Способ определения карнитина в сыворотке крови Советский патент 1993 года по МПК G01N30/00 

Изобретение относится к биохимии, гигиене питания, витаминологии, клинической фармакологии, а именно к способам определения витаминоподобного вещества карнитина, и может быть использовано в клинической практике и для исследовательских работ при изучении физиологических и патологических состояний организма человека и животных.

Целью данного изобретения является газохроматографический способ определения карнитина в сыворотке крови, обеспечивающий безопасность работы и повышение чувствительности определения.

Пример. К2 мл супернатанта, полученного после добавления к сыворотке трихлоруксусной кислоты и центрифугирования в течение 15 минут при 3000 об/мин добавляют 0,3 мл реагента (2,0 М NaOH, содержащая 40 мг NaBbU/мл) и нагревают на масляной бане при 160° в течение 30 минут. После охлаждения избыток непроре- агировагшего боргидрида натрия разлагают соляной кислотой (0,5 мл HCI 5,5М), и полученную смесь экстрагируют 0,5 мл хлороформа при энергичном встряхивании. Полученный экстракт упаривают до объема

0,2 мл и аликвоту 2-5 мкл анализируют на хроматографе с пламенно-ионизационным детектором. Условия хроматографирова- ния: Металлическая колонка длиной 3 м и диаметром 3 мм заполнена полиэтиленгли- кольадипинатом (20%), нанесенным на хро- матон N-AW (0,20-0,25 мм), предварительно обработанный о-фосфор- ной кислотой (3%).

Температура колонки 130°С, испарителя 180°С. Расход газа-носителя (гелий) 40 мл/мин, водорода 30 мл/мин, воздуха 300 мл/мин, Чувствительность усилителя 20х 10 . скорость движения диаграммной ленты 200 мм/ч.

В этих условиях время выхода у -бути- ролактона составляет 42 мин 10 с.

Количественную оценку карнитина в неизвестных образцах сыворотки проводили по калибровочной кривой, полученной методом абсолютной калибровки.

С использованием предлагаемого способа была определена концентрация карнитина в сыворотке крови доноров. Она колебалась от 20 до 70 мкмоль/л. Относительная ошибка определения не превышала 15%.

ел

00

О CJ 00

ел ел

Формула изобретения Способ определения карнитина в сыворотке крови, включающий обработку химическим реагентом, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени определения и обеспечения безопасности проведения способа, анализируемую пробу обрабатывают щелочным раствором боргидрида натрия при температуре 155-165°С, избыток боргидрида натрия разлагают соляной кислотой, полученную смесь экстрагируют хлороформом и экстракт фотометрируют.

Использование; в области аналитической химии. Сущность изобретения: анализируемую пробу обрабатывают щелочным раствором боргидрида натрия при 155- 165°С, избыток боргидрида натрия разлагают соляной кислотой, полученную смесь экстрагируют хлороформом и экстракт фо- тометрируют.