Кормовая добавка для жвачных животных Советский патент 1993 года по МПК A23K1/00 

Изобретение относите к кормопроизводству..

Цель изобретения: повышение стабильнее™ добавки при рН около 6 и выделение

бк 2,

ологически активного вещества при рН

Изобретение иллюстрируется .следую- щ|1ми примерами.

Пример 1. Получение добавки пол- имериз.

N-карбоксиангидрид N-карбобензокси Ылизина полимеризуют в присутствии инициатора (метилата натрия) в диоксане при температуре 20°С, Исчезновение мономера из реакционной среды позволяет следить за его полимеризацией. Полимеризация за- кгтчивается через 75 часов. Полученный пЬлимер имеет вид вязкого продукта.

Полимер обрабатывают уксусной кислотой, насыщенной бромистоводородной кислотой, в течение 30 мин.

Полученный осадок промывают этиловым спиртом и высушивают. После растворения в воде и диализа полученный поли L Л11зин выделяют из раствора путем лиафиГ ;fлизации. Молекулярный вес составляет порядка 290000 дальтон.

Дезаминирование поли 1 лизина позволяет проверить наличие свободных аминогрупп. После кислотного гидролиза анализ показывает один единственный пик, соответствующий наличию а-амино Ј-гидрокси- капроновой кислоты.

N-карбоксиангидрид N-карбобензокси L лизина получен путем барботирования безводного фосгена в суспензии N-карбобензокси L лизина в безводном тетрагидро- фуране при температуре 45°С. После окончания реакции барботирование безводного азота позволяет удалить излишек фосгена.

После испарения растворителя продув растворяется в этиилацетате. Растворитель испаряется, а остаток забирается этилаце- татом Операция повторяется дважды. N- карбоксиангидрид N-карбобензокси L лизина кристаллизируется в результате медленного добавления гексана в его раствор в этилацетате до соотношения 1-1 (по объему),v

СО

с

с ы о о ю ю

со

Полученные кристаллы промываются смесью гексана с этилацетатом (в пропорции 9-1 по объему). Кристаллы плавятся при 97°С.

Пример 2. Поли-Ышзин, растворенный в пропорции 5 мг/см буферного фосфата натрия (100 мМ) с рН 6,5, содержащего 150 мМ хлористого натрия, выдерживают при температуре 4°С. При энергичном перемешивании и поддержании постоянного рН путем добавления щелочи натрия 0,1 N добавляют 1 моль N-карбоксиангидрида мети- онина на остаток лизина.

После выдерживания в течение ночи при температуре 4°С продукт диализируют водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируют.

В результате получают поли L метио- нил-поли-1 -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0,55, а содержание остатков измененного лизина составляет 27%.

Производительность фиксации составляет порядка 80%.

N-карбоксиангидрид L-метионина имеет вид маслянистого продукта и получается в вышеописанных условиях для последующего получения N-карбоксиангидрида N- карбобензокси L-лизина,

Пример 3. Действуют как было описано в примере 2, но используют 3 моля N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли L-метионил-по- ли L-лиэин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 1,90, а содержание остатков измененного лизина равно 49%. .

П р и м е р 4. Действуют как было описано в примере 3, но используют 5 молей N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли-Ь-метионил-по- ли-Ь-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 3,40, а содержание остатков измененного лизина составляет 70%.

Пример 5. Поли-Ь-лизин растворяют при температуре 4°С в буферном растворе бикарбоната натрия (100 мМ) при рН 10,2, содержащем 150 мМ хлористого натрия. Добавляют 1 моль N-карбоксиангидрйда L-метионина на остаток лизина. Дают температуре подняться до 20°С, а рН реакционной смеси регулируют до рН 3-4 в течение 10 мин. После охлаждения до 4°С продукт диализируют дистиллированной водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируется.

Получают поли -метионил-поли-Ь-ли- зин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0,45, а содержание остатков измененного лизина составляет 45%.

Пример 6. Действуют как было описано в примере 5, но добавляют 1,2 моля

N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли- -метионил-по- ли-1--лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0.53, а содержание остатков измененного лизина составляет50%.

Пример. Действуют как было описано в примере 5, но добавляют 3 раза по 1 молю N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли-1-метио5 нил-поли -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 2,10, а содержание остатков измененного лизина составляет 66%.

Наличие лизина и метионина в полиме0 pax может быть выявлено опытным путем в результате последовательного переваривания при помощи ферментов, имеющихся в пищеварительном тракте, например, пепсина, поджелудочного сока, кишечной амино5 пептидазы.

В табл. 1 приведены относительные количества лизина и метионина, высвобождающиеся входе переваривания.

Результаты таблицы показывают, что

0 примеры 4 и 7 не гарантируют достаточного расщепления сополимера. В этих примерах цепь полилизина включает более 50% остатков модифицированного лизина (пример 4, где 70% звеньев лизина модифициро5 ваны и пример 7, где модифицированы 66% звеньев лизина).

Поэтому сополимеры, у которых максимально 50% структурных групп лизина в цепи полилизина замещены цепью

0 полиметионина, являются эффективными.

В зависимости от типа используемого полимера уровень наличия обеих аминокислот очень различен.

Обычно продукты, полученные в резуль5 тате полимеризации при рН 6,5 и имеющие относительно высокое содержание метионина (пример 3), легко гидролизуются, тогда как продукты, полученные при рН 10,2 и отличающиеся высоким содержанием ос0 татков измененного лизина (пример 7), менее доступны для протеолитических ферментов. Кроме того, продукты, полученные при рН 6,5 и имеющие высокое содержание остатков измененного лизина,

5 гидролизуются легче, чем продукты, полученные при рН 10,2 путем последовательных добавлений N-карбоксиангидрида метионина,

Обычно удовлетворительно наличие обеспечивается в случае, когда соотношение метионин-лизин равно 2 или более предпочтительно около 1, причем это соотношение может изменяться в зависимости от используемого метода получения пол- иметионилполилизина.

Питательная ценность полиметионил- полилизинов, используемых в композициях по настоящему изобретению, была выявлена на примере крысы, получавшей питание с недостаточным количеством лизина и ме- тионина. Например, использовали поли-L- лизин и поли-1 -метионил-поли-1 -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляло порядка 1, а содержание остатков измененного лизина составляло 30%. Пол- ученные результаты представлены в табл. 2.

Из вышеприведенной таблицы следует, что добавка в базовой режим лизина и ме- тионина существенно увеличивает прирост животных и что прирост животных, получа- ющих режим с добавкой поли- -метионил- поли-Ь-лизина, не очень отличается от прироста животных, режим питания которых дополнен свободными аминокислотами. Кроме того, добавление лизина в виде поли-1 -лизина оказывается более эффективным, чем добавление свободного лизина.

Полиметионил-полилизин по настоящему изобретению растворимы, в рубце, но обладают стойкостью к бактериальному разложению. Например, поли- -метионил- поли-Ь-лизин (0,5 г) может быть помещен в нейлоновые мешочки, размер ячеек которых составляет 300x300 микрон. Мешочки инкубируются в течение 48 часов в рубце овец с фистулами. Затем мешочки вынимаются и промываются. Количество остаточного активного вещества определяется соответствующим методом, Количества L-лизина и L-метионина, оставшиеся, в нейлоновых мешочках, составляют соответственно 80 и 60% исходных количеств. Когда L-лизин и L-метионин принимаются в свободном виде, лишь малая часть этих ами- нокислот избегает микробной ферментации.

Таким образом, полиметионил-полили- зин по настоящему изобретению представляет собой очень хорошие добавки в рацион питания жвачных животных.

Настоящее изобретение касается композиций для кормления скота, содержащих достаточное количество полнметионил-пол- илизина.

Полиметионил-полмлизины могут добавляться в готовые комбикорма.

Они могут добавляться также в кормовые добавки, чаще всего вместе с другими веществами, например, витаминами и ми-. неральными солями. Эти кормовые добавки могут либо добавляться в рацион, либо потребляться отдельно в чистом виде и составляют обычно от 5 до 20% кормового рациона.

Премиксы, используемые для приготовления кормовых добавок или кормов, содержат обычно от 1 до 20% полиметио- нил-полилизина.

Сами премиксы получаются обычно из концентратов, содержащих от 99,9 до 20% полиметионил-полилизина, к которому добавляют, например, пищевые красители, амортизаторы, диспергирующие вещества и пищевые наполнители.

Концентраты и премиксы имеют обычно порошкообразную форму. Кормовые добавки и комбикорма могут быть либо в виде порошка, либо в виде гранул, полученных обычными способами,

П р и м е р 8. К 1000 г фуража равномерно вводят диспергированием 20 г порошко- образного кормового концентрата, содержащего 10% полиметионил-полилизина, в котором соотношение метионин-лизин составляет около 1.

Получают корм, который непосредственно усваивается животными.

Формула изобретения Кормовая добавка для жвачных животных, включающая биологически активное вещество и наполнитель, отличающая- с я тем, что, с целью повышения стабильности добавки при рН около 6 и выделении биологически активного вещества при рН 2,5, в качестве биологически активного вещества добавка содержит полиметионил- полилизин с мол.м. 440000-850000 при соотношении метионил:лизин 0,4-2,0 в количестве 0,1-1,0% и наполнитель - остальное.

.Таблица 1

Изобретение относится к кормопроизводству. Сущность: кормовая добавка для жвачных животных включает биологически- активное вещество и наполнитель, в качестве биологически-активного вещества добавка содержит полиметионил-полилизин с мол.м. 440000-850000 при соотношении метионин-лизин 0,4-2,0 в количестве 0,1-1,0% и наполнитель-остальное. 2 табл.

Таблица 2