Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при диагностике чумы.
Целью изобретения является упрощение и повышение чувствительности способа.
Способ осуществляют следующим образом.
С исследуемых образцов делают посев на питательную среду, включающую селективный агент (агар Хоттингера рН 7,2) и антибиотик фосфомицин в концентрации 50-100 мкг/мл. Чашки с посевами инкубируют в термостате при 28°С. Учет результатов производят через 24-48 ч.
П р и м е р 1. Готовят бактериальную взвесь штамма вульгарного протея 19 в 0,9%-ном растворе хлористого натрия концентрацией 10 м.к./мл и смешивают с взвесью культуры штамма чумного микроба 231 концентрацией 104 м.к./мл в одной пробирке в объемным соотношениях 1:1. Затем смесь в количестве 0,2 мл высевают на пластинки агара, содержащего фосфомицин в концентрации 25, 50, 100 и 200 мкг/мл, Посевы инкубируют в термостате 24-48 ч. На чашках с 25 мкг/мл фосфомицина наблюдается рост изолированных колоний чумного микроба и единичных изолированных колоний вульгарного протея. На чашках с 50,100 и 200 мкг/мл фосфомицина роста вульгарного протея не отмечается. На среде, содержащей 200 мкг/мл фосфомицина, количество колоний возбудителя чумы снижается (см. табл.).
П р и м е р 2. Бактериальную взвесь штамма кишечной палочки К-12 в 0.9%-ном растворе хлористого натрия концентрацией 107 м.к./мл смешивают с взвесью культуры штамма чумного микроба 231 концентрацией 104 м.к./мл в соотношении 1:1. Затем смесь по 0,2 мл высевают на пластинки агара Хоттингера рН 7,2 с фосфомицином в концентрации 25, 50, 100 и 200 мкг/мл. Через 24-48 ч на чашках с 25 мкг/мл при 28°С наблюдается рост изолированных колоний чумного микроба и единичных изолированных колоний кишечной палочки. На чашках с 50. 100 и 200 мкг/мл фосфомицина роста кишечной палочки не отмечается. На чашках с 200 мкг/мл фосфомицина число колоний возбудителя чумы снижается (см. табл.).
П р и м е р 3. Бактериальную взвесь штамма брюшнотифозных бактерий ГУ24 в 0,9%-ном растворе хлористого натрия концентрацией 10 м.к./мл смешивают с взвесью культуры штамма чумного микроба 231 концентрацией 10 м.к./мл в объемном соотношении 1:1. Затем смесь по 0,2 мл
высевают на пластинки агара рН 7,2 с фосфомицином в концентрации 25, 100 и 200 мкг/мл. Через 24-48 ч на засеянных чашках при 28°С с 25 мкг/мл фосфомицина наблюдался рост изолированных колоний чумного
микроба и единичных изолированных колоний сальмонелл. На чашках с 50, 100 и 200 мкг/мл фосфомицина роста сальмонелл не отмечалось. На среде, содержащей 200 мкг/мл фосфомицина, количество колоний
возбудителя чумы снижается (см. табл.).
Установлено, что оптимальным количеством фосфомицина в среде является концентрация 50-100 мкг/мл.
Предлагаемый способ по своей чувствительности превосходит известный способ выделения чумного микроба, так как не ин- гибирует роста как типичных, так и дефектных по собственным плазмидам (pFra/Tox, pPst I) штаммов чумного микроба. Кроме
того, он позволяет выделять возбудитель чумы при посеве единичных клеток и одновременно подавлять рост его антагонистов при больших посевных дозах. Способ может быть использован для выделения возбудителя чумы
из органов загнивших животных, содержимого кишечника и объектов внешней среды. Формула, изобретения Способ выделения Yersinia pestis путем посева исследуемых образцов на питательную среду, включающую селективный агент, инкубирование посевов при 28°С и учет результатов через 24-48 ч, отличающий- с я тем, что, с целью упрощения и повышения чувствительности способа, в качестве
селективного агента используют антибиотик фосфомицин в количестве 50-100 мкг/мл среды.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ФТ-ЗЕЛЕНАЯ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЧУМНОГО МИКРОБА | 1992 |
|
RU2063441C1 |
| Штамм бактерий JeRSINIa реSтIS, предназначенный для проведения генетических и эпизоотологических наблюдений | 1989 |
|
SU1712405A1 |
| НАБОР ШТАММОВ БАКТЕРИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОБУЧЕНИЯ ВОПРОСАМ МИКРОБИОЛОГИИ И МЕТОДАМ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЧУМЫ | 2016 |
|
RU2642322C1 |
| СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ЭПИДЗНАЧИМОСТИ ЧУМНОГО МИКРОБА В БЛОХАХ | 1999 |
|
RU2160781C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ YERSINIA PESTIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ТЕСТ-ШТАММА ЦЕНТРАЛЬНО-КАВКАЗСКОГО ВЫСОКОГОРНОГО ПРИРОДНОГО ОЧАГА ЧУМЫ | 2006 |
|
RU2317325C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ YERSINIA PESTIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ТЕСТ-ШТАММА, РЕЗИСТЕНТНОГО К ЧУМНОМУ БАКТЕРИОФАГУ Л-413 "С" | 2000 |
|
RU2203316C2 |
| СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ИММУНОГЕННОСТИ ВАКЦИОННОГО ШТАММА ЧУМНОГО МИКРОБА | 2019 |
|
RU2727258C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ YERSINIA PESTIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ УТОЧНЕНИЯ СТРОЕНИЯ И ФУНКЦИИ ПЛАЗМИДЫ СИНТЕЗА ФРАКЦИИ I И ТОКСИГЕННОСТИ ЧУМНОГО МИКРОБА | 1991 |
|
RU2034024C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ YERSINIA PESTIS - ПРОДУЦЕНТ ФРАКЦИИ I ЧУМНОГО МИКРОБА | 1991 |
|
RU2031938C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ YERSINIA PESTIS ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ КАК ТЕСТ - ОБЪЕКТ ДЛЯ УТОЧНЕНИЯ СТРУКТУРЫ И ФУНКЦИИ ПЛАЗМИДЫ КАЛЬЦИЙЗАВИСИМОСТИ У ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ | 1991 |
|
RU2034023C1 |
Использование: медицина, микробиология, а именно выделение возбудителя из кантаминированного патологического материала и объектов внешней среды. Сущность изобретения: с исследуемых образцов делают посев на питательную среду - агар Хот- тингера рН 7.2, содержащую селективный агент - фосфомицин - в концентрации 50- 100 мкг/мл. Чашки с посевами инкубируют в термостате при 28°С в течение 24-48 ч и проводят учет роста бактерий/Питательная среда с фосфомицином подавляет рост микробов рода Е. coli, Proteus vulgarls. Salmonella typhimurium не ингибирует роста как типичных, так и дефектных по плазми- дам pFra/Tox, pPst I штаммов Yerslnta pestis. 1 табл. 4 OJ о ел ел
Выделение Yersinia pestis из смешанных культур на агаре с различными концентрациями фосфомицина
