СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТИВОТКАНЕВЫХ АНТИТЕЛ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ Советский патент 1973 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к области Л1едицины, в частности к способам определения аутоиммулны.х свойств сЕлворотки крови. Известен способ апре1делеиия протИЪотканевых а«тител в сьюорот1ке крови путем постановки реакции потребления комплемента, в которой результаты реакции оценивались путем сравнения степени гемолиза в 38 пробирках (19 опытных и 19 контрольных). Цель изобретения - повышение точности и чувст|вительност1и способа. Это достигается тем, что контрольную п опытную cbUBOtpoTKH центрифугируют и по разНИце высоты стол1бцом нбгемолиэированяых эритроцитов определяют результат реакции. Призер. Для лроведевия реакции берут 0,2 М.Л исследуемой сыворотки, разделяют ее на 2 порции (опытную и ко-нтролвную) по 0,1 мл. Затем в опытную пробирку вносят 0,1 мл водно-солевого антигегна и 0,3 мл физиологического раствора, а в контрольную пробирку только 0,4 мл физиолотического раствора. О.бе пробирки встряхивают и помещают в термостат при 37° С и выдерживают 30 мин. Затем проводят олределе ие количества комплемента в опытной и контрольной порциях .исследуемой сыворотки с помощью гематокрит1ных :пробирак. В 2 гематокритные пробирки (0|ПЫтную и контрольную) вливают ino 0,7 .ил гемолитической систе-мы, .приготовленной из строго стандар ти 3 Ир ов анн о и ,ф ото етри ч еск и м оп особ о м 2,5о/о-ной взвеси бараиьих эритроцитов. В эти же пробирки доба1вляют по 0,1 мл разведенной сыворотки соответственно из олытной и контрольной пробирок. Содвржи1мое гематокритных проб1ирок неремещивают, после чего их помещают в термостат на 15 мин (температура 37° С), а затем 15 иа/н центрифугируют при 3000 . Негемолизирооанные эритроциты прн центрифугировании оседают на дно градуированного капилляра. Высота этого столбика определяет степень наступившего гемолиза. Измеряется в делениях, нанесенных на ка.пилляры. Разница 1между высотой столбпжа осевщих эритроцитов в опытном и контрольном капиллярах определяет цифровой результат реакции. При различии в О-5 делений реакцию считают отрицательной, при разнице в 5-10 делений реакцию считают слабоположптельной. при разнице свыше 10 делетшй - считают положительной. Результат реакции выражают в цифрах. Таким образом, предлагаемый способ определепня антител в сыворотке крови в такой модификации позволяет провести иссле3

дование, используя значителыно меньшее количе;ст)во сыворопки. Всле|дствие этого забор кроБИ для исс ледов аи и я можно П роизводить из пальца, а не из вены. Потребность в меньшем объеме сыворотки для реащии делает возаюжным приимененйе ее при аксперимеиталыных ис1слеиова1ния,х, 1Н роводимы.х на мелких лабораторных животньи.

Учет результатов реакции при предлагаемом способе лишен момента оу;бъакт1№Вного определения 1-ой пробирки с ЮО /о-ным гемолизом, а производится в цифровых едииидах, что позволяет легко сравнивать результаты

различных опытов в количественном отношении.

П р е |Д I.M е т и зобретения

Способ определеНИЯ лротивот.каневых антител в сьиворотке крови тутем постановки реакции потребления комплемента, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и чувст вительности способа, контрольную и олытную сыворотки центрифугируют и по разнице высоты столбцов иегемолизироваиных эритроцитов определяют результат реакции.