Способ диагностики интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний, и может быть использовано для постановки диагноза хронической профессиональной интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда (Ci6-C2o) (СААЖР).

Цель изобретения - повышение объективности и точности диагностики профессиональных болезней, вызванных высшими алифатическими аминами жирного ряда.

Сущность способа - обнаружение ВААЖР - основано на способности лимфоцитов.организма сенсибилизироваться к веществу, попадаемому в организм любым

путем, что сопровождается активизацией числа соответствующих рецепторов к этим аминам.

Сущность способа состоит в определении числа лимфоцитов, способных взаимодействовать с эритроцитами барана, сенсибилизированных ВААЖР.

Способ осуществляют следующим образом.

Забирают 0,1-0,2 мл крови пациента в 0,1-0,2 мл 5%-ного раствора цитрата натрия для предупреждения свертывания крови. После тщательного встряхивания пробирки в нее добавляют для лизирования эритроцитов 0,8 мл дистиллированной воды на 30 с,

VI ,0°

«

Сд) i00

b

а потом доливают до 9-10 мл среды 199 для восстановления ,0. Пробирки центрифугируют 5-10 мин при 1500 об/мин, после чего надосадочную жидкость сливают, а осадок лейкоцитов ресуспеидируют в 0,1- 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия или среды 199, К полученной взвеси добавляют 0,1-0,2 мл 0,5%-ной азвеси глго- таризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, смесь инкубируют 10-1 5 мин при +37,0°-37,5°С, после чего центрифугируют при 1500 об/мин 5-10 мин. Нзд- осадочную жидкость удаляют пипеткой, осадок ресуспендируют в капле любой ин- тактной сыворотки (бычьей, лошадиной, человеческой). Из полученной суспензии клеток делают мазок, фиксируют в метиловом спирте или этиловом спирте, высушивают, окрашивают по РомановскомуТимза, Под микроскопом рассматривают 100 лимфоцитов, отмечая среди них число (%) клеток, фиксировавших на себе три и более эритроцитов (РОК). Обработку эритроцитов барана в глютаровом альдегиде производят следующим образом: соединяют 1 мл 5%- ной взвеси тщательно отмытых нативных эритроцитов барана с 0,25%-ным раствором глютарового альдегида в соотношении 1:1. Смесь выдерживают при+37,0°С в течение 15 мин, после чего эритроциты дважды отмывают от альдегида забуференным изотоническим раствором хлорида натрия ,2 и доводят до первоначального объема этим же раствором (5%-ная взвесь), Для сенсибилизации эритроцитов готовят раствор с концентрацией ВААЖР 0,01 мкг/мл на забуференном физиологическом растворе ,4, 1 мл 5%-ной взвеси глютаризи- рованных эритроцитов центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют, а к осадку эритроцитов приливают 1 мл раствора ВААЖР. Смесь тщательно встряхивают и выдерживают при комнатной температуре 25-30 мин, после чего лимфоциты дважды отмывают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 мин изотоническим раствором хлорида натрия и им же доводят до 0,5%-ной взвеси. Показателем нормы является обнаружение числа РОК, специфичных ВААЖР, равное 3,4 ±0,5%.

Примеры практического использования способа.

Пример 1. Б-ная, Л-на, 36 лет, аппаратчица. До контакта с ВААЖР была здоровой. Ухудшение в состоянии здоровья отмечает после 9-1- лет работы с аминами. Стаж 15 лет. Жалуется на несдержанность, нервность, слезливость, постоянные головные боли, нарушено засыпание, сон чуткий, прерывистый. Плохо переносит жару, резкие запахи, шум, громкие звуки. Лечилась по месту жительства, но улучшения не наступило,

Со стороны внутренних органов терапевтом патологии не обнаружено. Нервная система: сухожильные рефлексы оживлены, вегетативныз реакции усилены: стойкий красный дермографизм, гипергидроз ладоней рук, ощущение онемения в дистальных отделах конечностей.

Психическое состояние. Все виды ориентировки сохранены. Имеется гиперестезия к звукам, запахам, Внимание снижено

по объему, память ослаблена, прослеживается склонность к детализации, эмоционально лабильна, близко слезы, быстро устает.

У больной взяли 0,1 мл крови и добавили 0,1 мл 0,5%-ной взвеси глютаризирован- ных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, инкубировали 10 мин при +37,0°С. При подсчете в мазке обнаружено увеличение экспрессии ВААЖР-рецепторов, о чем

свидетельствует высокое число РОК, равное 45%, тогда как в норме оно не превышает 3,4Ш,5%.

Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, психоорганический синдром.

Пример 2, Б-ная М-ва, 49 лет, аппаратчица. Через 6 лет после контакта с ВААЖР стала отмечать головную боль, быструю утомляемость, раздражительность,

эффективную неустойчивость. Не переносит запахи, шум, езду на транспорте. Снизилась память, стала плаксивой.

Нервная система: усилены вегетативные реакции: стойкий красный дермографизм, нарушение сна, онемение и зябкость рук.

Психическое состояние. Все виды ориентировки сохранены, сосредоточена на неприятных ощущениях. Имеется гиперестезия к физиогенным раздражителям. Внимание снижено по объему, есть трудности в распределении, выражена истощаемость. Память снижена. Мышление с некоторой обстоятельностью, ригидностью. Эмоционалыюлабильна, конфликтна, медлительна, астенизирована, щадит себя в нагрузках, в общении с людоми.

У больной взяли 0,1 мл крови и добавили 0,1 мл 0,5%-ной взвеси глютаризированных

эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, инкубировали 10 мин при+37,5°С. При подсчете в мазке обнаружено 41% РОК, специфичных ВААЖР, тогда как в норме оно равно+3,4 ±0,5%.

Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, .психоорганический, астено-ипохондрический синдром.

П р е р 3. р-ная, С-на, 51 год, аппаратчица. Через б лет после контакта с ВА- АЖР стала жаловаться на повышенную утомляемость, головные боли, нарушение сна, обидчивость, конфликтность, раздражительность, неприятные ощущения в дис- тальных отделах конечностей.

Нервная система: недостаточность конвергенции, оживлены сухожильные рефлексы, тремор пальцев вытянутых рук, вегетативные реакции усилены.

Со стороны соматического статуса тера- певтом отмечены хронический холецистит, спастический колит.

Психическое состояние. Имеется гиперестезия к шуму, свету, запахам. Произвольное внимание мало по объему, отмечается быстрая истощаемость, трудности распределения. Память снижена на текущие события. Медлительна, неуверена в принятии решений, эмоционально лабильна, астенизирована.

Предлагаемый способ в данном случае осуществляли в различных условиях: с использованием 0,1 мл или 0,2 мл крови и 0,1 или 0,2 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, с последующей инкубацией в течение Юили 15минпри +37,0°С или +37,5°С.

Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, астенической психоорганический синдром.

Преимущества способа заключаются в высокой специфичности и чувствительности, использовании малого, количества крови обследуемых, простоте технического исполнения, малого количества доступных реактивов, несложном оборудовании, возможности использования способа при массовых профилактических осмотрах. Способ позволяет диагностировать ранние, начальные доклинические стадии хронической профессиональной интоксикации ВААЖР на основании объективности результатов обследования.

Формула изобретения

Способ диагностики интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда путем обследования пациента, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и объективности диагностики, исследуют кровь, при этом к крови больного добавляют равные объемы 0,5% взвеси глю- таризированных эритроцитов барана, нагруженных высшими алифатическими аминами, смесь инкубируют при 37-37,5°С в течение 10-15 мин, подсчитывают в мазке число розеткообразующих лимфоцитов и при увеличении числа розеток по сравнению с нормой диагностируют хроническую профессиональную интоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.

Способ диагностики хронической профессиональной интоксикации алифатическими аминами жирного ряда относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний. Цель изобретения: повышение объективности и точности диагностики профессиональной интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда (ВААЖР), Сущность: Указанная цель достигается путем соединения лейкоцитов пациента с равными объемами 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР. Смесь инкубируют в течение 10-15 минут при температуре + 37,0°-37,50, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза. Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более эритроцитов барабан (РОК). При увеличении количества РОК, специфичных ВААЖР по сравнению с нормой (3,4± 0,5%), . диагностируют наличие ВААЖР в организ- ме и ставят диаыоз: профессиональная ин-| токсикация высшими алифатическими аминами жирного ряда. Точность способа возрастает на основе объективных данных.