 2-этилгексаноата натрия в этилацетате. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч смесь фильтруют, осадок промывают этилацетатом, диэтиловым эфиром и получают 30 мг желтого твердого соединения. Н-ЯМР (), чУмлн (дельта): 1,50 (синглет, ЗН), 1,60 (синглет, ЗН), 3,65 (синглет, ЗН), 4,10 (синглет, 1Н), 5,4 (синглет, 1Н), 6,1-6,5 (мультиплет, 1Н), 7,0 (широкий синглет, 2Н), 7,2-7,4 (м, Ш). Инфракрасный спектр (КВг), см : 1568, 1616, 1660, 1745, 3465.

Пример 17. 1,1-Диоксид 6(Е)-фенилметиленпенициллановой кислоты.

К раствору 0,1 г (0,28 ммоль) аллил 6(Е)-фенилметилен-1,1-диоксопе- ницилланата, 20 мг трифенилфосфина и 20 мг тетракис(трифенилфосфин)палла- дия (О) в 3 мл этилацетата прибавляют 0,57 мл 0,5 М раствора 2-этилгексаноата натрия и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. После выстаивания в холодильнике в течение б5 ч осадок не обра

91

зуется. Смесь разбавляют этилацета- том и, водой и отделенный водный слой доводят до рН 1,8 разбавленной хлористоводородной кислотой, экстрагируют свежим Этилацетатом, экстракты сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель удаляют под вакуумом и получают 62 мг (69%) продукта в виде желтых кристаллов (из ацетона), H-flMP(CD,COCDj), 4,/млн (дельта) :. 1,55 (синглет, ЗН), 1,65 (синглет, ЗН), 4,43 (синглет, 1Н), 5,93.(дублет, 1Н), 7,3-7,9 (мультиплет, 6Н), 8,7 (широкий синглет, 1Н).. Инфракрасный спектр (КВг), 132/, 1685, 1737, 1772, 2929, 2961, 3108, 3477.

Пример 18. Аллиловый эфир 1,I-диоксо-6(Е)-(2-пиримидинил)мети- ленпенициллановой кислоты и ее калиевая соль.

А. Аллил-6(Е)-(2-пиримидинил)-ме- тиленпеницилланат (560 мг, 1,69ммоль и..3-хлорпербензойную кислоту (730 мг 3,38 ммоль) растворяют в 10 мл мети- ленхлорида и перемешивают .в атмосфер азота в течение четырех часов. Смесь гасят водой, экстрагируют метилен- хлоридом, экстракты промьшают тио- к сульфатом натрия, нейтрализуют бикарбонатом натрия, промывают раствором соли, сушат, концентрируют под вакуумом и получают 460 мг сырого масла. Масло очищают хроматографированием на колонке с силикагелем, с исполь- зованием смеси хлороформ: этилацетат (9:1) в качестве элюента, и получают 180 мг целевого аллилового сложного эфира в виде бледно-желтого твердого соединения. н-ЯМР (CDClj),, WnnH (дельта): 1,45 (синглет, JH), 1,65 (синглет, ЗН)j 4,5 (синглет, 1Н), .. 4,75 (мультиплет, 2Н), 5,2-6,3 (мультиплет, ЗН), 5,75 (синглет, 1Н), 7,1-7,5 (мультиплет, 2Н), 8,9 (дуб- лет, 2Н).

Б. Проводят реакцию между полу- ченньм аллиловым сложным -эфиром и трифенилфосфином, тетракис(трифенил- фосфин)палладием (О) и 2-этилгексано- атом калия по методике, описанной в примере 12, и получают целевую калиевую соль с выходом 89% в виде бледно-розового твердого соединения. Н-ЯМР (), ч,/млн (дельта): 1,6 (синглет, ЗН), 1,68 (синглет, ЗН), 4,4 (синглет, 1Н), 6,1 (синглет, 1Н) 7,43 (синглет, 1Н), 7,54-(триплет.

5

51

Q

0

5 „ °

0 5

4410

1Н), 8,8 (дублет, 2Н). С-ЯМ (), чУмлн /дельта): 20,9; 22,7; 68,8; 68,9; 74,6; 124,5; 132,5; 139,9; 160,9; 163,2; 172,5. Инфракрасный спектр (КВг), см- : 1560, 1615, 1771, 3439.

6-Замещенные метиленпенициллано- вые кислоты или их соли в сочетаниях с бета-лактамными антибиотиками обнаруживают синергическую активность в протйвомикробных испытаниях вне организма. Такая активность была продемонстрирована при измерении минимальной ингибирующей концентрации (МИК), мкг/мл, против множества микроорганизмов . В методике испытания используют агар экстракта мозга и сердца (ВН1)и устройство для воспро изведения инокулята. Содержимое про- бурок, выросшее за ночь, разбавляют 100 раз для использования в качест- в е стандартного инокулята - на поверхность агара помещают 20000-ГОООО клеток приблизительно в 0,002 мл; 20 мл BHI агара (в чашке). Применяют двенадцать двукратных разбавлений испытуемого соединения, причем:(начальная концентрация испытуемого медикамента составляет 200 мкг/мл. При отсчете пластинок, через 18 ч при 37°С, отдельными колониями пренебрегали. Чувствительность ЬШК испытуемого организма расссчитывают, как самую низкую концентрацию испытуемого соединения или сочетания соединений, которая способна вызвatь полное ин- гибирование роста, которое подтверждается невооруженным глазом.

6-Замещенные метиленпенициллано- вые кислоты или их соли в сочетаниях с известными бета-лактамными антибиотиками являются полезными в качестве промышленных антимикробных препаратов, например при обработке воды, регулировании слизи, Предохранении красок и древесины, а также для местного применения в качестве дезинфецирующих средств. В случае - использования этих соединений для таких применений часто удобно смешивать активный компонент с нетоксичным носителем, таким как растительное или минеральное масло, или умягчающий крем. Аналогично, они могут быть растворены или диспергированы в жидких разбавителях или раствору- телях, таких как вода, спирты, глико- ли или их смеси. В большинстве случаев достаточно использовать концентрации активного компонента приблизительно О, - 10 мас.%5 в расчете на общую композицию.

Кроме того, соединения имеют еще большее значение в качестве потенциальных ингибиторов микробных бета- лактамаз. По этому механизму они увеличивают противомикробную эффектив- ность бета-лактамных антибиотиков (пенициллинов и цефалоспоринов) против многих микроорганизмов, в особенности тех, которые продуцир чот бета-лактамазу.Способность новых соединений увеличивать эффективность бета-лактамного антибиотика подтверждена экспериментами, в которых определялись значения МИК одного антибиотика и одного соединения указанной формулы. Затем эти значения МИК сопоставляли с МИК, полученными для сочетания данного антибиотика и соединения указанной формулы. Когда проти- вомикробная эффективность для сочета- НИН существенно превышает эффективность, которая может быть рассчитана из эффективностей отдельных компонентов, то имеет место усиление активности.

Соединения указанной формулы усиливают противомикробную активность бета-лактамных антибиотиков внутри организма.

Результаты испытаний приведены в табл. 5.

Формула изобретения

Способ получения 6-замещенных ме- тиленпенициллановых кислот, или их сложных эфиров, или их солей с щелочными металлами общей формулы

(0)п

,

.,:..

COORj

R( - хлор, формил, оксиметил,

С,-С4 алкилтио, фенил, фе- нилтио, 2-хинолинил, 2-пиридил, свободный или замещенный хлором, метилом, меток- сигруппой, аллилокси- или

оксигруппой, 2-П1ФИМИДИНИЛ,

свободный или замещенный метилом, 2--пиразинил или тил-2-пирролил;

R - сложноэфирная защитная группа, такая как аллил или пивалоилоксиметил, водород или катион щелочного металла;

п О, 1 или 2,

тличающийся тем, что единение общей формулы

0.

Г р-снз

0 - СООК

где RJ - сложноэфирная защитная группа, такая как аллил или пивалоилоксиметил,

подвергают взаимодействию с реагентом Виттига общей формулы

К1СН Р®1СбН5)зС1®

где R имеет указанные для R, значения, кроме 2-пиридила, замещенного оксигруппой, и оксиме- тила,

в присутствии амида щелочного металла в среде инертного органического растворителя при температуре и/или в случае необходимости получения целевого продукта, где R - оксиметил, восстанавливают соответствующее соединение, где R, - формил, гидридом диизобутилалюминия в гексане при температуре и выделяют целевой продукт, где п О, и в виде эфира или в случае необходимости обрабатывают его окислителем, таким как 3- хлорпербензойная кислота, в среде инертного органического растворителя при комнатной температуре с получе- нием целевого продукта, где п 1 или 2, и/или в случае необходимости целевой продукт обрабатьтают каталитическими количествами тетракис(три- фенилфосфин)палладия (О) и трифенил- фосфана и эквимолярным количеством щелочной соли 2-этилгексановой кислоты н выделяют целевой продукт, где R;j - водород или катион щелочного металла, и/или где R, 2-пиридил, замещенный оксигруппой.

13

1395144

14

т о л и д а I

Изобретение относится к способу получения 6-замещенных метиленпени- циллановых кислот, или их сложных эфиров, или их солей с щелочными металлами формулы {)п RjCH,. т т из 0 COORz где R, - хлор, формил, оксиметил, С,-С4-алкилтио, фенил, фенилтио, 2-хинолинил, 2-пиридил, свободный или замещенный атомом С1, метилом, метоксигруппой, аллилокси- или окси- группой, 2-пиримидинил, свободный или замещенный метилом, 2-пиразинил или К-метил-2-пирролил; R сложно- эфирная защитная группа, такая как аллил или пивалоилоксиметил, Н или катион щелочного металла; п О, 1 или 2, которые используются в медицине. Получение целевых соединений ведут из соединения формулы О ч 0 .S Шз COORV где Ri. - сложноэфирная защитная группа, такая как аллил или пивалоилоксиметил, g реагента Виттига формулы R .CH Р (CgH5),cr, где R| имеет указанные для R, значения, кроме 2- пиридила, замещенного оксигруппой, и оксиметила, в присутствии амида щелочного металла в среде инертного органического растворителя (ИОР) при (-78°С). В случае необходимости получения целевого продукта, где Rf - оксиметил, восстанавливают со- . ответствующее соединение, где R - формил, гидридом диизобутилалюминия в гексане при -78°С и выделяют целевой продукт, где , в виде эфира или в случае необходимости обрабатывают его окислителем, таким как 3- хлорпербензойная кислота, в среде ИОР при комнатной температуре с получением целевого продукта, где nfl или 2, и/или в случае необход51мости целевой продукт обрабатывают каталитическими количествами тетракис (три- фенилфосфин)палладия (0) и трифенил- фосфина и эквимолярным количеством щелочной соли 2-эти.пгексановой кислоты и выделяют целевой ,. где Rj - Н или катион щелочного металла, и/или где RJ - 2-пириднл, замещенный оксигруппой. 5 табл. СО со СП 4 CN

П( «nmuio эФкро 6-явмещенких мвгиленпеттиллановых кислот и их оойстяа

C,H,S

-78

с

-78

.

-78

СНз СНз 3 -78

Vv

«t

.ОСН,3-78

)

.

)

1,5 (с, 2,2Н), 1,55 (с, 0,8Н), 1,65 (с, 2,2Н), 1,7 (с, 0,8Н), 4,5 (с, 1Н), 4,5-4,8 (м, 2Н). 5,1-6,1 (м, 4Н), 6,8 (Ct 0,26Н), 7,15 (д, 0,74Н), 7,4 (к, 5Н).

1,45 (с, ЗН), 1,55 (с, ЗН), 4,55 (с, 1Н), 4,65 (Я, аН), 5,2-6,1 (м, ЗН), 6,15 (д, 1Н), 6,75 (д, 1Н), 7,05-7,75 (м, ЗН).

1,5 (с. И), 1,6 (с, ЗН), 4,6 (с, IH). 4,68 (д, 2Н, 5,1-6,1 (и, ЗН), 5,77 (с. Ж), 6,57 (с, 1Н), 7,2-7,64 (м, ЗЯ), 7,64-8,16 (м, 2Н)..1,52 (с, ЗИ), 1.62 (с, ЗН), 4,60 (с, 1Н), 4,69 (А, 2Н), 5,1-в,3 (м, ЗН), 6,1 (д, IHX, 7,03 (д, tft), 7,4 (с, 5Н).

1,55 (с, ЗН), 1.65 (с. ЗН) 2,55 (с. 6Н). 4,65 (с, 1Н), 4,7Д (д. 2Н), ,1 (к, ЗН), 6,25 (д. 1Я). 6,9 (с. 1Н), 7,0 (д, 1Н).

15

.OCHjCH-CHj 5 -те

-те

-78

5

-78

гексая этипацетаг (9ii), гехЬапгэтилацетвг (7i3), хлороформ,

хлороформ| тнп«пст«т (9tl), )и1ороформ:9тил пет г (99:1). В-И10м«р (R, аити-конфигурацмм относительнZ-n«oMcp (R, в син-хояфигурации относительно . .

А

В

С D

Проводят с формилметмлеитрифенялфосфораион я бензоле.

Таблица 2

Структура, выход и физические свойства иат1)иевых солей .6-9вмещенных метиленпенициллановых кислот

RiCH

0 -COONa

С1

(Е)

95 Желтое твердое вещество, ПМР (), м.д. (хим.сдвиг): 1,50 (с, ЗН), 1,58 (с,ЗН), 4.,3 (с, 1Н), 5,83 (д, 1Н), 7,1 (д, 1Н)| ИК-спектр. (КВг), CM : 1573, 1607, 1688, 1775, 3460.

С1

CH,S

Z) (Е)

89

ВО

ИК-спектр (КВг), 1679, 1758, 3491

-f

см : 1580, 1609,

Белое твердое вещество, ПНР (), м.д. (хим.сдвиг): 1,48 (с, ЗН), 1,56 (с, ЗН), 2,50 (с, ЗН), 4,20 (с, 1Н), 5,88 (с, 1Н), 7,2 (с, 1Н); ИК-спектр (КВг), 1396, 1606, 1749, 2926, 2963, 3552.

1395144

16

Продолжение табл.

«,5 (е, ЗН), Г,6 (с, ЗН), 4,4-4.8

(к 5Н), 5,1-6,3 (м. 6И). «,2 (я, Я), 7,15 (д, 2Н), 7,4 Ся, 1Н)1, в,Г5 (т. 1Н).

B-HSOMep: 1,5.(с, ЗН), 1,6 (с, ЗН),

2,6 (с, ЗН), 4,6 (с, 1Н), 4,65 . (м, 2Н), 5,1-6,2 (м, ЗН), 6,2 (Д, 1Н),- 6,85 (д, 1Н), 7,0-7,7 (м, ЗН).

F-MScwep: 1,5 (с, ЗН),1,6 (с, ЗН),

4,55 (с, )Н), 4,67 (и,2Н), 5,0-6,2

{к, ЗН), 6,15 (д, IH),6,95 (а, 1Н), в,4-,8 (м, ЗН).

Е-и омер: 1,5 (с, ЗН), 1,7 {с, ЗН),

4,55 (с, 1Н), 4,7 (я, 2Н), 5,1-6,2 (к, ЗН), 6,2 (с, 1Н), 6,5-7,0 (м, ЗН), 8,5 (д, 1Н).

-f

см : 1580, 1609,

Сб.

CfiHj

(Z) (Е)

60 80

Светло-желтый порошок,

Белый порошок, ПМР (П О/ДМСО), м.д. (хим.сдвиг): 1,5 (с, 6Н), 4,25 (с, 1Н), 6,1 (д, 1Н), 7,0 (д, 1Н), 7,4 (с, 5Н); ИК-спектр (КВг), см : 1626, 1642, 1655, 1742, 3434.

Таблиц 3

Структур, шыход н физические свойств «ллнлоаых эфиров ,I-дноксо-6-9«ме«еиных метилвяпекиииллаиовых кислот

(оЬ

0 СООСНгСН-СЙ

сно

(Е

22

СНС1.

2-хииолнп

(Е)

28

СНС1,

6-хлор-2-пирияил (Е)

34СНС1,

Щ СНз

-ОСНз

(Е)8снег,

(79Z. сырого сосаиие- ния)

(Е)

47

Гехсак:

типаиет т

()

OOiaCH-CHj

Hj

(Е)

(Е)

54

53

Гекс«и:

этилацетат

(1:1)

СНС1.

(В)

40

СНС1,

этилацетат

(9:1)

з

(Е

99

Очистк я требуется

и

В последуюкем эксперименте сульфон (п-2) с выxoяo 4 291 получают элюироваиием иэ колот ки с силикагелем хлороформом, содержаоим 2Х этклацетата, а также получают воле поллрнук фракцию, илеитифииируеную как суяьфоксид (п-1) с выходом 27Х, )

1,42 (с,ЗН), 1,60 (с, ЗН), 4,50

с, 1Н),4,70 Сл, 2Н), 5,1-6,0

(и, ЗН),5,32 (с, 1Н), 7,1 (н, 1Ш

9,73 (д,1Н).

1,5 (с, ЗН), 1,6 (с. ЗН), 4,45 (с, 1Н), 4,7 (д, 2Н), 5,1-6,1 (к, ЗН), 5,8 (д, 1Н), 7,3-8,5 (м, 7Н).

1,5 (с, ЗН), 1,6 (с, ЗН), 4,45 (с, 1Н), 4,7 (д, 2Н), 5,1-6,3 (н, ЗН), 5.75 (д, 1Н). 7.1-7,3 (м, 4Н).

1,5 (с, ЗН), 1.6 (с, ЗВ), 2,55 (с, 6Н). 4,5 ( с, 1Н). 4,7 (д. 2Н), 5.0-5,9 м, ЗН), 5,7 (д, 1Н). 6,9 (с, 1Н), 7,3 (д, 1Н),

1,56 (с, ЗН). 1,7 (с. ЗН), 4,6 (с, 1Н), 4,85 (м. 2Н), 5.2-6.2 (н, ЗН), 5,8 (д. 1Н), 7,4 (д. Н), 8.5-9.0 (м, ЗВ).

1,5 (с, ЗН),1,7 (с, ЭН), 3,9

(с, ЗН), 4.5(с, IH), 4.75 (м,

2Н), 5,2-6.3(и, ЗН). 5.7 (д,

IH), 6,7-7,0(м, 2Н), 7,2 (д.

1Н. 8,5 (д.1Н).

19

труктур, выход и физические свойства натриевых солей I,t-диоксо 6- замеяеняых метиленпетщиллановых кислот

О о

.СНз СНз 0 -COONa

.

НОСИ.

(В)

2-хинолил(Е)

6-хлор-2-пи- (Е) рядяя

ГуК

(Е)

ОШз (Е)

1-оксо-2-хи- (Е) нолил

ОСН|О{-СН| ()

(гвгроскооячяяя кшшевся соль)

(Е)

53 Н-ЯМР (D.O), чУмлн (дельта): 1,5 (с, ЗН), 1,6 (с, ЗН), 4,24 (с, 1Н), 4,30 (дд, 2Н), 5,75 (с, 1Н), 7,20 (д, 1Н). Инфракрасный спектр (КВг), 1618, 1674, 1767, 3408, 3440.

76 н-ЯМР (250 МГц, ДМСО), чУмлн (дельта):

1,45 (с, ЗН), 1,48 (с, ЗН), 3,82 (с, 1Н), 5,96 (с, 1Н), 7,55-8,55 (м, 7Н). Инфракрасный спектр (КВг), 1619, 1771, 3437.

86 Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО), ч/млн (дельта):

1,56 (с, ЗН), 1,64 (с, ЗН), 4,34 (с, 1Н), 6,18 (с, 1Н), 7,45-8,0 (м, 4Н). Инфракрасный спектр (КВг), 1624, . J771, 3433.

75 н-ЯМР (250 МГц, DjO), ч./клн (дельте): 1,52 (с, ЗН), 1,60 (с, ЗН), 2,5 (с, 6Н), 4,32 (с, 1Н), 6,16 (д, 1Н), 7,35 (д, 1Н), 7,65-7,75 (м, 1Н). , Инфракрасный спектр (КВг), см : 1629, 1781, 3403.

55 н-ЯМР (250 МГц, CDCli), чУмлн (дельта) 1,42 (с, ЗН), 1,48 (с, ЗН), 3,85 (с, 1Н), 3,95 (с, ЗН), 5,85 (д, 1Н),

7,45 (д, Ш), 7,45-8,0 (м, 2Н), 3,22 (м, 1Н). .

Инфракрасный спектр (КВг), 1617, 1767 3454.

56Инфракрасный спектр (КВг), 1553, 1622, 1769, 3413..

99 Н-ЯМР (ДМСО), чУмлн (дельта):

1,35 (с, 6Н), 1,4 (с, 1,4Н), 1,44 (с, 6В)„1,48 (с. 1.4Н), 3,7 (с, 1Н), 4,55 (д, 1Н), 4,75 (д, 1Н), 5,15-5,5 (м, 2Н), 5,67 (с, 0,6Н), 5,8 (с, 0,4Н), 5,8-6,0 (м, 0,5Н), 6,0-6,2 (м, 0,5Н),- 6,75-7,0 (м, 2Н), 7,4-7,5 (м. Ж), 8,2 (д, 0,5Н),

Инфракрасный спектр (КВг), 1613, 1760, 3429.

76 н-ЯМР (DjO), чУмлн (дельта): 1,8 (с, ЗН), 1,9 (с, ЗН), 4,56 (с, 1Н), 7,2 1Н), 7,34 (1Н), 7,62 (Н), 8,68 (Ш).

С-ЯМР (), чУмлн (дельта): 20,9; 22,7; 58,7; 64,6; 68,7; 74,6; 113,9; 115,9; 134,0; 134,2; 154,6; 155,1; 169,4; 173,7; 175,6.

1395144

20 Таблица 4

f

8

7 Я W s «

л

ШN

--

7

S

S о

4 Г4 . tn М

Is §

s

in

8 w 8 10 w

Г4 чеB4 N N S,

A Л

о

8

in о N

s я g - e g 2 Ф- и f S g :i «л 8 vb Й

i § s I § Й i § Й I i E § Й i §

A 77 Aл A A

A

8

E ; s e s s

8

A

A V

Г4

M

ч

р - S S S -.л И S « «е н .

АА .АА

оо

2 S S

8

SS«gSS

Аk

S §« i

АА

1Л

2 s I R 2 i И И I И И § И S

I S и I S И i 8 В I 8 и I SB S 8 и i S к

A V

ft V .. A

V A A

M в S и a S M .a a -a S и a a и a a

a

f

I 1-0

k. Cj-: 4- C

.

«

§0 -о «

Vt о «соо

CN 0|мГМ Д|Г4 вЯ)

я

S о

Г4 . tn М

8

fit

Оu О

Г4М Л (4

АJ

s

(/)

cK r:iNiL -04

I

л

in о N

8 vb

§ Й i §

A

i i и

к

о tf о P и

«ч и«. Г4 и

y

8

8

ёч 8 И S 8 И

(V А

ч

«е н .

АА

i ;: и I i 1« I

Й2 SS«g

S §« i

АА

о«а л

5«о 0

Nо

АК

I SB S 8 и i S

V A A

f

§ Я « I я в I « в § « S. i 5 8

Ф:

5

:

§ 8 и § § « I а S f и

А

1 f ч 9

о о и Воо «о « р N

Hiigpi -wMMfc

АД АА А

8

ж «

«о

Я

я f о- S S 2 Я8 . I

«м А

ооироноомбомоом ооно8

(..g«SЛАА АДААААААЛАА

S

ё I

8

Ё

8

V

м g

я

О «

5 S А

8 ,. §

от .еч - . .es - . А .А

8бн88м88м8|о

M...SBM-

ЛАДАА АА

S

US

8

о inо во

Х от N

А

во UI г &

о

м

V

8 о W

у 7

он 8 « у

«м

|

8о i8

е$ли г9« к А .

8§S3 §I

АА АА

В Я В

8 8 и 8 8

Г4 - к я А АА А

2 Я

8 О 8 О

Р4 л « СЧ «о

АА

И 8 о

V

ё

8

г S А V

ё

S

V

Р4 S гт

(В

8

А

1Л СМ

«о (В

N

о о

о

I 19

со Ы

88м

А «

8 8

м А А

(Л

Рч

1Л Г4

«ч с А

8

d1Л

g1

(

ПА

ю

I -

ft

б

1-1

f

ё

8 о у 7

и 8

с. 8

А ч

м я

+

It

wT