Способ определения глюкозы в крови Советский патент 1992 года по МПК G01N33/66 

Изобретение относится к области медицины, а именно к исследованию состояния углеводного обмена у больных сахарным диабетом.

Целью изобретения является снижение токсичности реактивов и стабилизация окраски продуктов реакции.

Способ осущестляется следующим образом.

В центрифужную пробирку наливают 0,9 мл раствора трихлоруксусной кислоты на 0,4 мМ КН2Р04, берут с помощью капилляра 0,1 мл цельной крови из пальца, выдувают в пробирку. Смесь взбалтывают и центрифугируют 5 мин при 3000 об/мин. К 0,5 мл центрифугата добавляют2,5 мл сульфонило- вомолибденового реактива. Помещают на 10 мин в кипящую водяную баню. Если после охлаждения появилась мутность, пробу центрифугируют 5 мин. Параллельно проводят определение в стандартной пробе, содержащей известное количество глюкозы (4,5 мМ), добавляя 0,1 мл стандартного раствора в пробу. Колориметрируют в кювете шириной 0,5 см с красным светофильтром против реактивов.

Расчет производят по формуле:

Соп-ОП

ст

х4,5 мМ

где Соп - концентрация глюкозы в опытной пробе;

Еоп - экстинкция опытной пробы;

Ест - экстинкция стандартной пробы;

4,5 мМ - концентрация глюкозы в стандартной пробе.

Метод воспроизводим с точностью ±3%.

Пример 1.Из пальца больного сахарным диабетом брали 0,1 мл цельной крови, выдували в пробирку с 0,9 мл раствора 3% ТХУ на 0,4 мМ КН2РО4, перемешивали, центрифугировали 5 мин при 3000 об/мин, 0,5 мл центрифугата помещали в сухую пробирку, добавляли 2,5 мл сульфанилофомо- либденового реактива. Нагревали 10 мин на кипящей водяной бане. (Параллельно проводили определение в стандартной пробе, содержащей 4,5 мМ раствор глюкозы). Коло- риметрировали в кювете 0,5 см с красным светофильтром против реактивов.

Расчет по формуле:

Еоп - 0,22

Ест-0,11,

Ё

ч|

4 О О О Ю

О 22 тогда Соп тррг 4,5 мМ 9 мМ (9,0 ммоль/л)

Способ обеспечивает следующие преимущества: использование водорастворимых мзлотоксичных реактивов (молибдат аммония, сульфониловая кислота, калия фосфат однозамещенный, трихлоруксусная кислота).

Формула изобретения

Способ определения глюкозы в крови,

включающий забор пробы крови из пальца,

внесение пробы в пробирку, содержащую

3%-ный раствор трихлоруксусной кислоты,

0

центрифугирование, добавление к суперна- танту реагента, кипячение на водяной бане, охлаждение, с последующим колориметри- рованием в области 600-650 нм, отличающийся тем, что, с целью снижения токсичности реагента и стабилизации окраски продуктов реакции, в качестве реагента используют сульфаниловомолибденовый реактив, а раствор трихлоруксусной кислоты готовят путем растворения 3 г сухого вещества в 100 мл 0,4 мМ однозамещенного фосфата калия.

Использование: в клинической лабораторной диагностике. Цель - снижение токсичности реактивов и стабилизация окраски продуктов реакции. Сущность изобретения: берут пробу крови из пальца, вносят пробу в пробирку, содержащую 3%-ный раствор ТХУ, приготовленный путем растворения 3 г сухого вещества в 100 мл 0.4 мМ КНЬРОз. затем центрифугируют, добавляют к супер- патанту в качестве реагента сульфанилово- молибденовый реактив, кипятят на водяной бане, охлаждают и колориметрируют в области 600-650 нм.