Инактивированная вакцина против синдрома снижения яйценоскости-76 птиц Советский патент 1993 года по МПК C12N7/00 A61K39/00 

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и может быть использовано при изготовлении вакцины против синдро- ма.снижения яйценоскости-76 и для профилактики указанного заболевания.

Целью предполагаемого- изобретения является повышение иммуногенной активности, стабильности и надежности инактивации вакцины против ССЯ-76, а также уменьшение трудозатрат при ее введении.

Поставленная цель достигается тем, что в известной вакцине и способе ее получения, включающей в себя инактивированный вирус ССЯ-76 и адъювант, в качестве вакцинного используют штамм В8/78, в качестве адъюванта - жировую эмульсию на

основе соевого масла и соевого лецитина, а в качестве инактиватора инфекционности - бис-/ -этилениминоэтилоксамид.

Сопоставительный анализ заявляемого решения с прототипом показывает, что заявляемая вакцина отличается от известной тем, что используют штамм вируса ССЯ-76 В8/78, до сих пор для изготовления вакцин не использовавшийся, а не ВС-14. При этом результаты комиссионных испытаний заявляемой вакцины в сравнении с противо поставляемой показывают ее более высокие антигенные (в 4,5-9,0 раз) и иммуногенные качества (См. Акт комиссионных испытаний... от 27.05.89 г.).

оо

О Ю 00 Сл Os

CJ

Инактивацию вируса в заявляемой вакцине производят посредством бис-/ -этиле- ниминоэтилоксамида, что гарантирует полное отсутствие в вакцине остаточной ин- фекционности, а также невозможность репарации генома вирусной ДНК (8). Тогда как в вакцине Ноби-Вак ЭДС 76 этот процесс возможен, так как инактивацию производят посредством формалина. Кроме того, водные растворы формалина нестабильны, что затрудняет стандартизацию инактиватора (6).

Использование в заявляемой вакцине в качестве адъюванта жировой эмульсии на основе соевого масла и соевого лецитина следующего состава (в мас.%):

Соевое масло9,0-11,0 Соевый лецитин 1,0-1,5 Сорбит 4,0-6,0 Вода остальное дает по сравнению с прототипом, где используется эдъювант нераскрытого состава, обла- дающий вязкой консистенцией и температурой застывания, близкой к комнатной, преимущества более быстрого введения вакцины и точного соблюдения ее дозы. Примеры конкретного выполнения. Исходную вируссодержащую жидкость получают на развивающихся, утиных эмбрионах 10-12-суточного возраста, зараженных вирусом ССЯ-76 штамма В8/78 в аллантоисную полость с последующим ин- кубированием при температуре 37,0 ±0,5°С в течение 96-120 ч.

Для инактивации вируса в вируссодержащую жидкость добавляют бис-$-этиленимино- этилоксамиддо конечной концентрации его в реакционной смеси 0,01 М и компоненты перемешивают при температуре 37,0 ± 0,5°С в течение 20-24 ч. Затем остаточный инактива- тор нейтрализуют тиосульфатом натрия, который добавляют до конечной концентрации 0,03 М и смесь выдерживают в течение 2 часов при температу ре 20,0-22,0°С, Контроль инфек- цисгнности осуществляют путем трехкратных последовательных пассажей на развивающихся утиных эмбрионах 10-12-суточного возраста.

Для инактивированного вируса определяют титр гемагглютинирующей активности в реакции гемэгглютинации с 1 %-ной суспензией куриных эритроцитов, после чего вирус суспендируют в физиологическом растворе с рН 7,2 до величины титра 4096 гемагглютинирующих единиц (ГАЕ)/0,2.

Суспензию инактивированного вируса стандартной активности перемешивают в равном объеме адьюванта в течение 15 мин при 20,0-22.0°С до получения гомогенной эмульсии.

Полученную инактивированную вакцину применяют для иммунизации против ССЯ-76 цыплят в возрасте 110-120 дней путем однократной внутримышечной иньек- ции в дозе 0,5 мл на птицу.

Иммунитет наступает через 14 дней и сохраняется в течение всего продуктивного периода.

Предлагаемая вакцина против синдро- ма снижения яйценоскости-76 птиц по сравнению с вакцинами, имеющими известный состав, обладает следующими преимуществами:

Имеет более высокую антигенную и им- муногенную активность (См. Акт комиссионных испытаний... от 27.05.89 г.);

Полная инактивация вируса в вакцине позволяет предотвратить возможное распространение заболевания в птицехозяйст- вах страны при вакцинации;

Используемый для приготовления адъ- ювант способствует ее высокой стабильности и иммуногенной активности;

Применение вакцины в птицехозяйст- вах страны дает возможность использовать высокопродуктивные, но чувствительные к вирусу ССЯ-76 птиц породы, как, например, Хайсекс-браун. Яйценоскость при этом повышается на 15,2 яйца на несушку за про- дуктивный период, а количество снесенных бесскорлупных яиц уменьшается на 5,5%.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

Инактивированная вакцина против синдрома снижения яйценоскости-76 птиц, включающая инактивированный вирус синдрома снижения яйценоскости птиц-76 и адъювант, отличающаяся тем. что, с целью повышения иммуногенной активности и стабильности, в качестве инактивиро- ванного вируса синдрома снижения яйценоскости птиц-76 используют инактивированный бис-этилениминоэтилоксами- дом вирус с титром до инактивации 1024-4096 ГАЕ/0,5 мл, а в качестве адью- ванта - эмульсию, включающую соевое масло, соевый лецитин, сорбит и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%;

суспензия инактивированного бис-этилениминоэтилоксамидом вируса синдрома

снижения яйценоскости

птиц-76 с титром

до инактивации 1024-4096 ГАЕ/0,5 мл 50

соевое масло4,5-6,5

соевый лецитин0,5-0.75

сорбит2-3

водаостальное.

Использование: биотехнология, ветеринарная вирусология, в частности изготовление вакцины против синдрома снижения яйценоскости - 76/ССЯ-76/ для профилактики указанного заболевания. Сущность изобретения: вакцина включает в себя инак- тивированный посредством бис-jS-зтилени- миноэтилоксамида вирус ССЯ-76 штамма 88/78 и масляный адъювзнт на основе соевого масла и соевого лицитина при определенном соотношении компонентов, Вакцина является не реактогенной, безвредной для привитой птицы, титр, антител при этом достигает 8,1-9,1. лог2. .. . . СО с