ЯАШГНО-ТНХНк^;Г:1:Дя| Б*<Б;1ИОТ1-КЛ I Советский патент 1972 года по МПК A61K38/44 

Изобретение относится к области медицины и касается методов получения очищенных ферментов, а именно цитохрома С, который может быть использован в качестве лечебного препарата.

Известен способ получения цитохрома С путем экстракции животного сырья в кислой среде с последующей адсорбцией и элюацией целевого продукта.

Указанный способ не обеспечивает удовлетворительного выхода цитохрома С и приводит к получению препарата недостаточно высокого качества.

Целью изобретения является увеличение выхода и улучшение качества цитохрома С.

Для этого первую стадию экстракции сырья проводят при нейтральном значении рН, равном 7,0-7,5. Далее процесс ведут известными приемами.

Пример. 10 /сг свежих говяжьих сердец измельчают и заливают 10 л воды, содержащей 0,5 г этилендиаминтетрауксусной кислоты. Добавлением 0,1 н. раствора едкого натра доводят рН смеси до 7,5, перемешивают и через 15 мин отжимают на црессе. К остатку добавляют 10 л воды с этилендиаминтетрауксусной кислотой, и концентрированным раствором лимонной кислоты доводят значение рН смеси до 5,0. После двухчасового неремещивания при комнатной темнературе смесь снова отжимают ч прессе и приливают к полученному экстракту 0,1 н. раствор едкого натра до значения рН 7,5. Выпавщий осадок отделяют фильтрованием, а к фильтрату при перемешивании добавляют амберлит в количестве 10 г сухого ионита на 1 л экстракта. Смесь перемешивают 10-15 лшн, отстаивают 1-2 час, раствор сливают, а осадок нромывают декантацией дистиллированной водой. Промытый ионит с адсорбированным цитохромом С обрабатывают .в течение 10 мин раствором поваренной соли, взятым в количестве 2,5% от объема исходного экстракта. Элюат диализируют и затем фракционируют сульфатом аммония при рН 7,5 в пределах 80-100% насыщения. Фракцию, собранную после центрифугирования при 6000 об/мин, растворяют в 50 мл воды и диализируют. После диализа раствор лиофилизируют. Выход- 2,5 г сухого цитохрома С.

Предмет изобретения

Способ получения цитохрома С путем экстракции водой л-сивотного сырья при кислом значении рН с последующей адсорбцией и элюацией целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода цитохрома С и улучшения его качества, сырье предпарительно экстрагируют при нейтральном значении рН н далее ироцесс ведут известными приемами.