Бромид 2,3,5,6,-тетрагидро-6-фенил-7-фенацилимидазо [2,1,- ТИАЗОЛИЯ,ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ИММУНОРЕГУЛИРУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ Советский патент 1982 года по МПК C07D513/04 A61K31/429 A61P33/10 A61P37/04 

Изобретение относится к новому биологически активному соединению, а именно к бромиду 2,3,5,6-тeтpaгидpo-6-фeнил-7-фeнaцилимидaзo 2, Ы тиазолия формулы СНгСОСеН} as s, ..L:I проявляющему иммунорегулирующую ак тивность, и может найти применение в медицине. Известно, что хлоргидрат ot(-)2,3,5,б-тетрагидро-6-фенилимидазо 2,1-1 тиазола (левамизол) - анти гельминтный препарат широкого спек ра действия обладает иммунорегуляторной активностью, что обусловливает его применение в качестве иммуностимулятора, в то время как ег оптически неактивный аналог - хлор гидрат DL-2,3, 5,6-тетрагилро-б-фенилимидазо 2,l-b -тиазола (тетрамизол) такой активностью практически не Обладает 1. Целью изобретения является расширение арсенала средств воздейств «а живой организм. Предлагается соединение формулы 1 в качестве вещества, обладающего иммунорегулирующей активностью. Производное имидазотиазола формулы Г получают взаимодействием DL2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо 2,1-Ь тиазола с фенацилбромидом в органическом растворителе. Пример 1. Бромид 2,3,5,6тетрагидро-6-фенил-7-фенацилимидазо2,1-Ь -тиазолия. Растворяют 2,04 г (0,01 моль) .2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо 2,1-Ъ тиазола в 20 мл ацетона и к раствору прибавляют раствор 2 г (0,01 моль) Ц)-бромацетофенона в 10 мл ацетона. Через 12 ч осадок отфильтровывают, промывают ацетоном. Получают 3,4 г (85%) бромида 2,3, 5,6-тетрагидро-6-фенил-7-фенацилимидазо 2,1-Ъ -тиазолия, т.пл. 109ИО°С (из смеси изопропиловый спиртпетролейный эфир). Найдено, %: Вг 19,49; S 7,71. H gBrNopS. Вычислено, %: Вг 19,81; 5 7,95. Испытания соединения формулы 1 на биологическую активность прово дили следующим образом.

Эффективность иммунорегуляторного действия иccлeдye Ж)гo соединения формулы 1 оценивали, сопоставляя ег влияние на иммунные реакции с действием, оказываемым в аналогичных условиях стандартным препаратом левамиЭОЛОМ фирмы Гедеон Рихтер (Декарис).

Влияние указанных препаратов на образование антител определяли в

Группа мышей,X tmy%

получившихсмертИмуран и физиологический раствор 3,OiO,03,OtO,071,2

Имуран и левамизол5,3to, 595, It 0,6О

Имуран и соединение формулы 1. 5,5tO,43 5,010,58 О

td(l,n)5,9, ,05;td(I,n) 3,5, Р 0,05;

td(l,ni)r6,l, ,05;td(I,Ul) 3,5, Р 0,05.

Статистическую, обработку результатов титрования антител проводили по методу Левинсона, где: X - средняя величина; средняя ошибка; d - кратность разведения; td - разность средних показателей; Р - достоверность.

Как видно из данных, приведенных в табл.1, введение исследуемого препарата в такой же степени, как и введение левамизола, значительно уменьшает смертность животных, обусловленную имураном. У мышей, получавших исследуемый препарат, как и у животных, которые получали левамизол, увеличились титры гемолизинов и агглютининов по сравнению с мышами, получавшими в те же сроки разводящую жидкость.

Поскольку одним из существенных зффектов левамизола является способность угнетать синтез реагинов, обусловливающих развитие аллергических реакций заболеваний немедленноэкспериментах на иммунодефицитных .мышах, получавших до иммунизации иммунодепрессор имуран.

Опыты проводили на 21 беспородной белой мыши весом 15-18 г.

Влияние левамизола и исследуемого препарата на образование гемолизинов, агглютининов и смертность животных, получавших имуран, показано в табл.1.

Таблица

НОСТИ Агглютинины

го типа, было проведено сравнительное изучение влияния предлагаемого препарата на образование реагинов у крыс. Для этого крысам линии WAY закапывали по 0,05 мл0,1%-ного раствора гистамяна в оба носовых хода и через 40 мин закапывали такое же количество 0,05%-ного раствора левамизола или исследуемого препарата, а через 15 кмн после зтого - по мл стандартного аллергента из пыльцы амброзии, содержащего lOOOOPNU/мл.

Контрольным животным вместо исследуемого препарата закапывали физиологический раствор в том же количестве. Через 48 ч после иммунизации животных забивали и готовили экстракты трахеи и легких из расчета 0,1 мл физиологического раствора на 10 мг ткани. Содержание реагинов определяли в реакции непрямой дегрануляции тучных клеток.

Содержание реагинов гомегенатах трахеи и легких крыс, получавших физиологический раствор, левамизол или исследуемый препарат до введения аллергента дано в табл.2.

Таблица2

1 Физиологический

раствор17,5 tl,2

И Левамиэол

Соединение формулы 1 7, 310,8

Ш

Как следует из приведенных в табл.2 данных, по способности угнетать образование реагинов изучаемое вещество не уступает левамиэолу.

Влияние исследуемого препарата на развитие реакций гиперчувствительности замедленного типа (гЗТ) изучали в опытах на морских свинках и мышах.

ГЗТ у морских свинок вызывали вве дением в подушечку задних лап по 0,1 мл 0,4%-ного раствора динитрохлорбензола (ДНХБ) в 25 -ном спирте. Через 14 дней аналогичным образом вводили такое же количество ДНХБ (разрешающая доза). За сутки перед Для индукции ГЗТ у мышей сенсибилизирующую дозу антигена (10 ти- 60 моцитов крысы, убитых прогреванием в течение 1 ч при 56°С) вводили в подушечки обеих задних лап в объеме 0,04 МП. Разрешающую дозу антигена (10 убитых тимоцитов) вводили ана18,1± 1,3

6,It 1,7

7,41 0,2

7,0t 0,4

сенсибилизирующим и за сутки перед разрешающим введением ДНХБ в подушечку опытной лапы инъекцировали 0,1 мл 0,01 или 0,05%-ного раствора левамизола или исследуемого препарата, в контрольную лапу вводили такое же количество фаз физиологического раствора. Реакцию оценивали через сутки после введения разрешающей дозы ДНХБ, измеряя температуру подошвенных поверхностей и толщину стоп контрольной и опытной лап. Статистическую обработку проводили по методу прямых разностей, достоверность определяли по таблице Стьюдента. Результаты приведены в табл.3.

Та1}лица3 логичным дЛособом на пятые сутки после сенсибилизации. За 4 ч до сенсибилизирующей инъекции антигена вводили 0,01 или 0,05%-ный раствор левамизола или исследуемогЪ препарата в подушечку одной из .лап, в противоположную вводили такое же

KujniuecTBO физиологического раствора. Выраженность реакций оценивали,

Как ВИДНО из даииых, приведенных в табл. 3 и 4, оба препарата в дозе 0,01% стимулируют, а в дозе 0,05 подавляют развитие Г§Т.

LDyo определяли на белых беспородных мышах обоего пола весом 1820 г. .Мышам подкожно вводили в объеме 0,1 МП препарат в дозе от 300 до 600 мг/кг с интервалом 50 мг/кг. Учет результатов проводили через 24 ч после введения. USjo рассчитывали по Керберу (1931) и Першииу.

Для соединения формулы 1 LD то составляет 442 мг/кг, для левомизо.ла - 121 мг/кг.

сопоставляя вес контрольных и опытных лимфоузлов. Результаты.приведены в

Таблица4

Формула изобретения Бромид 2,3,5,б-тeтpaгидpo-б-фeнил-7-фeнaцилимидaзo 2, 1-Ь тиазолия формулы dH.dOdjH,

«ifli K ii

Т-Юв

иВг

проявляющий иммунорегулирующую активность.

Источники информации,

3$ принятые во внимание при экспертизе 1. Sampson D., Lul А. The effect of Eevamisoge. on.ceCf mediated immunity and suDoresor себе function. Cancer.Res,1976,36, 3,p.952-956.