ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА ACTINOMYCES LAVENDOFUSEUS 1586 Советский патент 1974 года по МПК C12N1/14 C12P17/18 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и «асается получения нового штамма, используемого для получения биотина. Известны культуры микроорганизмов, способные накапливать внеклеточно биотин при глубинном культивировании. Предлагаемый штамм актиномицета при росте на синтетических средах несложного состава и в оптимальных условиях его культивирования накапливает в достаточно значительном количестве внеклеточный биотин. Данный штамм актиномицета выделен из дерново-иодзолистой садовой почвы. Штамм актиномицета Actinomyces lavendofuseus 1586 имеет следующую характеристику. Морфология. Прямые, длинные спороносцы с примитивными спиралями; имеют 2- 3 слегка растянутых завитка. Споры овальные, продолговатые, с гладкой оболочкой; размер 1,1 - 1,3X0,8 мк. Синтетическая среда. На среде Чапека колонии бесцветные; воздушный мицелий розовато-серый, цвета лаванды. Органическая среда. На агаризованНЫХ масо-лептонной, картофельной и мучной средах культура кремового цвета, воздушный мицелий - серо-розоватый, среда буреет. Сахара. Ассимилирует глкжозу, фруктозу, сахарозу, арабинозу, ксилозу; слабее - рамнозу, рафинозу, маннит и инозит. Среда Треснера - Данга чернеет. Тиразиназа отрицательная. Меланоиды образуются. Желатину не разжижает. Нитраты восстанавливает до нитритов. Пептонизирует .молоко. Гидролизирует крахмал. На клетчатке дает слабый рост. Антагонистические свойства (при выращивании культуры на рыбной и мучной средах) проявляются слабо. Угнетает Мусоbacterium specium и Actinomyces violaceoruber; не угнетает другие граммположительные и граммотрицательные бактерии и другие актиномицеты; не угнетает также клубеньковые бактерии, азотобактер, дрожжи и микроскопические грибы. Для ферментации используют жидкую синтетическую среду Чапека. Состав среды следующий, г/л: NaNOs, 2,0; К2НРО4 1,0; КС1 0,5; MgSO4-7H20 0,5; MnCl2-4H2O 0,001; FeSO4-7H2O 0,001; ZnSO4-7H2O 0,001; глюкоза 20,0. 6,6-7,2; оптимальный рН-6,8. рН среды Среда приготавливается на водопроводной воде. После стерилизации в среду вносят посевной материал в виде суспензии спор в стерильной воде в количестве 10% от объема среды. Для получения посевного материала культура выращивается на крахмало-аммиачной среде в течение 6 дней при температуре 26+ГС, после чего опоры собирают и суспендируют в стерильной воде. Температура ферментации от 25 до 32°С, оптимум 28±1°С. Прорастание спор в начальный период глубинной ферментации может быть ускорено путем введения в среду мясной воды (отвара) в количестве 1 мл на 1 л среды. На-копление биотиНа в среде «ачинается с 3-4 дня ферментации, а в дальнейшем происходит постепенно и достигает максимум на 7-мые сутки .культивирования. В лабораторных условиях культивирования в колба-х (750 мл, среда 50 мл) на качалке (220 об/мин) в среде накапливается до 90 мгк/л биотина. Количество биотина определяют или микробиологическим методом, или хроматографичеоки. Предмет изобретения Штамм актиномицета Actinomyces lavendofuseus 1586. М-ор ф о л оги я. Опоры овальные, продолговатые, с гладкой оболочкой, размером 1,1 - 1,3X0,8 мк. Опороносцы 1прямые, длинные с примитивными спиралями, имеют 2-3 слегка растянутых завитка. Культуральные и биохимичеСКие признаки. Синтетическая среда Чапека - колонии бесцветные, воздушный мицелий розовато-серый, цвета лаванды. Органическая среда. На агаризованных мясо-пептонных, картофельной и мучной средах культура кремового цвета, воздушный мицелий - серо-розоватый, среда буреет. Среда Треснера-Данга - чернеет. Ассимилирует глюкозу, фруктозу, сахарозу, арабинозу, ксилозу; слабее - рамнозу, рафинозу, маннит и инозит. Тиразиназа - отрицательная, меланоиды - образует. Желатииа - разжижает. Нитраты - восстанавливает до нитритов. Молоко - пептонизирует. Крахмал - гидролизирует. Антагонистические свойства (при выращивании культуры на рыбной и мучной средах) проявляются слабо. Угнетает Mycobacterium specium и Actinomyces violaceoruber. Не угнетает другие граммположительные и граммотрицательные бактерии и другие актиномицеты, не угнетает клубеньковые бактерии, азотобактер, дрожжи и микроскопические грибы.