СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦИТОХРОМА Bg Советский патент 1973 года по МПК A61K35/407 

1

Изобретение относится к химйко-фарМйЦеЁгической промышленности, а именно к способам получения цитохрома Bj.

Известен снособ нолучепия микросом из печени сульфатом аммония и центрифугированием до 20 ОООХЯ

Однако этот способ имеет сложную технологию производства.

С целью упрощения технологии производства по предлагаемому способу после центрифугирования к падосадочной жидкости добавляют ацетон, а дальнейшую обработку ведут известным образом.

Пример. 10 кг свежей печени крупно-рогатого скота измельчают в мясорубке и фарш гомогенизируют известным способом с 30 л 0,15М КС1 при 0°С.

Гомогенат центрифугируют при lOOOOX в течение 15 мин. Осадок отбрасывают. К супернатанту приливают при перемешивании охлажденный ацетон (25% от объема сунерпатанта) и смесь центрифугируют при ЮООХЯ в течение 15 мин. Супернатант отбрасывают, осадок суспензируют в 1000 мл 0,15 М КС1 и диализуют против дистиллированной воды 20 час при 0° С.

2

Пойле диализа в растворе определяют Концентрацию белка и добавляют тринсин по 3 мг на каждые 100 мг белка. Смесь инкубируют 16 час., после чего в нее добавляют сульфат аммония (55 г на каждые 100 мл раствора). Осадок, полученный после центрифугирования при 5000Xg 20 мин, отбрасывают. К сунернатапту приливают 20%-ную трихлоруксусную кислоту (ТХУ) до рН 4,2. Смесь центрифугируют прн 5000Xg 15 мин. и осадок растворяют в 250 мл 0,15 М КС1 и диализуют против дистиллировапной воды 20 час. Диализат лиофилизуют.

Выход 500 мг цитохрома BS с 1 кг печени.

Предмет изобретения

Способ нолучепия цитохрома BS путем гомогенизации измельченной печени, центрифугирования гомогената, отделения надосадочной жидкости с последующей днализацией осадка, добавления трипсина, сульфата аммония, высушивання, отличающийся тем, что, с упрощения технологии производства, к надосадочной жидкости добавляют ацетон и дальнейшую обработку ведут известным образом.