Питательная среда для культивирования штаммов бактерий СоRYNевастеRIUм (ВRеVIвастеRIUм)-аммоNIаGеNеS-продуцентов уридин-5 @ -монофосфата и урацила Советский патент 1993 года по МПК C12N1/20 C12P19/32 C12P17/12 

смесь дрожжевого автолмзата в количестве 2,0-3,0 мас.% с кукурузным экстрактом в количестве 0,5-1,0 мае.%,

Прим ер 1, Культуру Corynebacterlum (Brevibacterium) ammoniagenes B-5404 со скошенного агара Хоттингера переносят в жидкую посевную среду следующего состава, мзс.%;

Техническая глюкоза2,0

Пептон1,0

Дрожжевой экстракт1,0

NaCI0,25

ВодаДо 100

Посевной материал выращивают в колбах емкостью 750 мл, содержащих 75 мл среды на качалке (240 об/мии)-при 34°С в течение 24 ч. Посевной материал в количестве 10 об. % переносят в ферментационную среду следующего состава, мас.%:

Техническая глюкоз.а12,0

Дрожжевой экстракт4,0

Мочевина0 72

КН2Р043,0

MgSCM -7Н201,0

Вода -. До 100

Среду стерилизуют отдельно в виде 40%-ного раствора при 0,5 атм 30 мин. После стерилизации рН ферментационной среды доводят 7 н. раствором КОН до 7,3 и добавляют раствор мочевины,

Процесс ферментации осуществляют в колбах емкостью 750 мл, содержащих 30 мл среды на качалке, делающей 350 об/мин, при 34°С. После 144 ч ферментации в куль- туральной жидкости накапливается 12,5 г/л УМФ и 8,5 г/л урацила.

Пример 2, Штамм, условия выращивания- посевного материала, состав посевной среды и условия ферментации те же, что в примере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мас.%:

Техническая глюкоза14,0

Дрожжевой экстракт5,0

Мочевина0,84

КН2Р043,0

MgS04 7Н201,0

ВодаДо 100

После 144 ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 12,1 т/л УМФ и 8,8 г/л урацила.

П р и м е р 3. Штамм, условия выращивания посевного материала, состав посевной среды и условия ферментации те же, что sпримере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мас,%:

Техническая глюкоза -12,0

Дрожжевой автолизат3,0

Мочевина.0,72

КН2Р043,0

MgS04 7Н201,0

ВодаДо 100

После 144 ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 10,8 г/л УМФ и 8,8 г/л урацила.

Пример 4. Штамм, условия выращивания посевного материала, состаз посевной среды и условия ферментации те же, что в примере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мас.%:

Техническая глюкоза14,0

Дрожжевой автолизат5,0

Мочевина0,84

КН2Р043,0

MgS04 7Н201,0

ВодаДо 100

После 144 ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 11,8 г/л УМФ и 8,7 г/л урацилз.

П р и м е р 5. Штамм, условия выращивания посевного материала, состав посевной среды и условия ферментации те же, что з примере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мзс.%: Техническая глюкоза12,0

Дрожжевой экстракт3,5

Кукурузный экстракт0,5 .

Мочевина0,72

КН2Р04.3,0

7Н-;01,0

Вода До 100

После 144.ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 12,3 г/л УМФ v, 7,9 г/л урацилз,

. П р и м е р 6. Штамм, условия выращивания посевного материала, состав посевной среды и условия ферментации те же, что в примере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мзс.%: ; Техническая глюкоза12,0

Дрожжевой автолизат 2,0

Кукурузный экстракт1.0

Мочевина0,72

КН2Р043,0

MgSO-i 7Н201,0

ВодаДо 100

После 144 ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 11,0 г/л УМФ и 8,0 г/л урацила.

Пример. Штамм, условия выращивания посевного материала, состав посевной среды и условия ферментации те же, что в примере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мас.%: Техническая глюкоза10,0

Дрожжевой автолизат3,0

Кукурузный экстракт0,5

Мочевина0,6

KHzPO-r2,0

MgSCM 7HaO0,8

ВодаДо 100

После 144 ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 10,9 г/л УМФ и 8,2 г/л урацила.

ПримерЗ, Штамм, условия выращивания посевного материала, состав посевной среды и условия ферментации те же, что в примере 1. Отличие заключается в составе ферментационной среды, мае,%:

Техническая глюкоза16,0

Дрожжевой экстракт3,0

Кукурузный экстракт1,0

Мочевина0,96

КН2Р044,0

MgSOo 7НаО2,0

ВодаДо 100

После 144 ч ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 10.8 г/л УМФ и 7,9 г/л урацила.

П риме р9. Состав посевной и ферментационной сред, условия выращивания посевного материала и условия ферментации те же, что в примере 1. Отличие заключается в штамме, который культивируется на заяв- ляемой среде. Используется прототрофный по аденину штамм Cory.nebacterium (Brevibacterlum) ammonlagenes F-3-1, Штамм отличается от родительского штамма В г. ammonlagenes 79-5 (ВКПМ В-3279) (а.с. 790781) резистентностью к арсенату и способностью к росту на среде без адеиина. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В- 5553.

После 144 ч.ферментации в культураль- ной жидкости накапливается 11,5 г/л УМФ и 9,0 г/л урацила.

Таким образом, предлагаемая среда для культивирования прототрофных штаммов Со гу ne bacterium (Brevibacterlum) ammonlagenes позволяет повысить выход УМФ и урацила и снизить их себестоимость за счет того, что она в отличие от известной среды не нуждается в добавлении чистых аминокислот, витаминов и азотистых оснований.

Ф о р м у л а и э о б р е т е н и я

1.Питательная среда для культивирования штаммов бактерий Corynebacterlum (Brevibacterlum) ammonlagenes - продуцентов уридин-5 -монофосфата и урацила, содержащая техническую глюкозу, мочевину, 7Н20, КНаРОз, источник ростовых факторов и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода целевых продуктов и снижения их себестоимости, среда содержит компоненты в следующем соотношении, мае. %:

Техническая глюкоза10,0-16,0

Мочевина0,6-0,96

КН2Р042,0-4.0

7Н200,8-2.0

Источник ростовых - факторов0,5-5,0

ВодаОстальное

2.Питательная среда по п. 1, о т л и ч а- ю щ а я с я тем, что в качестве источника ростовых факторов она содержит дрожжевой экстракт в количестве 4,0-5,0 мас.%, или дрожжевой автолизат в количестве 3,0- 5,0 мас.% или смесь дрожжевого экстракта в количестве 3,0-3,5 м ас,% с кукурузным экстрактом а количестве 0,5-1,0 мас.%, или смесь дрожжевого автолизата в количестве 2,0-3,0. мас.% с кукурузным экстрактом в количестве 0,5-1,0 мас.%.

Использование: биотехнология, микробиологическая промышленность. Предлагается питательная среда нового состава, пригодная для культивирования прототроф- ных по аденину штаммов Corynebacterlum Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается питательной среды для культивирования штаммов Corynebacterium (Brevlbacterium) ammoniagenes - продуцентов уридин-5 -монофосфата (УМФ) и урацила. Целью изобретения является увеличение выхода УМФ и урацила и снижение их себестоимости. Предлагаемая питательная среда содержит техническую глюкозу, мочевииу. КНаРСМ, MgS04 7НаО, источник ростовых факторов и воду при следующем соотношении, мае. %: (Brevibacterlum) ammoniagenes - продуцентов уридин-монофосфата, которая включает глюкозмочевину, минеральные соли и в качестве ростовых факторов содержит дрожжевой экстракт, или дрожжевой автолизат, или смесь дрожжевого экстракта с кукурузным экстрактом, или смесь дрожжевого ав- толизата с кукурузным экстрактом в определенном оптимальном соотношении компонентов. В результате использования предлагаемой среды достигается максимальный из известных выход целевых продуктов уридин-м.онофосфата и урацила (соответственно 12,5 и 8,5 г/л), при этом штаммы не накапливают в культуральной жидкости побочных продуктов ферментации: инозин-монофосфата и гипоксантина. Описываемая среда позволяет повысить рентабельность процесса биосинтеза целевых продуктов и уменьшить их себестоимость. 1 з.п. ф-лы. Техническая глюкоза10,0-16,0 Мочевина0,6-0,96 КН2Р042,0-4,0 MgS04 -7H200,8-2,0 Источник ростовых факторов0.5-5,0 ВодаОстальное В качестве источника ростовых факторов в состав среды входит дрожжевой экстракт в количестве 4,0-5,0 мас.% или дрожжевой автолизат в количестве 3,5-5,0 мас.% или смесь дрожжевого экстракта в количестве 3,0-3,5 мас.% с кукурузным экстрактом в количестве 0,5-1,0 мас.%, или 00 СА) ю N) VI