СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ Советский патент 1971 года по МПК C12N9/00 

Изобретение относится к микробиологической промышлеииости, точнее к способам выделения биологически активных веществ, например ферментов, из культуральной жидкости.

По известному способу выделение ферментов из культуральной жидкости осуществляют, например, введением в нее дубильных веществ, отделением иолученного осадка, введением в него растворителя и последующей промывкой и сущкой, причем в качестве дубильных веществ ирименяются природные дубильные вещества, что связано с существеннылп затратами.

По предлагаемому способу для выделения ферментов из культуральной жидкости в качестве дубильного вещества используют синтетические органические соединения группы синтана, общей формулы

(СНз)п

1СН,)„

(СООН)р

(COOH)f

(Y).

где К И или СНз, С-мостики

i. - сульфон-мостики 1. - сульфокси-люстики 1.4Х - S02-NH - сульфонимид-мостики 1. - имин-мостики.

Способ осуществляют следующим образом. В культуральную жидкость вводят синтетическое дубильное вещество в количестве 0,5-

5%. Смесь перемешивают при нагревании до , при комнатной температуре или при охлан дении. Выпавший при этом осадок отделяют, например, фильтрацией, затем дубильные вещества экстрагируют органическим растворителем, иолученный осадок отделяют и высушивают.

В качестве органических растворителей применяются одно- и многоатомные спирты, смешивающиеся с водой кетоны, эфиры гликолей, диоксан, тетрагидрофуран и др. Для того чтобы избежать падения активности содержащих энзим продуктов осаждения, экстракцию синтетических дубильных веществ проводят на холоду, иреимущественно при О-

. Выпавший продукт в зависимости от требований необходимой чистоты либо промывают растворителями, либо тотчас высушивают.

lis. 1,5 л содержащего амилазу фильтрата культуры добавляют в раствор карбоната натзН 7,0. Далее, перемешивая, добаврия Д| 5Тв5{5 СТЯгге р«Ческв1йа дубильиого веf.J2gre

ляют

ят.

™naJJpU jKTOB поликонденсации одществ

H BftlTOtl

VKi в смеси,|2%. Осадок отноатойи..Ш,5|11М промывают ацетоном при

деля1| При вТясушивании получают 3,7 г

0-5 вещества с общей активностью

сухого 1765000 ед. амилазы.

Пример 2. Для осаждения протеазы используют фильтрат культуры Bacillus subtilis. К 1000 мл фильтрата с общей активностью 4780 ед. протеазы добавляют при рН 7,0 раствор дубильного синтетического вещества также с рН 7,0. Дубильное вещество соответствует типу продукта поликонденсации многоатомных фенолов и ароматических сульфоновых кислот. После перемещивания в течение 2 час при 30°С осадок отделяют, дважды экстрагируют ацетоном и высушивают. Получают 2,2 г сухого продукта с общей активностью 3771 ед. протеазы.

Предмет изобретения

Способ выделения биологически активных веществ, например ферментов, из культуральнои жидкости путем введения в нее дуоильного вещества, отделения полученного осадка с последующей экстракцией из него дубильных веществ органическим растворителем, отделением осадка и высушиванием его, отличающийся тем, что в качестве дубильного вещества используют синтетические органические соединения группы синтана общей формулы

|СНз)п

fCHOn

(COOH)(СООН)р

(У)а

где п 0; 1; 2; 3; q l; 2; р 0; 1; Y OH или МПг; 1.1Х -C(R)2-,

где или СНз, С-мостики

1. - сульфон-мостики 1.3Х - SO - сульфокси-мостики 1.4Х - SOg-Nn - сульфонимид-мостики 1.5Х -NH - имин-мостики.