Способ моделирования немедленной аллергии Советский патент 1992 года по МПК A61K31/715 G09B23/28 

Изобретение относится к области медицины, в частности к аллергологии и может быть использовано для отбора и апробации противоаллергических средств и разработки новых способов профилактики и лечения аллергических заболеваний.

Известны способы моделирования немедленной аллергии.

Указанные способы длительны в осуществлении, т.к. предусматривают длительную иммунизацию и сложные манипуляции при введении антигенов.

Наиболее близок к заявленному способ моделирования немедленной аллергии, включающий последпгательное введение в дыхательные пути 0,1 % раствора гистамина и аллергена амброзии.

Недостатком указанного способа является получение низкихтитров реагинов (IgE- антител) в гомогенатах трахеи и легких, что затрудняет оценку влияния различных противоаллергических средств на развитие немедленной аллергии, не позволяет выявить дозозависимость эффекта.

Целью изобретения является повышение адекватности модели за счет стимуляции lgE-антителообразования.

Поставленная цель достигается тем, что вместо одного медиатора немедленной аллергии - гистамина перед введением аллергена вводят полиглюкин (декстран мол.м. 60000± 10000 Д), вызывающий массивную дегрануляцию тканевых безофилов в большом количестве расплагающихся по ходу

Х|

-Ч

XI

4 СО

дыхательного тракта и способствующий т.о. высвобождению из них помимо гистамина большого количества различных биологически актионых веществ (серотонин. гепарин, простагландины и др.) разносторонние действия которых индуцируют выраженные проявления немедленной аллергии. Такое техническое решение позволяет получить модель немедленной аллергии, аналогичной аллергическому процессу, развивающемуся у больных аллергическими заболеваниями, что дает возможность изучать механизмы формирования различных форм аллергии немедленного типа в эксперименте и на основе этого разрабатывать физиологически адекватные способы направленной коррекции этого патологического состояния.

Способ поясняется примером выполнения.

Крыс линии Вистар обоего пола, массой 150-250 г., 3-4-х месячного возраста иммунизировали аллергеном амброзии, который закапывали в оба носовых хода в количестве 0,,5 мл на фоне предварительного (за 30-50 мин) закапывания 0,1% раствора пол- илюкина. Контрольным крысам аллерген вводили на фоне закапывания 0,1% раствора гистамина. Содержание lgE-антмгел в го- могенатах трахеи и легких определяли через 48 ч после введения антигена в реакции непрямой дегрануляции тучных клеток.

Показано, что (табл.1) предшествующее введение антигена закапывание 0,1% раствора полиглюкина вызывает достоверно более выраженное образование lgE-анти- тел втрахее и легких, чем закапывание 0,1 % раствора гмстамипэ.

Таким образом, получена модель немедленной аллергии, отличающаяся высоким содержанием lgE-антитсл в органах дыхания, что позволяет использовать ее для тестирования эффективности идозозависи- мости противоаллергических средств и изучать конкретные механизмы их действия.

Эксперименты проведены на 30 крысах (тридцати)линии Вистар, 3-4-месячного возраста. Животным закапывали в оба носовых хода по 0,03-0,05 мл 0,1% раствора поли- глюкинэ. Через 30-40 мин после чего в носовые ходы инстиллироеали аналогичное количество аллергена амброзии (Ставропольский НИИ вакцин и сывороток). Конт- ро льным животным вместо полиглюкина аналогичным образом вводили 0,1% раствор гистамина. через 48 ч определяли содержание дЕ-антител в гомогенатах трахеи и легких опытных и контрольных животных,

Показано, что образование lgE-антител у крыс, получивших 0,1% раствор полиглюкина,значителы-ю и достоверно превышает таковое у контрольных животных. Выявленные антитела относились именно к IgE, поскольку прогревание гомогенатов при 56°С

полностью снимало их способность вызывать дегрануляцию интактных тканевых ба- зофилов при добавлении аллергена амброзия. Принадлежность полученных антител к IgE подтверждена также о реакции

пассивной кожной анафилаксии.

С помощью прототипа возможно определить подавляет ни исследуемое на наличие противоаллергической активности вещество образование lgE-антител в органах дыхания, а также обладает ли оно am и- гистаминным действием.

С помощью предложенного способа возможно тестирование веществ, обладающих не только антигистаминным действием,

но и веществ, блокирующих оффект серото- иина, ингибиторов простагландинов, а также, что особенно важно вещество, стабилизирующих мембраны тучных клеток. Как видно из данных, представленных в

табл.2, гистаминовэя модель аллергии для этой цели не приемлема.

Кроме того, введение полиглюкипа позволяет стимулировать Е-антигелогенез о трахее и лег ких, индуцируя образование достоверно более высокого уровня антител по сравнению с введением гисгзмина, что в свою очередь повышает точность исследования противоаллергической активности веществ и повышает порог определения

возможной дозы препарата.

В качестве примера приводим данные по влиянию ловамизола на образование lgE-аитител в трахее и легких крыс при использовании гистаминовой и полиглюкиновой модели аллергии.

Как видно из данных, представленных в табл.3, из-за недостаточно высокого исходного содержания lgE-антител при гистами- новой аллергии удается выявить

подавляющий эффект левамизола только при использовании его вдозеБООмкг/мл. В то же время при использовании полиглга- киновой модели аллергии выявляется суп- рессорное в отношении igE-антител

влияние левамизола уже в дозе 100 мкг/мл.

Заявляемое изобретение может быть использовано для скрининга противоаллергических средств, определения фармэколо- гически адекватных дозировок для проявления их действия, а также для изучения механизмов их противоаллергического эффекта и механизмов формирования немедлен -ой аллергии,

Формула изобретения Способ моделирования немедленной аллергии, включающий введение аллергена в носовые ходы, отличающийся тем, что,

с целью повышения адекватности модели за счет стимуляции 1дЕ-энтмтелообразорг ни -, за 30-60 мин до введения аллергена закапывают 0,1 %-ный раствор полиглюкина.

Изобретение относится к области биологии и медицины и может быть использовано для отбора и апробации противоаллергических средств и разработки новых способов профилактики и лечения аллергических заболеваний, а также для изучения механизмов формирования аллергического процесса. Цель - повышение адекватности модели за счет стимуляции IgE - антигелообразования. Для этого аллерген закапывают в носовые ходы на фоне предварительного введения 0,1%-ного раствора полиглюкина, являющегося деграну- лятором тканевых безофилов и вызывающего выделение из них большого количества биологически активных веществ, что приводит к достоверному повышению образования IgE - антител в трахее и легких. Это позволяет получить модель немедленной аллергии, адекватной аллергическому процессу, развивающемуся у больных аллергическими заболеваниями, которую возможно использовать для тестирования эффективности и дозозависимости противоаллергических средств. СП с

Содержание lgE-антител в трахее и легких крыс, иммунизированных аллергеном амброзии на фоне предварительного введения 0,1 % раствора полиглюкина (опыт) или раствора

гистамина (контроль)

Таблица 2

Влияние интала (стабилизатор мембраны тучных клеток) на образование lgE-антител в органах дыхания крыс

Таблица 1

Таблица 3 Влияние левэмизола на образование lgE-антител в органах дыхания