Способ определения активности каталазы цельной крови Советский патент 1992 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при лабораторном обследовании пациентов и популяцион- ном обследовании населения.

Аналогом способа является метод, заключающийся в добавлении к образцам крови перекиси водорода и определении акаталаземии при изменении цвета проб до коричневато-черного. Недостатком является то, что это качественный тест и дает возможность определять только акаталаземию, в то время как различная степень гипокаталазе- мии данным тестом не улавливается.

Прототипом способа является метод ускоренного выявления акаталаземии и гипо- каталаземии у грызунов, который состоит в том, что на предметном стекле смешивают каплю крови с 4% раствором перекиси водорода и через 3-5 мин визуально определяют окраску смеси При акаталаземии она становится коричневой и б-ыстро принимает серовато-молочный оттенок, при гилоката- лаземии - коричневой, в норме остается

красной, Недостатком способа является его низкая, точность, связанная с субьек ивной оценкой изменения окраски смеси

Целью способа является повышение точности.

Способ осуществляют следующим образом

На предметное стекло наносят каплю взвеси клеток свежевзятой крови в цитрат- ном физиологическом растворе в соотношении 1:10. Добавляют к ней равный объем 0,015% раствора перекиси водорода в физиологическом растворе и быстро накрывают покровным стеклом размером 24x24 мм. Сразу же после приготовления препарата при увеличении микроскопа об. 9 0.20, ок. 15 подсчитывают количество сфер кислорода, выделившихся при реакции каталазы крови с перекисью водорода, в 20-40 произвольных полях зрения. Результаты выражают в количестве сфер кислорода на 10 полей зрения.

N1 XI hO XI

О CJ

Способ иллюстрируется следующим примером.

У мужчины 52 лет последовательно берут по 1 объему крови из пальца и из вены, разводят каждую пробу в 10 объемах цит- ратного физиологического раствора. По 1 капле приготовленных взвесей клеток крови наносят на предметное стекло, добавляют к каждой равный объем 0,015% раствора перекиси водорода в физиологическом растворе, быстро накрывают покровным стеклом размером 24x24 мм (последнее фиксируют каплей вазелинового масла, нанесенной на уголок.). Сразу после приготов- ления препаратов при увеличении микроскопа об. 9x0,20 ок. 15 подсчитывают количество сфер кислорода в 20 произвольных полях зрения каждого из них и результаты делят на два. В капиллярной крови

число сфер кислорода в 10 полях зрения оказалось 33, в венозной - 23, что соответствует информации о более низкой активности каталазы в условиях гипоксии.

Формула изобретения Способ определения активности каталазы цельной крови путем помещения пробы крови на предметное стекло с

последующей обработкой ее перекисью водорода и оценкой активности, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, кровь предварительно разводят в 10 раз физиологическим раствором, содержащим цитрат Na, и обрабатывают равным объемом 0,015%-ного раствора НаОг в физиологическом растворе, а оценку активности каталазы проводят подсчетом выделившихся сфер кислорода в препарате.

Способ определения активности катала- зы цельной крови. Использование: клиническая медицина. Сущность изобретения: на покровном стекле смешивают равные объемы взвеси клеток крови и 0,015%-ного раствора перекиси водорода в физиологическом растворе, быстро накрывают покровным стеклом. Сразу же после приготовления препарата при малом увеличении микроскопа подсчитывают число сфер выделившегося кислорода в произвольных полях зрения. Результаты выражают в количестве сфер кислорода на 10 полей зрения. Способ позволяет определить направленность и степень изменения активности каталазы цельной крови.