СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЯДОХИМИКАТА ТРИХЛОРМЕТАФОСА-3 В МЯСЕ И ДРУГИХ ЖИВОТНЫХ ТКАНЯХ Советский патент 1969 года по МПК G01N30/93 

Ядохимикат трихлорметафос-3 является одним из наиболее перспективных фосфорорганическпх препаратов, ши;)око применяемых в настоящее время в растениеводстве и животноводстве.

Как и другие фосфорорганические соединения, трихлорметафос-3 .может быть токсичным для животных и для человека и вызывать отравления. Профилактика этих отравлений сводится к своевременной диагностике, для чего несбходи.мы иростые и чуствительные снособы определения этого ядохимиката в иродуктах животного иропсхожден 1я.

Известный сиособ определения трихлорметафоса-3 в молоке ие может быть использован для определения этого ядохимиката в .мясе и других животных тканях.

Предложен способ определения ядохимиката три.клор.метафоса-3 в мясе, печени, почках и других органах при помощи хроматографии в тонком слое алюминия, при котором используют следующие реактивы:

Окись алюминия для хроматографии I степени активиости, просеянная через снто в 150 меш.

Гипс .медицинский, просеянный через сито

Метиловьп спирт

6%-ный раствор щелочи на метаноле - бутаноле (I . 1}

Пормальиый гексан (перегнанный)

1%-ный раствор 4-аминоантнпнрнна

1,4|,ч,-ный раствор феррпциаиида калия

Для приготовления пластинок окись алюминия и гипс в соотношен1ги 3 : 1 тщательно смешивают в колбе с притерто пробкой, 2,5 г этой смеси иомещают в эрленмейеровскую колбу емкостью 25 см-- и добавляют 3 слг-смеси хлороформа и метанола в соотнощении 7:3. Тщательно иеремещав, содержимое колбочки выливают на стеклянную пластинку размером 9X12 и быстро распределяют смесь ровным слоем. После высыхания иластинки выдерживают в сушильном шкафу ирн 70С в течение 1 -1,5 час. После этого пластинки готовы для работы.

Зате.м приготовляют экстракт из мяса следующим образом.

Пробу мяса весом 25,0 г измельчают ножницами, растирают в ступке со стеклом и помещают в стеклянную банку с притертой пробкой, в которую наливают 25 мл петролейного эфира.

руют через бумажный фильтр с 2 г сульфата натрия в чашку Петри диаметром 8 см. Навеску промывают двумя порциями (по 10 мл) петролейного эфира, пропуская экстракт через тот же фильтр. Содержимое чашки Петри испаряют досуха под струей воздуха.

Пробу очиш,ают от жиров охлажденным до О-2°С ацетоном. В чашку Петри наливают 0,5 слгз охлажденного ацетона, растворяют в нем содержимое чашки и фильтруют через обеззоленный бумажный фриьтр диаметром 55 мм ,в пенициллиновый флакон. Таким образом смывают яд с чашки четыре раза. Проба очищается лучше, если после первой фильтрации ацетонового экстракта пробы отстаиваются .в холодильнике в течение суток. При этом жир оседает на дно, не забирая с собой яда, а верхний слой ацетона становится прозрачным.

Флаконы с фильтратами ставят на лед и цспаряют под струей воздуха до необходимого количества (0,5 ). В случае помутнения раствора или выпадания хлопьев производят фильтрацию вторично. Фильтрат испаряют под струей воздуха до 0,1 мм.

Полученный экстракт в количестве 10 или 20 мкл наносят на стартовую лпнию пластинки (на расстоянии 1,5 см от края ее). Па одну пластинку размером 9X12 наносят, под струей воздуха не более трех нроб, так чтобы величина пятен была одинаковой и не превышала IB диаметре 0,5 см.

После высыхания нанесенного раствора пластинки помеш.ают в камеру с растворителем, погружая ,в н-гексан на 0,5 см. Притертая крышка должна обеспечить герметичность камеры.

Разделение продолжается 5-6 мин. Дают подняться фронту па высоту 10 см от линии старта, вынимают пластинку и отмечают линию фронта. После просушивания пластинку опрыскивают 6%-ным раствором ш,елочи на метаноле - бутаноле (1:1) и прогревают при 70°С 20 мин.

Проявление производят сначала 1%-ным раствором 4-а1МИНоантипирина, затем 1,4Voным раствором феррицианида калия. После опрыскивания на белом фоне сорбента проявляются розовые пятна. При нанесении на пластинку 1 мкг трихлорметафоса-3 проявляются розовые пятнышки величиной с горошину.

При нанесении больших количеств проявляются пятна большей величины и более интенсивно окрашенные. При нанесении яда в количестве 10 и более мкг пятна становятся ярко-1малиновыми. Определив количество яда в 10 мкл экстракта и зная количество испытуемого раствора, .можно определить содержание яда в пробе. Величина Rf ТХМ-3 составляет 0,32--0,36.

Для количественного определения ТХМ-3 в пробе калибруют шкалу стандартов путем нанесения на пластинку чистого ТХМ-3 со 100% АД В в дозе 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 100 мкг (каждую дозу наносят в количестве 10 мкл). Далее повторяют все описанные процессы. Интенсивность окраски и величину полученных пятен сравнивают с величиной и интенсивностью пятен шкалы. Чувствительность метода 1 мкг.

Предлагаемый способ определения трихлорметафоса-3 в мясе и других тканях животного происхождения нрост по технике исполнения, занимает .мало времени, высокочувствителен, не требует дорогостоящих реактивов, аппаратуры и приборов.

В отличие от известных способов определения фосфороргапических соединений данный способ является специфичным для трихлор.метафоса-3 и его аналогов.

Предмет изобретения

Способ определения ядохимиката трихлорметафоса-3 в мясе и других животных тканях, отличающийся тем, что ядохи.микат экстрагируют из исследуемой пробы мяса петролейным эфиром при температуре 2-4°С, полученный экстракт фильтруют через бумажный фильтр с сульфатом натрия, испаряют

фильтрат досуха, очищают полученный сухой

остаток от жиров охлажденным до 0-;2°С

ацетоно.м с последующей фильтрацией через бу.мажный фильтр, испаряют фильтрат до 0,1 мл при его охлаждении и наносят этот

экстракт в количестве 10-20 мкл на пластинку с тонким слоем алюминия, отделяют ядохимикат в растворителе к-гексане с последующим опрыскивание.м пластинки б-Уо-ным раствором щелочи при нагревании, проявлением

розовых пятен яда одни.м из известных индикаторов и сравнением их со стандартом.