Способ определения изотипа антител Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к иммунологии и может быть использовано для определения изотипов антител.

Цель изобретения - повышение точности способа за счет повышения чувствительности иммунологической реакции..

П р.и м е р 1. Сыворотку больного эхи- нококкозом титруют на 0,85%-ном растворе хлористого натрия в пробирках в объеме 2,0 мл с разведением 1:200. В каждую пробирку вносят по 0,5 мл 0,5%-ного эхинококкового антигенного эритроцитарного диагностику- ма, смешивают содержимое пробирок и выдерживают их в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем пробирки центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Над- осадок сливают, а осадок эритроцитов трижды отмывают 0,85%-ным раствором хлористого натрия, содержащим 0,05%-но- го твина-20. После этого к осадку добавляют Ov85%-Horo раствора хлористого натрия, который содержит 0,03% бычьего сывороточного альбумина, до концентрации эритроцитов 0,1%. По-25 мкл этой взвеси переносят в ячейки планшета, содержащие 50 мкл 0,85%-ного раствора хлористого натрия с 0,03% бычьего сывороточного альбумина. Для каждой исследуемой пробы сыворотки делают несколько одинаковых рядов обработанного последовательными разделениями пробы антигенного эритроцитарного диагностикума - по числу применяемых антиизотиповых диагностикумов. Во все ячейки одного ряда вносят по 25 мкл 0,5%- ного антительного эритроцитарного диагно- стикума к одному изотйпу иммуноглобулина, второго ряда - к другому изотйпу иммуноглобулина и т.д. Учет осуществляют по агглютинации через 2 ч.

В табл. 1 представлены результаты по обоснованию используемой концентрации эритроцитарного диагностикума.

Из табл. 1 видно, что оптимальным вариантом является концентрация эритроцитарного диагностикума 0,1-0,05%.

В табл. 2 представлены результаты по сравнению чувствительности определения разных классов антиэхинококковых антител предлагаемым и известным способами.

Из табл. 2 следует, что чувствительность определения антител каждого изотипа в 4-5

СО

с

VJ

ю о о

о

раз выше при использовании предлагаемого способа в сравнении с известным.

В табл. 3 и 4 представлены результату по изучению специфичности предлагаемого способа.

Как видно из табл. 3 и 4, при большей чувствительности предлагаемого способа, продемонстрированной в примере 2, его специфичность хуже, чем известного способа.

Формула изобретения

Способ определения изотипа антител путем взаимодействия исследуемой сыворотки со специфическим антигенным эрит- роцитарным диагностикумом с последующим определением титра антител в реакции гемагглютинации, отличающийся тем,

что, с целью повышения точности способа за счет повышения чувствительности иммуно7 логической реакции, дополнительно после взаимодействия реагентов осуществляют отмывание эритроцитов и добавление их в

концентрации 0,05-0,1 % к 0,5%-мому анти- изотиповому антительному эритроцитарно- му диагностикуму.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологической диагностике. Цель изобретения - повышение точности способа за счет повышения чувствительности иммунологической реакции. При этом антигенный эритроцитарный диагностикум после экспозиции с исследуемой сывороткой отмывают и в концентрации 0,05-0,1% добавляют к 0,5%-ноМу антиизотиповому эритроцитарному диагностикуму. Повышается точность за счет повышения чувствительности иммунологической реакции в 4-5 раз. 4 табл.

Спонтанная гемагглюти- нация

Таблица

Таблица2

ТаблицаЗ

Таблица