Способ определения карбарила Советский патент 1982 года по МПК G01N33/00 A23K1/22 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРБАРИЛА

1

Предлагаемое изобретение относится к определению пестицидов и может быть использовано в комбикбрмовой промышленности и других отраслях промышленности, где необходимо определять наличие содержания карбарила (севина) в продуктах.

йС -нафтил-М-метилкарбамит (карбарил, севин) относится к ариловым эфирам N-метилкарбаминовой кислоты.

Для обнаружения остатков карбарила в растительных тканях, фруктах, компотах, маринадах, мясе, органах животных и птицы известны колориметрические методы. Они основаны на гидролизе карбарила щелочью с последующим сочетанием продуктов гидролиза с диазотированным паранитроанилином или диобозензосульфокислотрй I.

Недостатками колориметрических методов при анализе кормов и комбикормовых смесей является неполная очистка экстрактов от жира, восков и других коэкстрактибных веществ, а также их низкая чувствительность (0,1-0,6 мг/кг).

Известен способ определенная карбарила в биологических субстратах с помощью метода тонкослойной хроматографии (ТСХ), который основан на экстрагировании препарата из анализируемого объекта н-гексаном (или хлороформом), упаривании и очистке водометаполных экстрактов петролейным эфиром, хроматографировании на пластинах «силуфол, гидролизе карбарила спиртовы.м

5 раствором щелочи до 1 нафтола с образованием окрашенного соединения с солью диазония - прочный синий Б или прочный красный ГГ. При использовании этого способа из проб можно экстрагировать в сред д нем 75% содержащегося в тканях карбарила и определять пестицид в количествах 0,01-0,001 мг/кг 2.

Недостатком известного способа при анализе комбикормов является неполная очисткка экстрактов от примесей, так как на хро15 матограммах не достигается разделения карбарила от выков, жиров и пигментов. На пластинке наряду с пятнами карбарила образуются пятна оранжевого цвета, которые накладываются и маскируют исследуемое вещество.

20

Цель изобретения - повышение полноты определения карбарила, упрощение процесса проведения анализа и его удешевление.

Поставленная цель достигается тем, что экстрагирование карбарила проводят экспозицией в холодильнике в течение 15-16 ч, очистку экстракта от сопутствующих примесей осуществляют в 30-40°/о-ном этиловом спирте с последующим вымораживанием, а гидролиз осуществляют одновременно с проявлением, причем в качестве проявляющей смеси используют 0,08-0,1%-ный раствор соли прочный гранатовый в ацетоне с 1 н водным едким натрием в соотношении 1,1 - 1,3.

Пример 1. Навеску корма (сырье или комбикорм) массой 10 г заливают 40 мл гексана и оставляют на ночь в холодильнике (16-15 ч), затем 1 ч экстрагируют на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют в выпарительную чащку, промывая содержимое колбы 2 раза н-гексаном порциями по 20 мл. Фильтр смывают н-гексаном 2 раза по 15 мл. Экстракт в чашке упаривают досуха в вытяжном шкафу при комнатной температуре или используют ротационный испаритель: Для извлечения карбарила и очистки от примесей к сухому остатку приливают 5 мл 40%-ного этилового спирта и тщательно растирают остаток стеклянной палочкой. Затем чащку помещают на 30 мин в морозильную камеру холодильника, после чего ее содержимое фильтруют через делительную воронку. Операцию извлечения и вымораживания повторяют 3 раза. Из водно спиртовой смеси карбарил трижды экстрагируют хлороформом- порциями по 30 мл, каждый раз интенсивно встряхивая делительную воронку 1 мин.

Для того, чтобы избежать образования эмульсии при взбалтывании водно-спиртового раствора с хлороформом, в делительную воронку добавляют 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия. После отстаивания НИЖНИЙ хлороформный слой сливают в выпаривательную чашку через фильтр с безводным сульфатом натрия. Экстракт упаривают досуха при комнатной температуре под тягой. Сухой остаток растворяют в охлажденном ацетоне (хранится в морозильной камере),.тщательно обмазывают стенки чащки покачиванием и количественно переносят на хроматографическую пластинку. Остаток

экстракта в чащке смывают не менее 5 раз. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 60 мин до операции наливают подвижный растворитель.

В качестве подвижной фазы используют системы растворителей: для сырья - гексан - ацетон или гексан - этилацетат в соотношении 3:1, для комбикорма - гексан - ацетон - уксусная кислота в соотношении 70:30:1. После того, как растворитель поднимется на высоту 10 см, пластину вынимают из. камеры и высущивают на воздухе. Для проявления карбарила пластинку опрыскивают из пульверизатора смесью 0,1/о-ного раствора прочного гранатового и 1 н раствора едкого натрия в соотнощении 1:1, выдерживают в сушильном шкафу при температуре около 100°С 3-5 мин. Гидролиз осуществляют одновременно с проявлением пластин. При необходимости хрол.атограмму обрабатывают проявляющим реактивом второй раз.

При наличии карбарила в пробе на пластинке появляются фиолетово-сиреневые пятна, на кремовом фоне, в зависимости от применяемого подвижного растворителя, колеблется в пределах 0,24-0,38. Окраска пятен стабильная и не теряет интенсивности в течение нескольких часов. Количесгвенное определение проводят путем измерения площадей пятен пробы и стандартов, учитывая визуально интенсивность их окрасок. 0 Содержание пестицида вычисляется по формулед

Х -5.%где X - содержание карбарила в анализируемой пробе, мг/кг;

А - количество препарата в стандарте, мкг;

В - навеска пробы, г;

Si:-площадь пятна стандарта, мм2.

Чувствительность способа - 0,001 мг/кг корма.

Для оценки способа проводят анализ по определению внесенных количеств карбарила в навески кукурузы, хлопкового шрота и комбикорма.

Результаты определения карбарила в сырье и комбикормах приведены в табл. 1. Таблица 1

Продолжение табл. 1 7 Образец Внесено, мг/кг 0,20 0,20 1,00 1 ,00 - -Результат анализа показывает, что полнота определения карбарила в комбикормах предлагаемым способом - 90,5- 0,8, хлопковом шроте - 92.,3, кукурузе- 92,,7. Для наглядной иллюстрации приводятся хроЭтапы работы Метод О.А. Калинина биологических субстр Навеска, г2-20 Экстракция Гексаном, хлороформо при перемешивании

переэксМетанолом, петролейным эфиром, хлороформом. Остаток перед хроматографированием растворяют в гексане или метаноле.

Силуфол

Гексан: ацетон (3:1) 9589

этанолом, хлороформом, вымораживание в морозильной камере. Остаток перед хроматографированием растворяют в охлажденном ацетоне.

Силуфол

Для сырья: гексан-ацетон или гексан-этилацетат (3:1), для комбикормов: гексан-ацетон-уксусная кислота (70:30:1) 3 8 Продолжение табл. 1 Карбарил Определено 1 мг/кг % 0,1995,0 0,1890,0 0,8686,0 0,9090,0 Не обнаружено М ± 90,,8 матограммы определения карбарила в сырье и комбикормах. Сравнительная характеристика методов определения карбарила тонкослойной хроматографией приведена в табл. 2. Таблица 2 для Усовершенствованный метод атов для сырья и комбикормов 10 м 2-3 ч Гексаном, настаивают 15-16 ч (на ночь) в холодильнике, затем 1 ч - на встряхивателе.

Метод О.А. Малинина для

Этапы работы биологических субстратов

а) р-р КОН в

роявитель спирте;

б)0,2 р-р соли прочный синий (или прочный крас ный). Сначала опрыскивают первым реактивом (гидролиз) , затем после высушивания - вторым (проявление) .

Точность опре75 0деления

Формула изобретения

Способ определения карбарила, включающий экстрагирование и очистку экстракта, хроматографирование на стандартных пластинах, «силуфол в тонком слое силикагеля, гидролиз и проявление пятен, отличающийся тем, что, с целью повышения полноты определения карбарила и упрощения процесса проведения анализа, экстрагирование карбарила проводят экспозицией в холодильнике в течение 15-16 ч, очистку экстракта осуществляют 30-40%-ным этиловым спиртом с последующим вымораживанием, а гидПродолжение табл. 2

Усовершенствованный метод для сырья и комбикормов

а)0, прочный гранатовый ГВЦ в ацетоне;

б)1 н-водный аОН. Перед употреблением смешивают в соотношении 1:1. Совместители гидролиз с проявлением.

ролиз осуществляют одновременно с проявлением, причем в качестве проявляющей смеси используют 0,08-0,1 /о-ный раствор соли прочный гранатовый в ацетоне с 1 N-водным едким натром в соотношении 1:1 -1:3.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

2.Малинин О. П. Методическое указание по определению микроколичеств пестицидов, в продуктах питания, кормах и внещней среде, ч. VIII с. 190-191, 1977.