Способ моделирования миокардита Советский патент 1992 года по МПК G09B23/28 

1

(21)4877699/14

(22) 22.08.90

(46) 23.09.92.Бюл.МЗб

(71)Киевский медицинский институт им. акад. А,А.Богомольца

(72)В.Г.Бардов, В.В.Колпак, Н.А.Колесова, А.Ф.Киселева, С.Т.Омельчук, Е.В.Иванов и Н.В.Жучкова

(бб)Музыкантова B.C. Сравнительная гисто- морфологическая характеристика некоторых экспериментальных миокардитов. Дисс. канд. мед.наук, М., 1971 г. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ МИОКАРДИТА

(57) Изобретение относится к экспериментальной терапии и может быть использовано для изучения динамики воздействия факторов различной природы на заболевание миокарда воспалительного генеза. Целью изобретения является повышение адекватности модели клиническому течению заболевания за счет воспроизведения нескольких этапов развития патологии. Поставленная цель достигается тем, что животному внутривенно вводят кардиоци- тотоксическую сыворотки, а также предварительно внутривенно, медленно вводят

адреналин в дозе 0,3-0,5 мг/кг. Такое последовательное применение адреналина и кардиоцитотоксической сыворотки обеспечивает комбинированность влияния действующих начала на сердечную мышцу, что приближает данную модель к клиническому течению заболевания, обеспечивая при этом высокую воспроизводимость патологии у животных.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной терапии, и может быть использовано для изучения динамики воздействия факторов различной природы на заболевание миокарда воспалительного генеза.

Цель изобретения - повышение адекватности модели клиническому течению заболевания.

Поставленная цель достигается тем, что в известном способе моделирования миокарда путем внутривенного введения животному кардиоцитотоксической сыворотки, согласно изобретению, предварительно внутривенно, медленно вводят адреналин в дозе 0,3 - 0,5 мг/кг.

Способ осуществляется следующим образом.

Кроликам внутривенно, медленно вводится адреналин в дозе 0,3 - 0,5 мг/кг. Ве(Л

С

щество вводится в краевую ушную вену, что обеспечивает первоочередное и непосредственное действие его на сердце. Медленное введение предупреждает одномоментное массированное поступление адреналина в кровоток, что могло бы закончиться гибелью животного.

Сыворотка вводится четырехкратно в количестве 2 мл, 1 мл, 0,5 мол, 0,5 мл с промежутком с три дня.

Указанное количество сыворотки соответствует массе животного около 2 кг. С увеличением массы животного увеличивается и количество вводимой сыворотки.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример. Кролику породы Шиншилла, массой 2050 г в краевую ушную вену введен 0,3%-ный раствор адреналина гидрохлорида, в дозе 0,3 мг/кг. Через некотоxj о

4 О XI XI

рое время в животного отмечается одышка, тахикардия, оно становится малоподвижным, вялым, слабо реагирует на окружающее.

Такое состояние сохраняется в течение 2ч.

Затем дыхание и общее состояние восстанавливаются при сохранении тахикардии. На третий день после введения адреналина вводится кардиоцитотоксиче- екая сыворотка в количестве 2 мл внутривенно. После этого сыворотка вводится еще три раза в количестве 1 мл, 0,5 мл, 0,5 мл с промежутком в три дня.

Через три дня после последнего введе- ния сыворотки животное забирается путем воздушной эмболии.

У экспериментального животного проведен комплекс морфологических, гистохимических и иммунологических исследований.

Микроскопически в миокарде является умеренное расширение просвета сосудов гемомикроциркуляторного русла с умеренными дистрофическими изменениями эндо- телия капилляров и венул, отеком подэнотелиальной базальной мембраны и переваскулярной соединительной ткани.

Характерным является также очаговое развитие переваскулярных клеточных ин- фильтратов, состоящих из лимфоцитов, плазмоцитов, макрофагов, нейтрофильных гранулоцитов, лаброцитов,

Важным микроскопическим признаком миокардита являются очаговые дистрофиче- ские изменения кардиомиоцитов, протекающие в основном по типу мутного набухания. Мышечные клетки несколько увеличены в объеме, отечны, с плохо конту- рируемой поперечной исчерченностью, из- мененными тинкториальными свойствами. Ядра их преимущественно несколько увеличены, набухшие, гипохромные. Часть ядер наоборот - уменьшена в размерах, гипер- хромна. Гистохимическое изучение актив- ности окислительно - восстановительных ферментов в миокарде выявило их значительную мозаичность, проявляющуюся очаговым уменьшением в клетках количества конечного продукта (диформазана), что в це- лом свидетельствует о снижении уровня энергетических процессов в кардиомиоци- тах.

Отражением развития воспалительного процесса в миокарде являются показатели иммунной системы. Сдвиги отмечаются со стороны как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета. Титр комплемента в опытной группе составил 19,8 ± 0,55 по

сравнению с контрольной группой 26,0 ± 1,48 (р 0,01). Количество лизоцима в сыворотке крови опытных животных было равно 17,01 ± 1,17 мкг-мл по сравнению с контролем 10,3 ± 1.12 мкг/мл (Р 00.01), что говорит о начале развития компенсаторных реакций на воспаление.

Содержание ЕАС - РОК (комплементарное розеткообразование) в опытной группе составило 30,75± 2,5, в контроле 21,0± 1,7 (р 0,05).

Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ, морфологический учет) показала следующие результаты - в опыте 37,5 ± 0,86, в контроле 44,0 ± 1,7(Р 0,01).

Таким образом, морфологическое, гистохимические и иммунологические исследо- вания свидетельствуют о развитии в миокарде подопытных животных данной группы признаков миокардита.

Пример. Кролику породы Шиншилла, массой 2050 г в краевую ушную вену введен 0,3-ный раствор адреналина гидрохлорида в дозе 0,5 мг/кг. Непосредственно после введения отмечаются выраженные изменения общего состояния животного (сильная одышка, тахикардия, глухость сердечных тонов).

Кролик с трудом сохраняет равновесие, малоподвижен, слабо реагирует на различные раздражители. Такое состояние сохраняется в течение последующих 2 ч, после чего выраженность общих изменений проходит. При этом полное внешнее восстановление наблюдается лишь на вторые сутки. На третий день после введения адреналина вводится кардиомиотоксическая сыворотка в количестве 2 мл внутривенно, медленно. Сыворотка вводится еще трижды в количестве 1 мл, 0,5 мл, 0,5 мл с промежутком в три дня.

Через три дня после последнего введения сыворотки животное забивается.

При проведении комплекса морфологических, гистохимических и иммунологических исследований установлены изменения, характерные для подострого течения миокардита.

Диагностически важным является выраженное очаговое развитие переваскулярных клеточных инфильтратов, состоящих из лимфоцитов, макрофагов, нейтрофильных гранулоцитов, лаброцитов.

Признаком развития миокардита являются очаговые дистрофические изменения кардиомиоцитов, протекающие в основном по типу мутного набухания. Гистохимическое изучение активности окислительно- восстановительных ферментов в миокарде показало очаговое изменение в клетках количества диформазана, что свидетельствует о снижении уровня энергетических процессов в кардиомиоцитах.

Развитие воспалительного процесса в миокарде подтверждает показатели иммун- ной системы. Так титр комплемента составил 20,8 СНзо, по сравнению с контролем 26,0 ± 1,48 CHso, что указывает на угнетение гуморального звена иммунитета. В то же время отмечается увеличение количест- ва лизоцима (в опыте 17,1 кмг/мл, в контроле 10,3 ± 1,12 мкг/мл), что говорите начале развития компенсаторных образований, в опыте составило 32, в контроле 21,0 ± 1,7. РБТЛ (морфологический учет) показала еле- дующий результат - в опыте 37, в контроле 44,0 ± 1,7.

Таким образом, данные морфологических, гистохимических и иммунологических

Сравнительная характеристика иммунологических, морфологических и гистохимических показателей по клиническим и экспериментальным данным

Повышение количества Т - лимфоцитов в периферической крови дл 30,3$, положительная РБТЛ.,. Увеличение В-популяции лимфоцитов о 13,0 (норма) до 21),3% (инфекционно-аллергический миокардит).

Гистохимические.изменения

Изменение активности сукцинатде- гидрогеназы, сопровождаемое ло- степенно нараставшим, а затем убывающим количеством липидов в миокардинальных клетках

Морфологические изменения Не выражены

исследований свидетельствуют о развитии в миокарде подопытного животного воспалительного процесса и соответствуют направленности измерений, определяемых при клиническом течении миокардита.

Преимущества способа иллюстрирует таблица. Из таблицы видно, что предлагаемый способ является более адекватным кли- ническому течению заболевания, чем способ - прототип.

Формула изобретения Способ моделирования миокардита, включающий введение кардиоцитотоксиче- ской сыворотки, отличающийся тем, что, с целью повышения адекватности модели клиническому течению заболевания, предварительно внутривенно вводят адреналин в дозе 0,3 - 0,5 мг/кг.

Активность гликолитических Ферментов умеренно повышенаt что выявляется увеличенным количеством гранул диформазана при изучении активности ЛДГ.

Это также отражает развитие при моделируемой патологии гипоксии миокарда, являвшейся важным патогенетическим механизмом альтерации сердца при миокардите у человека.

Клеточная инфильтрация периваскулярной зоны, дистрофия мнкрокардиоцитов