Способ получения производных птеридина Советский патент 1992 года по МПК C07D475/08 A61K31/495 

Изобретение относится к способу получения новых азотсодержащих гетероциклических соединений, имеющих ценные фармакологические свойства, в частности к способу получения производных птеридина общей формулы

ЙК

Хун,„-С

J4

N N

R,

где R и Ra - замещенная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиног- руппа:

лкые к на

(I)

ли г-

RI и R2 - вместе с находящимся между ними атомом азота образуют N-этил-этано- ламино, N-этил-изопропаноламино, этанол- изопропанол-амино,М-(2-окси-2-метил-н-про- пил этаноламино;

R - атом водорода или метил;

п 0 или 1,

которые могут находить применение в качестве средства для сенсибилизации опухолей, отличающихся первичной или вторичной резистентностью к химиотера- певтическим средствам.

Цель изобретения - поиск способа получения новых соединений в ряду производных птеридина, обладающих сенсибилизируюVI ю о Ј ю

CJ

щим действием на устойчивые к адриамици- ну саркомные клетки.

Предлагаемый способ заключается в том, что соединение общей формулы

$&

где Ri, R2, R4 и п имеют указанные значения, один из радикалов Z или Zi означает нукле- офильно заменяемую группу, такую как атом галогена, например атом хлора или брома, а другой радикал Z или Zi имеет указанные для R или Вз значения, или означает нуклеофильно заменяемую группу, такую как атом галогена, например атом хлора или брома, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы

Н - X,(III)

где X имеет указанные значения радикала R или Яз.

Реакцию целесообразно осуществлять в среде растворителя, такого как тетрагид- рофуран. диоксан, бензол, толуол, диметил- сульфоксид или простой диметилгликолевый эфир, при 0-150°С, предпочтительно между комнатной температурой и температурой кипения используемого растворителя или в расплаве. При этом можно использовать акцептор кислоты, например карбонат натрия, триэтиламин или пиридин.

Исходные соединения общих формул (Н) и (III) известны или могут быть получены известными методами.

П р и м е р 1.4-{М-(2-Окси-2-метил-н-про- пил)-этаноламино -2,7-бис-2,6-диметил-мор- фолино}-6-фенил-птеридин.

а)2,7-дихлор-4- Н-(2-окси-2-метил-п- пропил)-этаноламино -6-фенил-птеридин.

15,5 г (0,005 моль) 2,4,7-трихлор-6-фе- нил-птеридина растворяют в 100 мл ацетона и затем добавляют 13,3 г (0,1 моль) М-(2-окси-2-метил-н-пропил)-этаноламина, Перемешивают в течение 20 мин при комнатной температуре и к образовавшейся суспензии прибавляют 200 мл воды. Выделившийся продукт отсасывают, промывают водой и кристаллизуют из метанола - воды в соответствии 95:5.

Выход t9,9 г (97% от теоритеческого), точка плавления 145-147°С.

б)4-{М-(2-окси-2-метил-н-пропил)-эта- ноламино -2,7-бис-{2,6-диметил-морфолин- о)-6-фени л-птеридин.

2,0 т (0.005 моль) 2,7-дихлор-4-(И-(2-ок- си-2-метил-л-пропил)-этаноламино -6-фе- нил-птеридина растворяют в 20 мл диокса- на и вместе с 3,5 г (0,08 моль) 2,6-диметил

10

15 20

25 30 35

40

45 50

55

морфолина нагревают с обратным холо- ДИЛЬНИКОР н течение 30 мин. Затем раствор вливают в воду, выделившийся осадок отсасывают, промывают водой и перекристалли- зовывают из этилового эфира уксусной кислоты.

Выход 2,4 г (84% от теоретического), точка плавления 191-194°С.

П р и м е р 2. 4-{М-Этил-этаноламино)- 2,7-бис-(2,6-диметил-морфолино)6-фенил- птеридин получают из 4-(М-этил-этанолами- но)-2,7-дихлор-6-фенил-птеридина и 2,6-ди- метил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 81% от теоретического, точка плавления 128-138°С (этанол).

П р и м е р 3. 4-(Этанол-изопропанола- мино)-2,7-бис-2,6-диметил-морфолино)-6- фенил-птеридин получают из 4-(этанол-изо- пропаноламино)-2,7-дихлор-6-фенил-птери- дина и 2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 60% от теоретического, точка плавления 192-193°С (метанол - вода в соотношении 4:1).

П р и м е р 4.(2-Окси-2-метил-н-про- пил)-этаноламино -2,7-бис-(2-метил-морфо- лино)-6-фенил-птеридин получают из 4-{М- (2-окси-2-метил-п-пропил-этаноламино -2,7- дихлор-6-фенил-птеридина и 2-метил-мор- фолина аналогично примеру 1.

Выход 74% от теооетического, точка плавления 143-147°С (этиловый эфир уксусной кислоты - петролейный эфир).

TI р и м е р 5. 4-(Этанол-изопропанола- мино)-2,7-бис-(2-метил-морфолино)-6-бен- зил-птеридин получают из 4-(этанол-изо- пропаноламино)-2,7-дихлор-б-бензил- птеридина и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 55% от теоретического, точка плавления 100-105°С.

П р и м е р 6. 4-(Этанол-изопропанола- мино)-2,7-бис-(2-метил-морфолино)-6-(о- толил)-птеридин получают из 4-(этанол-изо- пропаноламино)-2,7-дихлор-6-(о-толил)- птеридина и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 85% от теоретического, точка плавления. 105-110°С (переосаждение из 0,1 н. соляной кислоты).

П р и м е р 7.4- М-{2-Окси-2-метил-н-про- пил)-этаноламино -2,7-бис-(цис-2,6-диметил- морфолино)-6-фенил-птеридин получают из 4- Щ2-окси-2-метил-н-пропил)-этанолами- ,7-дихлор-6-фенил-птеридина и цис- 2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 60% от теоретического, точка плавления 206-209°С (изопропанол).

Применение соединений примеров 1-7 в качестве средства для сенсибилизации опухолей с первичной или вторичной устойчивостью к химиотерапевтическим средствам.

В качестве сравнения применялся 7- бензиламино-4-(М-метил-21-оксиэтиламино}- 2-пиперазино-птеридин.

Действия указанных соединений исследовались на примере резистентных клеток следующим образом.

Пролиферирующие, резистентные к ад- риамицину саркомные клетки S180, выделившиеся из мышей, культивировались в течение 6 дней в присутствии разных концентраций испытуемых веществ. Индикатором цитотоксичного или цитостатического действия концентраций испытуемых веществ является уменьшение роста клеток или отмирание клеток. По окончании опыта косвенно определялось количество жизнеспособных клеток на культуру за счет установления способности жизнеспособных клеток к восстановлению красителя МТТ (бромид 3-(4,5-диметил-тиазол-2-ил)-2,5-ди- фенилтетразолия) до соответствующего формазана. Определялась концентрация испытуемого вещества, способная к уменьшению количества контроля (далее КУю). Испытуемые вещества исследовались как в отсутствие адриамицина, так и в присутствии количества адриамицина (АДР), не задерживающего полиферацию в условиях культивации. Поэтому для каждого испытуемого вещества получались значения KVso (первое - в присутствии АДР, т.е. КУзоАДР, второе - в отсутствие АДР, т.е. КУзо. Разница десятичных логарифмов обоих значений КУзд А log КУвоАДР является мерой повышенной цитотоксичности испытуемого вещества, вызываемой присутствием адриамицина. Кроме того, резистентность клеток к воздействию АДР устраняется.

Экспоненциально растущие, устойчивые к адриамицину или чувствительные к адриамицину клетки S180 помещались в плоскодонные микротитровые пластинки с 96 углублениями (2000 клеток/углубление), каждое из которых содержало 100 мкл питательной среды (RPMI-1640 с содержанием 10% эмбриональной сыворотки крови крупного рогатого скота). Пластинки инкубировались в термостате при 37°С и относительной влажности воздуха 100% в присутствии 5% двуокиси углерода. По истечении 24 ч добавлялось на углубление 50 мкл питательной среды, содержащей разные концентрации испытуемого вещества, и 50 мкл питательной среды без адриамицина или с адриамицином. В течение 6 дней культивации пипеткой подавали в каждое углубление 50 мкл раствора тетра- золиевой соли 5 мг бромида 3-(4,5-диметил- тиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолмя на 5 солевой раствор с фосфатным буфером, разбавленный до использования средой RPMI- 1640 в объемном соотношени 1:5. После 4-часовой инкубации культурная среда осторожно отсасывалась и образовавшийся

0 внутри клеток формазан солюбилизировал- ся добавлением 150 мкл диметилсульфокси- да/углубление. Пластинки кратковременно встряхивались и измерялась оптическая плотность при 570 нм с помощью фотометра

5 (Динатех MR-600). Образование формаззна путем восстановления тетразолиевой соли пропорционально количеству жизнеспособных клеток. Полученные в результате трехкратного анализа средние значения

0 использовались для подсчета значений КУзо (степень разбавления 1:2).

Результаты опыта приведены в таблице.

Данные таблицы подтверждают, что

лтеридины общей формулы (I) отличаются

5 ярковыраженным сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и поэтому в комбинации с алкалоидами из VINCA, эпиподофиллоток- синами или антибиотиками, такими как дау0 норубицин, доксорубицин, блеомицин, митрамицин или митомицин годятся для лечения неопластичных заболеваний для того, чтобы устранить их устойчивость к соответствующей химиотерапии и таким образом

5 обеспечить ослабление опухолей, устойчивых к этим веществам. Птеридины формулы (I) совместно с химиотерапевтическим средством предотвращают то, что устойчивые к терапии субпопуляции опухолей могут пере0 жизать терапию и таким образом вызывать рецидив.

Производные птеридина формулы (I) относятся к категории малотоксичных ве- , ществ.

5 Формула изобретения

Способ получения производных птеридина общей формулы

RI-, ,г N

УRt

iJjLwtiu-Q

где R и Ra - замещенная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиног- руппа;

RI и R2 вместе с находящимся между ними атомом азота образуют N-этил-этано- ламино, N-этил-изопропаноламино, этанол- изопропаноламино,М-(2-окси-2-метил- н-пропил}-этаноламино;

R4 - водород или метил;

п - 6 или 1.

о т л и ч а ю щ и и с я тем, что соединение общей формулы

где Ri, RZ. R4 и л имеют указанные значения; 10

один из рад11капов Z или Zi - нуклео- фильно заменяемая группа, а другой радикал Z или Zi имеет указанные для R или Ra значения или означает также нуклеофиль- ную заменяемую группу, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы

Н-Х,

где X имеет указанные значения R или Ra, с последующим выделением целевого продукта.

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения производных птеридина общей фор-лы (I) где R и Яз - замещенная в положении 2 или NRiRiR, -ГСНЛ,-® . -«э L4 ГМ в положениях 2 и 6 метилом морфолиног- руппа; NRi Ra - N-этилэтаноламино-, Nэтил-изопропаноламино-, этанол-изопропа- ноламино-; 1 - 2-окси-2-метил-п-пропил - этаноламиногруппа; R4 - Н или СНз; п О или 1, обладающих способностью сенсибилизации опухолей и имеющих первичную или вторичную резистентность к химиотерапев- тическим средствам. Цель - создание новых активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединений ф-л (II) и (III) ) NR,R2R% NJy(CH2) zVvTz« III) НХ, где указано выше; один из Z или Zi - нуклеофильная заменяемая группа, а другой - значения для R или RS или также нук- леофильнозаменяемая группа; X R или , с последующим выделением целевого продукта. Новые вещества обладают сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и являются малотоксичными соединениями. 1 табл.

Нет активности даже о концентрации 100 мкг/мл.