СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦИТОХРОМА С Советский патент 1972 года по МПК A61K38/44 

Изобретение относится к производству медицинских препаратов и касается способа получения цитохрома С.

Известен способ получения цитохрома С путем экстракции измельченной сердечной мышцы крупного рогатого скота органической кислотой, обработки сульфатом аммония, центрифугирования, диализа и отделения осадка.

Однако такой способ не обеспечивает получения препарата достаточно высокого качества.

С целью улучшения качества целевого продукта сырье обрабатывают водой, замораживают, размораживают с последуюш;ей обработкой осадка после центрифугирования насыш;енным раствором ,сульфата аммония. После диализа раствор обрабатывают ионообменными смолами и нагревают при температуре 80-90°С.

Пример. 150 кг бычьего сердца освобождают от жира и связок, измельчают, промывают холодной водой, отжимают и замораживают при температуре (-15) - (-25)°С не менее, чем па сутки. После размораживания к 100 кг фарша добавляют 100 л 2,5%ной трихлоруксуоной кислоты и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 час. Экстракт отделяют от фарша, доводят рН добавлением едкого натра до 7,0-7,2 и

осаждают балластные белки сульфатом аммония (из расчета 550 г/л). Осадок отфильтровывают, а из фильтрата добавлением 25,5 мл/л 20%-ной трихлоруксусной кислоты

при О-5°С осаждают цитохром С. Осадок отделяют центрифугированием при 300 об/мин, обрабатывают насыщенным раствором сульфата аммония (500 мл/кг исходного сырья) и снова отделяют центрифугированием. Остаток растворяют в 0,8 л дистиллированной воды и диализируют против физиологического раствора в течение 24 час. К диализату добавляют катиоиит СДВ-ЗТ в Н-форме до рП 2,5-3,0, быстро отфильтровывают, промывая

смолу водой, и постепенно добавляют анионит ЭДЭ-Юп в ОП-формедорН 6,5-7,0. Смолу отфильтровывают, промывая ее водой, и получепный раствор (1,5 л) нагревают в течение I-2 мин при 85°С. Выпавший осадок

отделяют, а фильтрат разводят физиологическим раствором до концентрации цитохрома 2,5 г:л. Полученный раствор стерильно фильтруют и разливают во флаконы по 10 мг препарата. Выход 0,01% от исходного сырья.

Предмет изобретения 3 той, обработки сульфатом аммония, центрифугирования, диализа и отделения осадка, отличающийся тем, что, с целью повышения качества .целевого продукта, сырье обрабатывают (ВОДОЙ, замораживают, размораживают с5 4 последующей обработкой осадка после центрифугирования насыщенным раствором сульфата аммония, далее раствор после диализа обрабатЫ(Вают ионообменными смолами и нагревают при температуре 80-90°С.