Способ выявления СамрYLовастеR pYLoRIDIS в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта Советский патент 1993 года по МПК G01N1/28 

Способ относится к области биологии и медицины предназначен для экспресс- выявления микроорганизмов Campylobacter pyloridis в биопсийном материале слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.

Известно несколько прямых и косвенных способов обнаружения Campylobacter pyloridis в биопсийном материале желудочно- кишечного тракта человека: выявление фермента уреазы, как маркера колонизации бактериями слизистой оболочки желудка культуральный метод, гистологический метод и электронно-микроскопический метод.

Наиболее близким по технической сущности и принятым за прототип является бак- териоскопический способ выявления Campylobacter pyloridis, который представляет собой модифицированную окраску по Граму включает фиксацию препарата, окрашивание и бактериоскопию.

Основным недостатком этого способа является низкая точность выявления Campylobacter pytoridls и техническая сложность исследования, обусловленная использованием многократной окраски и обесцвечивания.

Целью изобретения .является повышение точности, сокращение времени и упрощение техники исследования.

Указанная цель достигается тем, что в способе выявления Campylobacter pyloridis в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта; включающем фиксацию препарата, окрашивание и бактериоскопию, согласно изобретению, фиксацию осуществляют в 1- 1, растворе фосфорновольфрамовой кислоты, окрашивание выполняют над открытым огнем, при этом в качестве красителя используют состав содержащий Азур II и глицерин в следующих соотношениях, . мас.%:

Азур II0.8-1.5 Глицерин 30-40 Вода Остальное Способ выполняют следующим образом.

Готовят отпечатки биопсии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта на

с/

С

vi

2

N3

N

ел

со

31794245 . 4

чистых предметных стеклах. Высушивают. микроорганизмы Campylobacter pyloridls На препараты наливают 1-1,5%-ный рас- обнаруживали в препарате в виде темно-си- .твор фосфорновольфрамовой кислоты, че- них изогнутых палочек или .спирилл, рез 5-7 мин сливают, промывают водой.П р и м е р 2. Биопсийный материал в Покрывают препараты красящей смесью со- 5 виде кусочка слизистой оболочки кишечни- стоящей из, мас.%: / ка отпечатывали на сухие предметные стек- Азу р И 0,8-1,5 ла, высушивали. На препараты наливали Глицерин 30-40 1%-ный раствор фосфорновольфрамовой Вода Остальное кислоты, через 5 мин сливали, промывали Проводят стекло 15-20 раз над п ламе- 1-0 водой. Покрывали красящей смесью состоя- нем газовой или спиртовой горелки до появ- щей из, мас.%: ления паров. Дают стеклу остыть в течение Азур II 0,8 1 мин. Осторожно, держа предметное Глицерин 30 стекло горизонтально, поливают водой, Вода Остальное смывая таким образом краситель. Прела- 15 Проводили стекло над газовой горелкой 15 рат высушивают и рассматривают под раз до появления паров, 1 мин стекло осты- микроскрпом. вало. Держа стекло горизонтально, промы- При этом смесь препаратов готовят ел е- вали водой, смывая краситель. Препарат дующим образом;. : высушивали и изучали под микроскопом. В дистиллированной воде (60 мл) рас .20 Микроорганизмы Campylobacter pyloridls творяют азур II до полного растворения, за- обнаруживали в препарате в виде палочко- тем добавляют глицерин, доводят объем до видных структур или спирилл. 100 мл дист.водой. ; ,-; Пример 1. Предназначенный для вьгяв-Для доказательства возможности до- ления мнлкроорганизмов eampylobacter 25 стижения положительного эффекта был ис- pylorldls биопеийный м:атериад слизистой следован биопсийный материал слизистой оболочки желудка был отпечатан на сухие оболочки желудочно-кишечного тракта у 220 предметные стекла, высушен. Фиксирован больных предлагаемым способом и спосо- в 1,5%-ном растворе фосфорнЬеольфрамо- бом-прототипом, Положительный результат вой кислоты в течение 7 мин, промыт водой. 3D был получен при исследовании 205 биопсий Затем покрыт красящей смесью состоящей с помощью заявленного способа и у 183 из, мас.%: полученных способом-прототипом.

АзурII .t.5 :: , Пр лредложенному способу выявляе- Глицерин 4& : Мисть составила 93%, время одного иссле- Вода Остальное 35 дования 5-7 мин,в сравнении с прототипом, Проводят над газовой горелкой Шраз до : гдевыявляемость83%,времяодногоиссле- появления паров, 1 мин стекло о&тывздо. дования 15-29 мин. Держа стекло горизонтально, Нолийапи во- Изобретение обладает высокой досто- дой, смывая краситель. Препарат высуши- верностью и позволяет сократить время од- вали и рассматривали пфй Микроскопом,..40 ного исследования в 2-3 раза.

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии. Целью является повышение точности способа. Цель достигается тем, что из биоптата слизистой желудочно-кишечного тракта готовят цитологический препарат. Затем его фиксируют в течение 5-7 мин в 1-1,5%-ном растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты. А окрашивают в составе, содержащем азур И, глицерин и воду. Бактерии на препарате имеют вид палочковидных структур или спирилл. Способ позволяет быстро и качественно выявить бактерии. 1 табл.

.: .:- ;;;-.:;: - ; - : ;; :: / --.., . - . . Ф о р м у л а и з р б р ё т ё ни и в качестве фиксатора используют 1,0-1,5%- Способ выявления Campyfobacter «ый раствор фосфорно-вольфрамовой кис-1

pylorldls в слизистой оболочке желуйЬчно- .о-Уы«; в - ок ра1Цивание проводят в составе,

кишечного тракта путем фиксации биолтата содержащем азур 11, глицерин и воду, вслес последующим приготовлением гийтодоги- 50 дующем соотношении компонентов, мас.%:

ческого препарата, erb окрашиванием йвы-:

явлением бактерий ПО палочковидным . ..азурIt0,8-1,5;

структурам, о т ли ч а ю щи и с я тем, что,глицерин 30-40;

с целью повышения точности способа, фик-еода Остальное.

сацию проводят в течение 5-7 мин, при этом 55

Зависимость качества окраски от концентрации фосфорновольфрамовой кислоты и Азура II в красящем растворе.