СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВИНЫ Советский патент 1965 года по МПК C07C273/00 G01N21/78 

Предложен способ количественного определения мочевины в смесях при обработке спиртового раствора пробы последовательно соляной кислотой, растворами гипохлорита натрия и фенола с последующим колориметрированием пробы.

Ход определения. Берут небольшую навеску пробы, в которой намечается определить мочевину, в химически чистую пробирку, добавляют 4 мл спирта, тщательно взбалтывают и отфильтровывают в другую пробирку через обеззоленный фильтр. К прозрачному фильтрату приливают в строгой последовательности 2-3 капли 0,1 в. соляной кислоты, 0,5 мл 2,5о/о-ного раствора гипохлорита натрия и 0,5 мл 5о/оного раствора фенола, взбалтывая после добавления каждого реактива.

Через несколько минут появляется специфическая окраска зеленого цвета, характерная для мочевины. Чем больще мочевины содержится в определяемой навеске, тем интенсивнее зеленая окраска. Так как имеется прямая зависимость между содержанием мочевины в спиртовом растворе и интенсивностью зеленой окраски, то , построив заранее калибровочную кривую (по интенсивности зеленой окраски на мочевину), по фотоэлектроколориметру точно определить содержание мочевины в различных исследуемых веществах. Другие азотсодержащие вещества такие, как аминокислоты, соли аммония, продукты азотистого обмена, не мещают определению мочевины.

Предложенный способ дает возмол ность определить 0,00005 г мочевины в 5 мл конечного объема раствора (после добавления всех необходимых реактивов).

Пример. Количественное определение мочевины в искусственных смесях.

Наибольщее значение представляют смеси, где мочевина иснользуется как заменитель белковой добавки в корма жвачным животным.

Обычно мочевину добавляют в корма и смесь с концентратами из расчета в среднем 3-5 кг мочевины на 1 г корма. Добавляется мочевина в виде водного раствора 1 : 3, т. е. 30-35о/оного раствора мочевины. Например, необходимо определить количественное содержание мочевины в комбикормах, обработанных раствором мочевины. Для этого берут 1 г комбикорма в химически чистую пробирку, добавляют 10 мл 96° этилового спирта и тщательно взбалтывают для полного извлечения мочевины, которая хорощо растворяется в спирте. Через 5-7 мин смесь ф|ильтруют в другую пробирку. На определение берут 4 мл спиртового фильтрата, к которому приливают 3 капли 0,1 н. НС1, 0,5 мл 2,5о/о-ного раствора гипохлорита натрия и 0,5 мл 5о/о-ного раствора фенола, тщательно взбалтывая после добавления каждого реактива. Через несколько минут после внесения последнего реактива образуется специфическая для мочевины зеленая окраска. По интенсивности зеленой окраски определяют количество мочевины во взятой пробе по заранее построенной калибровочной кривой на фотоэлектроколориметре (светофильтр № 3, длина волны 460 ммк). Для построения калибровочной кривой берут объемы стандартного раствора, содержащего в 1 мл 0,05 жг мочевины, от 0,1 лм до 1,0 мл с интервалом 0,1 мл.

При одинаковой интенсивности окраски анализируемого раствора и 0,4 мл стандартного

раствора - в 1 г анализируемого раствора будет содержаться 0,02 мг мочевины, а в 1 кг корма, следовательно, будет 50 мг мочевины.

Предмет изобретения

Способ количественного определения мочевины в смесях, отличающийся тем, что спиртовой раствор пробы последовательно обрабатывают соляной кислотой, растворами гипохлорита натрия и фенола с последуюн им колориметрированием.