Способ получения высоконенасыщенных однокислотных и разнокислотных фосфатидилсеринов, исходя из а,р-нзопропилиденглицерина, сложный диэфир которого конденсируют с серином, защищенным по карбоксильным и амииным группам, известен.
С целью упрощения процесса и повышения выхода продукта, предлагается способ, состоящий в том, что а, р-изопропилиденглицерин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в присутствии хинолина, полученный дихлорид без выделения обрабатывают N-фталоилсерином в диметилформамиде в присутствии пиридина и образующийся продукт после кислотной обработки выделяют в виде бариевой соли, которую далее подвергают взаимодействию с хлорангидридами линолевой или олеиновой кислот в диметилформамиде в присутствии пиридина.
Пример 1. Бариевая соль а-глицерилфосфорил-М-фталоилсерина (I).
К 2,1 г а, р-изопропилиденглицерина (т. кип. 92-94°С/20 мм, п 1,4381) приливают при перемешивании 3 г хлорокиси фосфора и 2,41 мл хинолина при 0°С. Реакцию ведут 1 час при 25°С, после чего температуру понижают до 0°С и прибавляют к смеси 4,4 г N-фталоилсерина (т. пл. 149,5- 150,5°С) в 100 мл диметилформамида и 5 мл
пиридина. Реакционную массу оставляют при 18-20°С на 20 час, затем к ней прибавляют 1,5 мл воды и перемешивают 1 час. Диметилформамид удаляют в вакууме (20 .).Остаток растворяют в воде, отфильтровывают, подкисляют 3%-ной соляной кислотой до рН 1,5-2 и оставляют на 3,5 час при 18-20°С, Примеси отделяют и водный раствор экстрагируют хлороформом (3 раза по 100 мл). Воду отгоняют в вакууме (20 мм). Остаток растворяют в 00 мл метилового спирта, фильтруют, а растворитель удаляют. К получаемому веществу в 75 мл воды прибавляют насыщенный раствор гидроокиси бария дорН8-9.
Реакционную массу оставляют на 12 час при 18-20°С. Избыток ионов бария удаляют углекислым газом. Раствор фильтруют. Ионы хлора связывают обработкой и двухчасовым перемешиванием реакционного раствора с
8,7 г углекислого серебра. Осадок отфильтровывают. Через раствор пропускают сероводород. Сульфиды отделяют. Воду отгоняют в вакууме (20 мм). Полученное вещество обрабатывают 150 мл метилового спирта. Осадок
отфильтровывают. Растворитель упаривают. Эту операцию повторяют трижды. Полученное вещество сушат 1,5 час при давлении 0,1 мм и 40-50°С. Выход 8,2 г (79,57о). CwHuOioBaNP.
Вычислено, %: Ва 26,14; N 2,67; Р 5,91.
а-(а , Р- Дилинолеоил) -глицерилфосфорил-N-фталоилсерин (II).
К 2 г вещества (I) в 150 мл диметилформамида и 2,8 мл пиридина прибавляют 12 г хлорангидрида линолевой кислоты (т. кип. 150-152°С/0,5 мм. Реакционную массу оставляют при на 48 час, затем выливают ее в 400 мл 5%-ной соляной кислоты и экстрагируют хлороформом (4 раза по 40 мл. Хлороформный раствор промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (2 раза по 20 мл) и сушат сернокислым натрием. Хлороформ удаляют. Остаток (12 г в 40 мл хлороформа хроматографируют на 120 г кремниевой кислоты. Конечный продукт элюмируют 120 мл смеси хлороформа и метилового спирта (4:1). Растворители отгоняют, продукт сушат 2 час при 20-25°С и давлении 0,15 мм. Получают воскообразное вещество, хорошо растворимое в хлороформе, эфире, бензоле, метиловом спирте, образующее эмульсии с водой. Индивидуальность вещества подтверждает хроМатографический анализ в тонком слое кремниевой кислоты в системах гептан-эфир (1:1, вещество на старте) и дпизобутилкетон - уксусная кислота - вода (40 :25 :5, Rf 0,86). Выход 3,1 г (88,9%).
CsoH..
Найдено, %: N 1,41; Р 3,18.
Вычислено, %: N 1,53; Р 3,39.
ее -(а , (3- Дилинолеонил)глицерилфосфорилсерин (III).
К 3 г соединения (II) в 150 мл метилового спирта добавляют 0,25 мл гидразингидрата при 20°С. Температуру реакционной массы повышают до в течение 2,5 час. Горячий раствор фильтруют, подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл). Раствор охлаждают до 5°С, фильтруют и упаривают. Остаток растворяют в 15 мл хлороформа, охлаждают до 5°С и отделяют примеси. Растворитель удаляют. Остаток (2,1 г) в 20 мл хлороформа хроматографируют на 30 г кремниевой кислоты, а затем фосфатидилсерин смывают 60 мл смеси хлороформа и метилового спирта (4:1). Растворители отгоняют. Получают воскообразное вещество, хорошо растворимое в бензоле, хлороформе, эфире, метиловом спирте, дающее с водой устойчивые эмульсии. Ршдивидуальность вещества подтверждает тонкослойная хроматография на кремниевой кислоте в системе диизобутилкетон - уксусная кислота-вода (40 : 25 : 5, Rf 0,8). Выход 0,972 (69,2%).
C42H780loNP.
Найдено, %; N 1,94; Р 3,81.
Вычислено, %: N 1,79; Р 3,96.
Пример 2. а-(а-олеоил)глицерилфосфорилфталоилсерин (IV).
Получают, исходя из 1 г бариевой соли (I) в 100 мл диметилформамида, 0,7 мл пиридина и 3 г хлорангидрида олеиновой кислоты (т. кип. 148-150°С/0,3.иж) при 18-20°С, маслообразное вещество, хорошо растворимое в
бензоле, хлороформе, эфире, метиловом спирте, образующее с водой прочные эмульсии. Индивидуальность вещества определяют тонкослойной хроматографией на кремниевой кислоте в системах гептан-эфир (1:1, вещество на старте) и диизобутилкетон-уксусная кислота-вода (40 : 25 : 5, Rf 0,6). Выход 1,15 г (92,7%).
Cg HisOiiNP.
Найдено, %: N 2,07; Р 4,53. Вычислено, %: N 2,14; Р 4,75. а-(а- Олеоил-р- линолеоил)глицерилфосфорил-Ы-фталоилсерин (V).
К 1 г соединения (IV) в 40 мл метилового спирта добавляют насыщенный раствор гидроокиси бария в метиловом спирте до рН 8-9. Избыток ионов бария удаляют Зглекислым газом, раствор фильтруют, удаляют метиловый спирт, а остаток сущат 1,5 час при 18-20°С/0,23 мм. К полученному веществу в 150 мл диметилформамида и 1,5 мл пиридина прибавляют 3 г хлорангидрида линолевой кислоты и проводят реакцию, как описано для вещества (II). Получают маслообразное вещество, хорошо растворимое в бензоле, хлороформе, эфире, метиловом спирте, дающее с водой устойчивые эмульсии. Индивидуальность вещества определяют тонкослойной хроматографией на кремниевой кислоте в системах гептан-эфир (1 ; 1, вещество на старте) и диизобутилкетон-уксусная кислота-вода (40 : 25 : 5, Rf 0,86). Выход 0,92 г (65,7%).
CsoHggOiaNP.
Найдено, %: N 1,46; Р 3,22. Вычислено, %: N 1,51; Р 3,37. а-(а -Олеоил-|3- линолеоил)глицерилфосфорилсерин (VI).
Получают в условиях, описанных для вещества (III), из 0,72 г соединения (II) в 90 мл метилового спирта и 0,07 мл гидразингидрата маслообразное вещество, хорощо растворимое в бензоле, хлороформе, эфире, метиловом спирте, дающее с водой устойчивые эмульсии. Индивидуальность вещества подтверждается тонкослойной хроматографией на кремниевой кислоте, закрепленной гипсом, в системе диизобутилкетон-уксусная кислота- вода (40:25:5, Rf 0,8). Выход 0,25 г (40,7%).
CiaHreOioNP.
Найдено, %: N 2,01; Р 4,02.
Вычислено, %: N 1,79; Р 3,95.
Предмет изобретения
Способ получения высоконенасыщенных однокислотных и разнокислотных фосфатидилсеринов на основе а, 3-изопропилиденглицерина, отличающийся тем, что, с целью упронхения процесса и повышения выхода, а, р-изопропилиденглицерин последовательно подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в присутствии хинолина, N-фталоилсерином в :5 кислотой, гидроокисью бария и хлораигидридами лииолевой или олеиновой кислот в ди6метилформамиде в присутствии пиридина при нги-рсвгшии.
