СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ИНДИКАЦИИ ТОКСИНА ВОЗБУДИТЕЛЯ ДИФТЕРИИ Советский патент 1973 года по МПК A61K39/00 

1

Изобретение относится к области получения иммуноглобулиновых эритроцитарны.х дяагностнкумов, используемых с целью индикации патх гвн1ных микроорг.аипзмов и их токсинов.

Известен способ получения жидкого эритроц1итар:но о диапмостикума для индикаци-и токсина возбудителя дифтерии, в состав которого в качестве гемосенсигина в.ход1ит противодифтерийная сыворотка. Однако применение нротиводифтеринной сыворотки не га-рантир)ст от получен1ия неспецифических результатов 1 следствие содержа1пия в указанной сыворотке антител к антигенам бактериальной клетки. Кроме того, в процессе хранения жидкого эритрацита-рНого диагностикума возможна элюция гемосанситина с поверхности эритроцитов, срок годности препарата пеаначителен и необходима жесткая ре1ламента и1Я условий его транспортмро-вки.

С целью устранемия указанных иедостатков ::)р итроциты сенсибилизируют ферментироваяиьгм аитмтоксмиом и диагностикум лиофильно ;;ысун1,;|1,ают.

Пример. Для приготовления диагносгикума к 500 мл 6%--ной взвеси формали1Н1И:ЭИроna;H:i bFx та нпз«рава1Н;пых эр.итроцитов бараиа добавляют рав-ный объем дифтерийного аятитоксяна, полученного Путем ферме нтолиза и имлгуносорбции (концентрация белка в рабочем растворе антитоксина составлять

2 мг %, рН 6,4). Смесь выдерживают в течение 30 мин. на водяной бане, при - -37°С, noc.ie чего сенсибилизироваяспые эритроциты осаждают це«трифупирован1 е.1, днажды от),ыва)ог десятикратным 0,4%-н()го раствора Инакти1вироваиной норма.) лон ад1П10й сы4/0 .ил напол)1ИворотКИ и ресуспендируют в

(% ): сахароза - геля следуюи1его состава 20, мисо-пептоииый ,1ьон

- 20, )1ормальная лошади.ная сыворотка - 2,

нейтральны формал:и;1 - 0.2.

ПрИГОТОПЛепП в

() B3i;ecH сенсибил11зироаа-нн, эрит ро:1:гтон ;; иаиолн.игеле разливают по 1 мл в ампулы, замо ражива от при , подвер а1от лиоф:ильному высушпвани о в течение 30-35 час в аппарате КС-30 и гермет зир от ампулы иутем запаиван1ия вакуумом. Для постановки реакции непрямой гемаг1.ч отинац1 и (.) используют ПОЛпстироловые нагнели с луика;М:и. Исследуемым матер. служат бульонные культуры дифтерийных бактерий. Во все лунки (кроме первой) ч ризонтального ряда ианели наливают по 0,5 мл форма.тцнизиpoBaiHiiioro (|)изиологическо о раствора (0,85% раствора хлористого натрия с 0,3% формали ia). В первую и вторую лунш «аливают по 0,5 м/1 исследуемой бульонной культуры; пз второй луик после 1еремецшваН|ИЯ переносят 0,5 мл в третью и т. д. Из последней лунки 3 0,5 мл конечного разведения материала выбрасывают. Вскрывают ампулу с сухям зритроциTapiHbiM диапностикумом, содержимое ампулы рег.идратируют в 2 мл физиологического раствора и добавляют по 0, мл в каждую с разведениямИ исследуемого материала. Панель встряхивают и оставляют Hta 2-3 час при комнатной температуре, после чего учитывают результаты реакции по о-бщеири-нятой методике.10 Титром токсина в исследуемом М1атериале считают маисималыное разведение последнего, положптелЬНО реагирующее с зритроцита1р/ным диагностикумом. 4 Контролем служит поставдовка РкГА с использоваииам в качестве исследуемого материала неи1Н1ф-иц,ирО1ванной питательной среды, ,-г Предмет .изобретения Способ получения эритроцитарного днагиосгикума для инди1ка,ции токсина возбудителя дифтерии путем сенсибилизации зрит/роцитов гемосенситииом, отличающийся тем, что, с целью по)вы:шенця опецифичности, чуествительности и стабильности npenaipaTa, эритроциты сенсибилизируют ферментираванным аншитоксино:м и диапности.кум лиофильно высушивают.