Способ диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний и может быть использовано для постановки диагноза нейроинтоксикации. Диагностика нервно-психических нарушений, связанных с нейроинтоксикацией, вызываемой высшими алифатическими аминами жирного ряда (ВААЖР), затруднена не только из-за длительного латентного периода, поздних клинических проявлений, но и из-за отсутствия лабораторной диагностики, подтверждающей специфическое поражение центральной нервной системы.

Цель изобретения - ранняя лабораторная диагностика нейроинтоксикации ВААЖР на этапах отсутствия клинической симптоматики.

Способ осуществляют следующим обра- с

зом.

Забирают 0,1-0,2 мл крови пациента в 0,1-0,2 мл 5% раствора цитрата натрия для предупреждения свертывания крови. После тщательного встряхивания пробирки в нее добавляют для лизирования эритроцитов 0,8мл дистиллированной воды на 30 секунд, а потом доливают до 9-10 мл среды 199 для восстановления . Пробирки центрифугируют 5-10 мин при 1500 об/мин, после чего надосадочную жидкость сливают, а осадок лейкоцитов ресуспендируют в 0,1-0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия или среды 199. К полученной взвеси добавляют 0,1-0.2 мл 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных дофамином, смесь инкубируют 10-15 мин при температуре +37 0-+37,5°е, после чего

VI 00

о -ч

центрифугируют при 1500 об/мин. 5-10 мин. Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, осадок ресуспендируют в капле любой ин- тактной сыворотки (бычьей, лошадиной, человеческой). Из полученной суспензии клеток делают мазок, фиксируют в метиловом спирте или этиловом спирте, высушивают, окрашивают по Романовскому - Гимза. Под микроскопом рассматривают 100 лимфоцитов, отмечая среди них число (%) клеток, фиксировавших на себе три более эритроцитов (РОК). Зная содержание в крови больного лейкоцитов, высчитывают абсолютное содержание РОК в 1 мл крови. Обработку эритроцитов барана в глютаро- вом альдегиде производят следующим образом: соединяют 1 мл 5% взвеси тщательно отмытых нативных эритроцитов барана с 0,25% раствором глютарового альдегида в соотношении 1:1. Смесь выдерживают при температуре +37,0°С в течение 15 минут, после чего эритроциты дважды отмывают от альдегида забуференным изотоническим раствором хлорида натрия ,2 и доводят до первоначального объема этим же раствором (5% взвесь). Для сенсибили- зации-эритроцитов готовят раствор дофами- на с концентрацией 6,1 мг/кг на забуференном физиологическом растворе ,4.1 мл 5% взвеси глготаризированиых эритроцитов центрифугируют, надосадоч- ную жидкость удаляют, а к осадку эритроцитов приливают 1 мл раствора дофамина. Смесь тщательно встряхивают и выдерживают при комнатной температуре 25-30 мин, после чего лимфоциты дважды отмывают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 минут изотоническим раствором хлорида натрия и им же доводят до 0,5% взвеси. Показателем нормы является обнаружение числа РОК, специфических дофамину, равное 7,8+0,2.

П р и м е р 1. Больная В.Н.В., 26 лет, аппаратчица. До контакта с ВААЖР была здоровой, из перенесенных заболеваний отмечает детские инфекции, ОРЗ. В контакте С аминами работает 8 лет. Первые полгода плохо переносила запах аминов. Года через 4-5 работы с аминами после ночных смен стала беспокоить головная боль давящего характера, повышенная усталость и концу смены, стала раздражительной, эффективно неустойчивой, периодически нарушался сон. Данные проявления исчезали после отдыха, за медицинской помощью не обращалась. В последующем стала плохо переносить шум, громкие звуки, чаще дает эффективные реакции, ближе стали слезы.

Психическое состояние. Все виды ориентировки сохранены, охотно дает о себе

сведения, отмечает гиперестезию к шуму, звукам, запахам. Периодически испытывает неприятные ощущения в пальцах рук. Внимание устойчивое, снижен объем произвольного внимания, мнестическая деятельность без особенностей. Мышление логичное, ипохондрична, озабочена изменившимся самочувствием, настроение ровное, но легко плачет. Понимает и хорошо

0 оценивает свое состояние. Имеет установку

продолжать работу в прежних условиях.

В соматическом состоянии заболеваний не выявлено.

В неврологическом статусе усилены ве5 гетативные реакции - периодические нарушения сна, головные боли, гипергидроз, стойкий красный дермографизм.

У больной взяли 0,1 мл крови и добавили 0,1 мл 0,5% взвеси глютаризированных

0 эритроцитов барана, нагруженных дофамином, инкубировали 10 минут при температуре +37,0°С. При подсчете в мазке обнаружено увеличение экспрессии дофаминовых рецепторов, о чем свидетельствует

5 высокое число РОК, равное 80%, тогда как в норме оно не превышает 7,8± 0,8%.

Диагноз: начальные проявления интоксикации ВААЖР, донозологический этап. П р и р 2, Больная К.А.С. 48 лет,

0 аппаратчица сушильного отделения ф СКПРУ № 1. Находится под наблюдением с 1976 г. Из анамнеза: до начала контакта с ВААЖР в 1961 г. была практически здорова. Через 2-3 года работы на химфабрике стала

5 отмечать периодические головные боли, усталость после смены. Этим проявлениям значения не придавала,они исчезали после отдыха. Постепенно состояние ухудшилось: стала эмоционально лабильной, эффектив0 но неустойчивой, головная боль носила постоянный характер, нарушился сон. испытывала неприятные ощущения в дис- тальных отделах конечностей. Сформировался стойкий неврозоподобный

5 церебрастенический синдром. Через 14 лет работы в контакте с ВААЖР подтвержден диагноз профинтоксикации, но продолжала работать в прежних условиях. Состояние постепенно ухудшалось, нарастали психиче0 ские нарушения по органическому типу. Стала медлительной в делах, мыслях, нарастали эффективные расстройства, стала конфликтной, несостоятельной в решении каких-либо проблем, снизилась память, по5 стоянно испытывает чувство усталости, не переносит физиогенных раздражителей. В 1987 г. находилась на лечении в психиатрической клинике. Предъявляла жалобы на нарушение сна, быструю утомляемость, непереносимость жары, шумя, громких звуков, смены погоды, снижение памяти, медлительность в делах, мыслительной деятельности, ухудшение сообразительности, быструю смену настроения, В отделении говорит и ходит медленно. Отмечается гиперестезия к физиогенным раздражителям, гипопатия к вкусовым ощущениям, неприятные ощущения в области сердца, дисталь- ных отделах конечностей. Память снижена на текущие события. Мышление замедленно по темпу. Эмоционально неустойчива, дает эффективные реакции по пустякам, конфликтует с больными, медперсоналом, не терпит возражений, не умеет ждать. Бывает мрачной, раздражительной. Очень быстро устает.

При патопсихологическом обследовании выявляется медленный темп деятельности, истощаемость, малый объем производительного внимания, ослабление оперативной памяти.

В неврологическом состоянии выявляется сон с трудным засыпанием, частыми просыпаниями, постоянная давящая головная боль. Лицо гипомимично, сухожильные рефлексы оживлены, брюшные отсутствуют, тремор пальцев вытянутых рук. Выраженный стойкий красный дермографизм, гипергидроз. На ЭЭГ - умеренные десинх- ронно-диффузные изменения. На глазном дне несколько сужены артерии сетчатки. На краниограмме - парасагитально единичные пахионовы ямки, пальцевые вдавления не усилены.

Со стороны внутренних органов - умеренное увеличение сердца с поперечнике, приглушенность тонов, болезненность в правом подреберье и по ходу кишечника. АД с наклонностью к повышению, лабильность пульса.

Анализ данного наблюдения дает возможность проследить поэтапное формирование хронической профессиональной интоксикации. Донозологические проявления возникли через 2-3 года работы с аминами и были представлены периодическими астеническими и вегетативными дисфункциями. Постепенно состояние ухудшается. Через 8-10 лет работы в контакте с ВААЖР

формируется стойкий неврозоподобный астенический синдром с эмоциональными и вегетативными нарушениями. Постепенно клинические проявления усложняются, в

структуре астенического синдрома нарастает интеллектуально-мнестическое снижение по органическому типу с астенизацией и эксплозивностью.

Способ в данном случае осуществляли в

различных условиях: результаты предлагаемого метода с использованием 0,1 или 0,2 мл крови и 0,1 или 0,2 мл 0,5% взвеси эритроцитов барана, нагруженных дофамимом, инкубацией в течение 10 или 15 минут при

температуре+37,0°С или ±37,5°С.

Диагноз: хроническая профессиональная нейроинтоксикация ВААЖР, токсическая энцефалопатия, психоорганический синдром, астено-эксплазивный вариант,

Преимущества способа заключаются в высокой специфичности и чувствительности, использовании малого количества крови (0,1-0,2 мл) обследуемых, простоте технического исполнения, высокой воспроизводимости, в необходимости минимальных количеств, причем вполне доступных реактивов, несложного оборудования, возможности обучения среднего медицинского персонала, что позволяет использовать данный способ в клинике, массовых профилактических осмотрах, Способ позволяет диагностировать раннее, начальные доклинические стадии нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного

ряда.

Формула изобретения Способ диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами

жирного ряда путем исследования организма, отличающийся тем, что, с целью раннего выявления интоксикации, исследуют дофаминовые рецепторы на лимфацитах в реакции розеткообразования с эритроцитами барана, нагруженных дофамином, и при наличии рос-зток диагностируютнейро- интоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.

Использование: способ диагностики пейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике заболеваний. Цель изобретения: повышение точности ранней диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда, особенно ее ранних, донозологических форм. Сущность: указанная цель достигается путем смешивания суспензии лейкоцитов пациента с равными объемами 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных дофамином. Смесь инкубируют в течение 10-15 мин при -К37,0-+37,50С, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романов- скому-Гимза. Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более эритроцитов барана (РОК). При увеличении количества РОК, специфичных дофамину по сравнению с нормой (7,8± 0,8%), диагностируют нейроинтоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.