Способ прогнозирования течения воспалительного процесса Советский патент 1992 года по МПК G01N33/561 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической и хирургической практике для прогнозирования течения воспалительного процесса при различных заболеваниях.

Известен способ диагностики и прогнозирования воспалительного процесса при хирургическом лечении посттромбофлебитического синдрома нижних конечностей при изъязвлении и индурации тканей.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что определяют содержание иммуноглобулина G в фракциях сывороточного белка диск- электрофореграммы в полиакриламидном геле, соответствующих локализации фракций с относительной электрофоретической подвижностью по трансферину равной 0,17, 0.20 и 0.23 и при снижении его содержания

ниже 0,35, 0,49 и 0,56 г/л прогнозируют не- благоприятнЬе течение воспалительного процесса.

Способ осуществляют следующим образом. Проводят диск-электрофорез двух параллельных проб сыворотки крови в 7,5%-ном полиакриламидном геле с длиной 76 мм разделяющего и 8 мм концентрирующего геля и диаметром трубочек б мм при режиме 2 мА и напряжении 600 W на пробу в течение 30 мин с последующим увеличением силы тока до 5 мА в течение 1 ч. После электрофореза одну из проб фиксируют в 10%-ном растворе ТХУ в течение 10 мин, окрашивают в 0,1%-ном растворе амидо- черного 10 В в течение 10 мин и промывают в 7%-ном растворе уксусной кислоты,

Столбик геля другой неокрашенной пробы разрезают на 27-28 поперечных дисков, соответствующих локализации опредеXI00

о ю

ленным фракциям белка диск-электрофо- реграммы 1-й окрашенной пробы. Отдельные диски помещают на расстоянии 20-25 мм друг от друга в пронумерованные лунки чашки Петри с агаром и заливают агаром с диспергированной моноспецифической антисывороткой иммуноглобулина G до полного покрытия дисков. После 48 ч инкубации во влажной камере при комнатной температуре производят фиксацию в 10% ТХУ и промывку в 7%-ном уксусной кислоте. В агаре вокруг дисков, в которых присутствует иммуноглобулин G, возникают кольца имму- нодиффузии различных диаметров. Одновременно в отдельной чашке Петри определяют общее содержание иммуноглобулина G в исследуемой сыворотке крови по известному способу Манчини,

Для расчета содержания иммуноглобулина G в отдельных дисфракциях измеряют диаметры колец иммунодиффузии всех дисков. При этом общее содержание иммуноглобулина в сыворотке крови, определенное по Манчини в г/л, соответствует сумме квадратов диаметров всех колец иммунодиффузии в мм. На основании этого содержание иммуноглобулина G в отдельных диск-фракциях соответствует произведению величины общего содержания иммуноглобулина в сыворотке крови и отношения квадрата диаметра кольца иммунодиффузии отдельного диска к сумме квадратов диаметров колец иммунодиффузии всех диск-фракций.

На основании наших исследований было установлено, что у больных с недостаточностью иммуноглобулина G отмечается резкое снижение его содержания особенно в 23-21 фракциях сывороточного белка диск-электрофореграммы в ПААГ, где локализуются иммуноглобулины относящиеся к нормальным или естественным антителам, функция которых связана с индивидуальной устойчивостью организма к инфекциям. Поэтому снижение содержания иммуноглобулина G в фракциях 23-й ниже 0,35 г/л, 22-й - 0,49 г/л и 21-й - 0,56 г/л соответственно указывает на недостаточность иммуноглобулина G в организме и прогнозирует неблагоприятное течение воспалительного процесса.

Такое состояние иммунитета встречается при пиодермиях, фурункулезах, частых простудных заболеваниях и пневмониях, а также при системном аллергозе и у больных, перенесших тяжелые оперативные вмешательства.

Средние количественные данные содержания иммуноглобулинов G в фракциях сывороточного белка дис-электрофореграммы в ПААГ у здоровых людей и больных с воспалительными процессами приведены в таблице. Из таблицы видно, что у больных содержание иммуноглобулина G снижено

особенно в 23-21 фракциях, что указывает на недостаточность естественных антител в организме по сравнению с группой здоровых лиц.

Содержание иммуноглобулина G в

0 фракциях сывороточного белка у здоровых людей и у больных с воспалительными процессами представлено в таблице.

В качестве конкретного примера использования способа служит следующий

5 клинический случай: Больная Н.Д., 67 лет, поступила в клинику с диагнозом: рецидивирующий карбункул затылочной области, сахарный диабет в тяжелой форме. Больной проведено широкое костообразное раскры0 тие карбункула с иссечением некротических тканей, с последующей антибиотикотера- пией, общеукрепляющим лечением и коррекцией сахарного диабета. Однако, некротически-гнойный процесс не имел тен5 денции к ограничению и распространился почти на всю затылочную область. Содержание иммуноглобулина G в сыворотке крови по Манчини составило 9,3 г/л, что соответствует таковому показател ю у здоровых лиц.

0 В то же время при исследовании иммуног- раммы сывороточного белка выявлено отсутствие иммуноглобулинов G в фракциях 21-23 диск-электрофореграммы и наличие их только в 19, 20 и 27 фракциях и в крупно5 пористом геле. На основании этого у больной была установлена недостаточность определенных фракций иммуноглобулина G в сыворотке крови. Многократные гемотрас- фузии свежей донорской крови, антистафи0 лококковой плазмы, введение гаммаглобулина и антибиотиков и др. мероприятия позволили ограничить воспалительныйпроцесс.Наступило выздоровление.

5 Показатели иммупограммы сыворотки крови при выписке указывали на наличие иммуноглобулина G, содержание которого составило в 23 фракции диск-электрофореграммы 0,37 г/л, в 22 фракции - 0,56 г/л и в

0 21 фракции-0,45 г/л.

Таким образом, как видно из таблицы и конкретного примера, использование предлагаемого способа позволяет установить индивидуальнуюнедостаточность

5 определенных фракций иммуноглобулина G в

организме и повысить в 1,5 раза точность

прогноза течения воспалительного процесса.

Формула изобретения

Способ прогнозирования течения вос палительного процесса, включающий проведение диск-электрофореза двух параллельных проб сыворотки крови в 7,5%-ном полиакриламидном геле, затем одну пробу фиксируют и прокрашивают для определения локализации фракций белка, а столбик геля другой пробы используют для определения иммуноглобулина G, для чего его разрезают на поперечные диски, соответствующие локализации отдельных фракций белка электрофореграммы, диски помещают на расстоянии 20-25 мм друг от друга в чашки Петри и заливают агаром с моноспецифической антисывороткой, инкубируют во влажной среде при комнатной температуре в течение 48 ч. фиксируют 10%-ным раствором ТХУ, промывают 7%- ным раствором уксусной кислоты и определяют диаметр колец иммунодиффузии для

расчета количества иммуноглобулина G в отдельных диск-фракциях по формуле в виде произведения общего содержания иммуноглобулина G в сыворотке крови,

определенного по Манчини, на долю величины квадрата диаметра одного кольца иммунодиффузии по отношению к сумме квадратов диаметров всех колец иммунодиффузии, отличающийся тем, что, с

целью повышения точности способа, определение иммуноглобулина G проводят в трех гелевых дисках, соответствующих локализации фракций белка с злектрофорети- ческой подвижностью 0,17, 0,2 и 0,23 по

отношению к трансферрину, и при сниже- Hj/iH его содержания ниже 0,35, 0.49 и 0,56 г/л прогнозируют неблагоприятное течение воспалительного процесса.

Использование: в медицине, в клинической и хирургической практике. Сущность изобретения: проводят диск-электрофорез в ПААГ двух параллельных проб сыворотки крови, в первой пробе определяют локализацию фракций белка, а во второй гелевый столбик разрезают на поперечные диски с учетом локализации отдельных электрофо- ретических фракций белка и помещают их в чашки Петри для определения содержания иммуноглобулина G по Маичини, а при снижении его содержания ниже 0,35,0,49 и 0,56 г/л в гелевых дисках, соответствующих локализации фракций с Rf подвижностью по трансферину, равной 0,17, 0,20 и 0,23, прогнозируют неблагоприятное течение воспалительного процесса. Положительный эффект. Использование изобретения позволит в 1,5 раза точнее прогнозировать течение воспалительного процесса. 1 табл.